细菌内同源重组法构建靶向Survivin 的腺病毒载体的研究

目的:研究细菌内同源重组法构建靶向Survivin的腺病毒载体及其体外扩增表达。方法:将survivin基因克隆至穿梭质粒载体中,特异性酶切后回收、连接、转化,构建负载survivin片段的重组腺病毒载体。提取重组病毒基因酶切鉴定后,包装成病毒,并扩增到所需滴度。行Western blotting鉴定,观察重组腺病毒载体在真核细胞的表达。结果:(1)重组穿梭质粒的Mlu I酶切鉴定结果显示,酶切结果均与相应的载体及目的片段的大小相符合,基因测序结果基本一致。(2)凝胶电泳产生了两条大约15 kb和8.5kb的片段,由图2可知重组腺病毒质粒酶切充分完全,且回收率较高。(3)重组腺病毒载体转染AD293细胞24 h后已出现细胞病变效应,病变细胞细胞核变大。(4)D260/OD280的值为1.92,表明重组腺病毒纯度较高。(5)AD293细胞病毒上清中有能与抗Survivin单抗反应的蛋白,其相对分子质量与理论值相吻合,阴性对照组无对应条带出现。结论:本方法成功构建表达了含Survivin的重组腺病毒载体,为进一步进行Survivin基因功能的研究提供了实验基础和理论支持。     

三七蜜片辅助降血脂及抗氧化功效研究

目的：考察三七蜜片对大鼠辅助降血脂及体内抗氧化功效的作用。方法：参照保健食品辅助降血脂及抗氧化功能评价方法,选用健康大鼠进行混合型高脂血症以及乙醇致大鼠氧化损伤模型构建,给药30 d后分别对血清 TC、TG、LDL-C、HDL-C以及肝脏GSH、MDA、蛋白质羰基和 SOD活力进行检测。根据保健食品评价技术规范进行最终结果判定。结果：三七蜜片样品对混合型高血脂大鼠的血脂具有一定的降低作用;对于血脂升高相对较低的大鼠高胆固醇血症模型,三七蜜片样品对该模型大鼠血清中的TC、LDL-C具有显著的降低作用,对TG无明显降低作用;三七蜜片低、中、高剂量均能明显提升模型大鼠肝脏GSH含量,中、高剂量均能明显降低模型大鼠肝脏 MDA含量,低、中、高剂量均无明显降低模型大鼠肝脏蛋白质羰基含量,提升 SOD 活力的作用。结论：在本实验剂量条件下三七蜜片具有一定辅助降血脂及抗氧化功效。     

CT灌注与CT血管成像对蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛诊断价值的Meta分析

目的:采用Meta分析法比较CT脑血流灌注(computer tomography perfusion,CTP)与CT血管造影(computer tomography angiography,CTA)在蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后脑血管痉挛(cerebral vasospasm,CVS)的诊断价值。方法:以Sino Med、中国期刊网、维普数据库等为国内文献的主要来源;Cochrane图书馆、Medline数据库及Ovid数据库、Elsevier和Springer数据库等作为国外文献的主要来源。发表年限为1999年至2014年。按照Cochran协作网推荐的诊断试验纳入标准选取文献,并提取纳入研究的诊断信息。统计分析采用Rev Man 5.0软件,并同时考察纳入文献间的异质性,再根据异质性结果选择相应的效应模型。对所纳入的研究予以加权定量合并,得出合并效应量,计算其95%可信区间,并对合并效应量进行假设检验。结果:按照纳入标准共获取文献6篇,其中有关CTP的3篇(多层螺旋CT),CTA为4篇,均有金标准DSA比较;前瞻性研究2篇,回顾性研究4篇。各组研究均不存在异质性,按照固定效应模型对纳入文献行汇总分析。结果显示,对于蛛网膜出血后脑血管痉挛、CTP诊断的合并效应量估计值为1.59,95%可信区间为0.94-2.69;CTA合并效应量估计值为1.45,95%可信区间为1.18-1.77。结论:对于蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛,CTP诊断的准确性高于CTA诊断。