突变型hIL-2在Pichia pastoris中直接诱导表达条件研究

为了简化突变型白细胞介素-2（mutant variant human interleukin-2,MvIL-2)在毕赤酵母中的表达工艺,作者参照传统方法,设计了一种新的表达方法-直接诱导法,在该实验中,在摇瓶条件下,对OD600,诱导时间这两个重要的参数进行了重点研究,并对表达蛋白的抗原性和生物学活性进行鉴定,结果表明：在pH6.0,温度30℃,转速280r/min的条件下进行培养,菌体密度（OD600）达到40时直接在发酵液中加入1%的甲醇进行诱导表达,间隔24h补充同上浓度的甲醇,96h收集发酵液,以相同体积的培养基最后获得的总目的蛋白来比较,直接诱导法的产量是传统诱导法产量的5倍,Western blot的抗原性检测和MTT生物学活性实验证明表达的蛋白是特异性蛋白,MTT法测得突变型IL-2具有4倍于同样在毕赤酵母中表达的天然IL-2的生物活性。