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亚比棉基因组原位杂交及核型分析 总被引:4,自引:0,他引:4
亚比棉异源四倍体是山西农业大学棉花育种组于上个世纪80年代用A染色体组亚洲棉(Gossypium.arboreum)(迁西小黑籽)与G染色体组野生棉比克氏棉(G.bickii)杂交成异源二倍体后,又经过加倍而获得的.亚比棉异源四倍体不仅育性得到恢复、结铃正常,而且成功地将比克氏棉的优异性状--种子腺体延缓形成转育到亚比棉中.这为实现棉花综合利用和提高抗虫性创育了新的育种材料.在随后的多年中,山西农业大学棉花育种组对亚比棉异源四倍体进行了广泛的细胞形态学研究,对其核型做了分析.然而,仅依据形态学和普通的核型图像,还不能确定该异源四倍体棉种中比克氏棉G染色体(亚)组在核型中的表现.该文以比克氏棉gDNA为探针,亚比棉异源四倍体根尖体细胞染色体为靶细胞染色体,封阻材料为亚洲棉(迁西小黑籽),进行亚比棉基因组原位杂交(Genome in situ hybridization,GISH)及核型分析.从获得的图像中可以清晰地发现有52条染色体,其中有/无杂交信号的各一半,这直观地证实了人工复合亚比棉杂交种确为异源四倍体,而且是双二倍体.A亚组与G亚组染色体长度存在交替排列.亚比棉异源四倍体基于GISH图像的核型公式为2n=4x=52=46m(4sat)+6sm(4sat).A亚组和G亚组染色体上各有2对随体.G亚组染色体中至少有5对双重显色明显的染色体,意味着可能有A亚组染色体的交换,而A亚组染色体中只观察到或多或少的探针红色荧光信号,由于分辨率不够而难于定量分析.进一步以45SrDNA为探针,以鲑鱼精DNA作为封阻DNA,对亚比棉异源四倍体进行45SrDNA-FISH,实验表明,亚比棉异源四倍体有14个NOR(核仁组织区)信号,说明亚比棉异源四倍体有14个随体,即7对随体.比克氏棉对亚洲棉的GISH结果显示,在有亚洲棉DNA封阻的条件下,亚洲棉靶细胞染色体无任何杂交信号,说明比克氏棉与亚洲棉染色体之间不存在较大的同源或相似序列. 相似文献
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放射免疫检测是一种简便而十分灵敏的基因文库筛选方法,在某些应用中,优于DNA探针杂交筛选技术。但目前国内书刊中有关这一技术的详细操作程序介绍甚少。本文在详细地介绍了rgtll表达型文库的抗体筛选基础上,还就实验过程中容易出现的问题及可能原因和具体解决方法进行了详尽的讨论。 相似文献
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目的:克隆肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因片段(114~281氨基酸残基)并构建原核表达载体。方法:取健康人外周血提取总RNA,设计合成引物并引入EcoR I和Xho I酶切位点,RT-PCR扩增TRAIL基因的胞外区片段,克隆入原核表达载体pGEX-6P-1中,经双酶切、PCR及测序鉴定阳性克隆。结果:从外周血cDNA中扩增出501 bp的目的片段,测序结果证实成功构建重组质粒pGEX-6P-1/TRAIL。结论:成功构建TRAIL基因的原核表达载体pGEX-6P-1/TRAIL,为肿瘤细胞的凋亡研究提供理论依据。 相似文献
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目的:观察奥沙利铂联合热疗对人结肠癌细胞SW480增殖及凋亡的影响,确定联合用药的效果,为临床方案提供参考。方法:采用MTT(四唑盐)法检测热疗、奥沙利铂及联合用药对细胞增殖的影响;瑞士吉姆萨染色法观察细胞形态;流式细胞仪检测细胞凋亡和周期;Western blot检测Bax、Bcl-2以及Caspase8蛋白表达量变化;q PCR检测Bax、Bcl-2以及Caspase8 m RNA的积累。结果:热疗联合奥沙利铂可以显著抑制细胞增殖,与对照组相比,热疗组、化疗组、联合组细胞凋亡率分别为16.2%、20.5%和36.1%,具有显著性差异(P0.01);细胞学形态中,热疗组细胞发生皱缩,化疗组细胞膜破裂;化疗将细胞阻滞在G2/M期,热疗和联合组将细胞阻滞S期;Western blot和qPCR显示Bax/Bcl-2比值上升,Caspase8表达量增加,联合组三种蛋白的表达量均与对照组具有显著性差异(P0.01)。结论:热疗联合奥沙利铂可以显著促进细胞凋亡,提高治疗效果,为结肠癌的治疗提供参考。 相似文献
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干旱是影响农业生产的主要因子之一。根际促生菌可有效减轻干旱对植物的伤害,但其中的作用机理仍需探究。以接种Burkholderia sp. GD17菌和未接种的黄瓜幼苗为材料,经干旱处理(撤水7 d)后,分析其生理生化和相关基因表达,以此探究GD17菌促生拮抗的作用机理。结果表明,接菌5 d的植株根中GD17菌数量达到6.2×106 CFU/g鲜重,直至第15天撤水处理时仍维持这一数量级。正常浇水的加菌植株地上部鲜重与干重分别较未加菌对照高39%和36%;在干旱胁迫下,分别高38%和32%,叶片相对含水量高8.5%。干旱胁迫下,加菌叶片丙二醛和电解质渗透率分别较未加菌的低45%和26%。正常浇水的加菌植株叶片超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶活性均显著低于未加菌植株的水平,而在干旱胁迫下,加菌植株的3种抗氧化酶活性明显高于未加菌的。干旱显著提高叶片的脯氨酸含量,其中,加菌植株的幅度更大。正常浇水的加菌植株净光合速率高于未加菌植株,但气孔导度、胞间二氧化碳浓度和蒸腾速率没有明显变化,但在干旱条件下,这些参数在加菌植株中的值显著高于未加菌植株。叶绿素荧光成像进一步显示,接种GD17可有效... 相似文献
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植物转录因子 WRKY家族的结构及功能 总被引:5,自引:0,他引:5
WRKY家族结构上的共同特点是:至少含有一段60个左右的高度保守的氨基酸序列,称为WRKY区,其中有一七肽WRKYGQK存在于所有的成员中,故而得名.WRKY蛋白通过与其目标基因启动子中的顺式元件(T)TGAC(C/T)结合调节该基因的表达,参与(或可能参与)植物对病原体的防卫反应、非生物胁迫反应以及植物的某些生理过程.该文介绍了植物转录因子WRKY家族的结构及功能的研究进展. 相似文献