Eph-ephrin介导反向信号传递的研究进展

双向信号传递是细胞间通讯领域中新近阐明的机制,酪氨酸激酶受体-配体(Eph-ephrin)介导的双向信号传递是此机制中的一个重要代表.Eph酪氨酸激酶家族受体及其配体ephrin家族成员是在神经发育、血管新生等方面起重要作用的分子,通过Eph向细胞内传递的信号称为正向信号,通过其配体ephrin的信号称为反向信号.Ephrin家族又可根据分子结构分为2个亚家族,其中ephrinB为跨膜蛋白,可通过酪氨酸磷酸化依赖和PDZ结合结构域介导2种方式向胞内传递反向信号,活化FAK、JNK、Wnt等信号通路,ephrinA为糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白,也具有反向信号传递功能.     

白血病细胞系来源的P2X7受体的功能研究

P2X7受体是ATP门控的离子通道。从白血病细胞系J6-1细胞中扩增P2X7受体编码区全序列,克隆到pTARGET真核表达载体,经DNA序列分析后转染Ramos细胞,获得稳定表达细胞株;应用RT-PCR、Westernblot和流式细胞术检测P2X7受体在Ramos中的表达;荧光分光光度计检测P2X7受体介导的胞内钙离子浓度变化。结果显示,J6-1细胞来源的P2X7受体在第559位有一个A→G的有义突变,导致Asn187→Asp187,可在Ramos细胞中表达,在特异性激动剂BzATP作用下可引起胞内钙离子浓度的升高,但所需激动剂浓度高于常规浓度。     

人白血病细胞系P2X7受体的表达及其介导的细胞内钙浓度变化

采用半定量RT-PCR和流式细胞术,在基因和蛋白水平研究了白血病细胞系U937、HL60和Ramos细胞P2X7受体的表达。荧光染料Fura-2／AM负载后,用荧光分光光度计测定P2X7受体激动剂三磷酸腺苷(adenosine 5′-triphosphate,ATP)和苯甲酰苯甲酸ATP(2′,3′-O-(4-benzoyl)benzoyl-ATP,BzATP)刺激前后细胞内钙离子浓度的变化,以确认其功能。结果表明：U937和HL60细胞系表达P2X7受体的mRNA和蛋白,Ramos不表达;在激动剂的刺激下,可引发U937和HL60细胞胞内钙浓度的显著升高,但对Ramos没有作用。当去除胞外钙离子时,ATP和BzATP刺激均不能引起U937和HL60细胞胞内钙离子浓度的升高。提示U937和HL60细胞表达P2X7受体的基因和功能蛋白,Ramos细胞则不表达该受体。     

人源抗菌肽LL-37

LL-37是迄今在人体中发现的抗菌肽cathelicidin家族中的唯一成员,也是人体内唯一的双亲性α螺旋结构的抗菌肽. LL-37在人体的血液细胞和上皮细胞中广泛分布,具有广谱抗菌作用.抗菌活性依赖其螺旋构象的形成,通过“地毯样”机制杀灭细菌. LL-37有中和内毒素的作用,能与LPS和CD14结合,中和LPS的生物活性,还能利用formyl peptide receptor-like 1 (FPRL1) 作为受体介导趋化作用,招募免疫细胞到感染部位,清除病原物. 很多感染性疾病都与LL-37低表达或功能失活有关. LL-37是一种多功能的抗菌肽,有开发成为具有抗菌和增强免疫力双重作用药物的潜力.     

冀中拗陷早第三纪孢粉组合及地质时代讨论

本文在对700余口井的30000余块样品的分析数据进行系统整理,结合近年来地层研究最新成果,对冀中拗陷早第三纪孢粉化石群基本特征进行了系统研究,划分出十个组合带和十二个组合亚带,使之与精细地层研究工作相适应,从而更有地服务于生产实践和深入地进行地区地质分析。在参考构造,沉积、古气候、海平面变化,以及其它门类化石资料的基础上,对孢粉化石群产层的地质时代属性,以及下第三系内部的几条重要年代地层界线进行了讨论。同时,还对我国范围内其它区域相关问题进行了讨论。本文首次在“阶”的层次上,较系统地将中国陆相盆地下第三系与国际年代地层序列接轨。     

P2X受体研究进展

P2X受体为配体门控离子通道,属于P2受体家族。P2X受体的配体是ATP,胞外ATP结合时P2X受体通道打开,允许阳离子(Na 、Ca2 等)通过。目前已克隆了7个哺乳动物的P2X(P2X1-7)受体,并阐明了它们的药理学特性。天然P2X受体可以组装成同型或异型聚合体,形成功能性离子通道。对有关P2X受体的结构、分布、功能、生物物理学特性等研究的最新进展进行了综述。     

血源细胞系中CD39的表达和功能分析

细胞外ATP通过激活细胞膜上核苷酸受体介导细胞间通讯。CD39是一个钙,镁离子依赖的ATP双磷酸酶,其对ATP信号的调节机制尚未完全阐明。采用半定量RT．PCR、ABC免疫酶标和流式细胞术以及荧光素／荧光素酶法,研究了七个血源细胞系中CD39的表达和功能。结果表明,不同细胞中CD39的表达水平差异显著：在J6-1和LCL-H中高水平表达,在HL60中低水平表达,而在Namalva、Jurkat,U937细胞中极低水平表达．CD39的表达与这些细胞膜上ATP酶活性、胞外ATP的基础水平结果一致,提示CD39是这些细胞膜上ATP酶活性的主要来源,可能在调节P2受体介导的细胞间通讯中起重要作用。     

干细胞因子逆转录病毒表达载体的构建及体外性质研究

目的通过逆转录病毒介导两种类型人干细胞因子在NIH3T3细胞中稳定表达,并研究它们对白血病细胞的作用。方法用DNA重组技术构建并鉴定可溶型及膜结合型干细胞因子的重组逆转录病毒表达载体MSCV—PGK—GFP—sSCF、MSCV—PGK—GFP—mSCF,与空载体对照MSCV—PGK—GFP分别转染Phoenix细胞包装病毒,并感染NIH3T3细胞,流式分选术获得3种阳性细胞,CCK8法分别检测与其共培养的K562细胞的增殖情况。结果成功构建了sSCF、mSCF逆转录病毒表达载体;经Phoenix包装的重组及对照逆转录病毒成功感染NIH3T3细胞,获得了稳定表达细胞株NIH3T3-S、NIH3T3-M和对照细胞株NIH3T3-V。共培养中NIH3T3-S、NIH3T3-M均可促进K562细胞的增殖,且在低血清条件下,NIH3T3-M的作用高于NIH3T3-S。结论可溶性及膜结合SCF分别通过旁分泌和并置性作用促进白血病细胞的增殖。     

巨噬细胞的固有免疫记忆研究进展

根据免疫效应机制和作用特征,通常把免疫分为固有免疫和适应性免疫两种类型。长久以来,免疫学界普遍认为只有适应性免疫存在记忆特性,而近年的研究表明固有免疫也存在记忆现象。经过刺激的固有免疫细胞,通过表观遗传重编程和细胞代谢的改变获得记忆性质,在二次刺激下表现出增强或减弱的免疫反应,这种现象被定义为"训练免疫"或"固有免疫记忆"。巨噬细胞作为重要的固有免疫细胞,也具有免疫记忆性质,在机体免疫中发挥重要作用。固有免疫记忆是一个崭新的概念,它拓宽了免疫记忆的定义,为免疫反应的研究提供了更加全面的视角。该文主要综述巨噬细胞固有免疫记忆的特征、产生机制以及在疾病中的作用。