大菱鲆白化相关基因(DEN-1、DEN-2)的分离鉴定及特征分析

应用mRNA差异显示技术,对比研究正常与白化大菱鲆有眼侧皮肤组织,克隆差异表达基因,经测序,RT-PCR验证,差异表达基因片段DEN-1(GenBank登录号:DQ886390)与DEN-2(GenBank登录号:DQ886391)均在白化大菱鲆有眼侧皮肤组织中下调表达;通过BLAST检索发现,DEN-1与GenBank中的斑马鱼和牛的类似尿苷二磷酸-葡萄糖:糖蛋白葡糖基转移酶(UGGT)基因、与挪威鼠类似尿苷二磷酸-葡萄糖:神经酰氨葡糖基转移酶1(Ugcgl1)基因有较高同源性;DEN-2与原鸡、斑马鱼、人、挪威鼠、家鼠和狗的眼缺乏同源框4(eya4)基因的同源性均较高。采用相对定量RT-PCR对正常鱼有眼侧皮肤(N1)、白化鱼有眼侧皮肤(A1)、正常鱼无眼侧皮肤(N2)、白化鱼无眼侧皮肤(A2)进行表达谱分析,以内参β-actin基因分别对DEN-1和DEN-2表达量进行标准化的光密度扫描显示:DEN-1和DEN-2在4种皮肤组织中有相似的表达模式,即表达量:N1>N2≈A2>A1。电子延伸将DEN-2延伸为497bp的片段,该延伸片段与多种动物的eya4基因在核酸和蛋白水平均有很高同源性。本研究对DEN-1和DEN-2的不同组织器官和不同发育阶段的电子表达谱分析,将对其进一步研究提供有价值参考。     

仿刺参多糖抗肿瘤及对荷瘤小鼠免疫调节作用

目的 观察仿刺参多糖(AJPS)抗肿瘤及免疫调节作用.方法 采用MTT法检测AJPS对人肝癌HepG-2细胞抑制率;以Hca-F肝癌小鼠为模型,采用MTT法、放免法测定荷瘤小鼠细胞免疫指标.结果 AJPS抑制HepG-2细胞生长,抑制小鼠移植瘤生长;增强脾淋巴细胞和巨噬细胞活性,促进TNF-α和IL-2的产生.结论 AJPS具有对HepG-2细胞的直接杀伤作用;AJPS对荷瘤小鼠有免疫调节活性,在肿瘤的免疫治疗中发挥作用.     

中国十个地理品系卤虫同工酶的研究

本文采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳法,对中国十个不同地理品系卤虫的十种同工酶进行了研究。分析了编码七种多态酶的19个座位、42个等位基因,用Nei(1972、1975)的方法计算各地理品系卤虫的遗传相似系数、遗传距离和平均杂合度并进行聚类分析。实验和分析结果证明十个不同地理品系的卤虫可分为A.parthenogenetica和有性品系A.sp.两大姊妹种;十种同工酶中三种酶为单态酶,七种为多态酶;雌雄个体无电泳差异。     

卤虫的生物学研究

对卤虫的生物学特征和培养方法作了介绍。特别是对卤虫的经济价值分类地位、种群遗传学、孤雌生殖卤虫的生殖机制、种群的分子群体遗传学及进化、种群同工酶、种群的分子生物学分析和营养成分等方面的研究成果进行了综述。     

中国孤雌生殖卤虫中多倍体同工酶基因的表达

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳地,对中国孤雌生殖卤虫１０个品系的２６个多倍体单个体克隆的９种同工酶的基因表达情况、种群遗传结构以及进化关系进行了研究。在研究的９种同工酶中ＬＤＨ、６ＰＧＤＨ、ＧＤＨ为单态酶、ＭＤＨ、ＰＯＤ、ＥＳＴ、ＡＣＰ、ＡＬＰ和α－ＡＭＹ为多态酶。ＭＤＨ、ＰＯＤ重复基因不表达。为功能二倍体,ＥＳＴ、ＡＣＰ、ＡＬＰ和α－ＡＭＹ重复基因表达。,以遗传相似系数所做的聚类分析结果可以明显表     

大鼠心肌梗死后差异蛋白质组学分析

目的：建立大鼠心肌梗死后蛋白表达变化谱,以进一步了解心肌梗死后心肌细胞重塑产生机制。方法：通过结扎大鼠冠状动脉左前降支建立急性心肌梗死模型,利用蛋白质双向凝胶电泳技术（two-dimensionalgelelectrophoresis,2-DE）分离心肌总蛋白,采用PDQuest7.3.1软件比较分析,获得差异表达蛋白总体变化趋势。进一步通过蛋白免疫印记技术（Western-blotting）检测碱性成纤维生长因子（Basefibroblastgrowthfactor,bFGF）在心肌梗死后的表达变化。结果：成功建立了大鼠急性心肌梗死模型;2-DE结果表明：以假结扎组为对照,梗死3天组有27个蛋白显著上调,18个蛋白显著下调,7个蛋白表达明显差异（ratio〉5）。进一步研究发现梗死区心肌组织bFGF表达明显升高。结论：心肌梗死后蛋白表达变化趋势的探讨为心室重塑机制研究提供线索。     

香螺精子发生及精子超微结构

本文采用透射电镜技术对香螺(NpatunedecumingiCrosse)精子发生过程进行了观察。结果表明,精原细胞胞质中含有大量的线粒体;初、次级精母细胞的细胞核和大量的线粒体呈极性分布;精子细胞分化过程中,细胞核形态、核内物质以及线粒体的形态发生显著变化;细胞核的核质由不均匀颗粒状浓缩成纤丝状,再浓缩成细线形,最后呈致密均匀状态,细胞核由近圆形伸长为粗线形,具有核后窝;在细胞核后端有8个膨大的线粒体,由卵圆形变为螺旋形,弯曲盘绕在轴丝外部,形成精子的中段;根据细胞核和线粒体的变化特点,将精子形成分为早、中、后三个时期。香螺典型性精子属于进化型,头部呈线形,中段加长,糖原颗粒包围轴丝构成主段。在精子发生过程中,细胞质内没有发达的高尔基复合体和前顶体池,没有观察到香螺精子的顶体。在成熟个体的精巢内,同时存在不具有受精能力的畸变精子。     

革兰阴性菌结合蛋白(Toll/GNBPs)和肽聚糖识别蛋白(PGRPs)在无脊椎动物先天免疫应答中的作用

由于无脊椎动物没有专一的特异性免疫系统,所以先天免疫系统是其抵御外来病原入侵的唯一方式,无脊椎动物的先天免疫系统包括细胞和体液防卫机制,这2种机制可被模式识别受体(PRR s)分子所触发,PRR s可与微生物表面特异的物质识别并结合,通过结合,这些PRR s通过包囊和噬菌作用直接杀死微生物,或者通过丝氨酸蛋白酶级联反应和细胞内免疫信号途径间接引发不同的防御反应以抵御病原微生物。革兰阴性菌结合蛋白(GNBPs)和肽聚糖识别蛋白(PGRPs)作为无脊椎动物先天免疫系统中的一类重要模式识别受体,在识别微生物病原并引发一系列级联反应做出免疫应答过程中起重要作用。本文主要对GNBPs和PGRPs在无脊椎动物中的研究进展及其在先天免疫应答过程中的作用机制进行综述。     

双歧杆菌生态制剂在中国对虾育苗生产中的应用

本文利用（双歧杆菌）生态制剂作为中国对虾育苗过程中各阶段幼体的饲料添加剂,用于中国对虾育苗生产过程进行了研究。实验结果表明,在中国对虾育苗生产过程中应用生态制剂有利于提高各阶段幼体对疾病的免疫力,促进提前变态,减少死亡量,对中国对虾幼体的各期发育均无异常影响。     

Fucoidan对巨噬细胞RAW264.7的免疫调节作用

目的 观察褐藻多糖硫酸酯（Fucoidan）对巨噬细胞RAW264.7体外吞噬活性、细胞因子TNF-α和IL-6分泌,以及Toll样受体4（TLR4）mRNA表达的影响。方法 实验分对照组,Fucoidan高、中、低剂量组（浓度分别是200、400和800 μg/mL）。药物处理6~48 h后,MTT法检测RAW264.7细胞活力;中性红比色法检测细胞吞噬活性;ELISA法检测培养上清中TNF-α和IL-6的分泌水平;实时定量PCR检测Toll样受体4（TLR4）mRNA表达量。结果 与对照组相比,Fucoidan显著增强RAW264.7细胞代谢活力和吞噬能力（P＜0.01）,增加TNF-α和IL-6的分泌,上调TLR4的表达,呈剂量依赖关系。结论 Fucoidan可上调TLR4表达,增强巨噬细胞代谢和吞噬活性,增加TNF-α和IL-6的分泌,具有潜在的调节免疫作用。