接合转移诱动系统在遗传分析和体内基因操作中的应用

接合转移诱动系统在遗传分析和体内基因操作中的应用赵巍,张成刚,蔺继尚（中国科学院沈阳应用生态研究所,１１００１５）细菌间ＤＮＡ的转移主要有转化、转导、接合和原生质体融合等几种形式。接合是通过供体菌和受体菌完整细胞间的直接接触,而传递大段ＤＮＡ的方法,...     

滑膜炎颗粒联合玻璃酸钠治疗创伤性膝关节滑膜炎的疗效及对患者血清炎症因子水平的影响

目的:探讨滑膜炎颗粒联合玻璃酸钠治疗创伤性膝关节滑膜炎的疗效及对患者血清炎症因子水平的影响。方法:选取2015年2月～2017年12月期间我院收治的创伤性膝关节滑膜炎患者216例为研究对象。根据随机数字表法将患者分为对照组(n=108)与研究组(n=108)。对照组患者给予玻璃酸钠治疗,研究组则在此基础上联合滑膜炎颗粒进行治疗,两组均治疗5周。比较两组治疗5周后(治疗后)的临床疗效及治疗前后血清白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)水平,采用视觉模拟量表(VAS)评价患者治疗前后膝关节疼痛程度,美国特种外科医院量表(HSS)评价患者治疗前后膝关节功能,同时观察两组治疗期间不良反应发生情况。结果:研究组患者总有效率为92.59%(100/108),高于对照组患者的78.70%(85/108)(P0.05)。两组患者治疗后IL-6、TNF-α以及IL-1β水平均较治疗前降低,且研究组低于对照组(P0.05)。两组患者治疗后VAS评分较治疗前降低,且研究组低于对照组,HSS评分较治疗前升高,且研究组高于对照组(P0.05)。两组患者不良反应发生率对比差异无统计学意义(P0.05)。结论:滑膜炎颗粒联合玻璃酸钠治疗创伤性膝关节滑膜炎安全有效,可显著改善患者血清炎症因子水平以及膝关节功能,并减轻患者疼痛程度,具有一定的临床应用价值。     

综合护理干预对冠心病患者治疗依从性及疗效的影响

目的:探讨综合护理干预对冠心病患者治疗依从性及疗效的影响;方法:将我院2011年1月至2011年5月收治的82例冠心病患者随机分为实验组和对照组两组,每组各41例,对照组患者给予常规护理,而试验组患者则在此基础上,实施综合护理干预,观察两组患者治疗依从性、对护理工作的满意度、住院时间和费用、患者主要照顾者关于冠心病二级预防知识掌握情况的差异.结果:试验组患者治疗依从性较对照组显著增高,差异具有统计学意义(P＜0.05);试验组患者对护理工作的满意度较对照组显著增高,差异具有统计学意义(P＜0.05);试验组患者的主要照顾者对冠心病二级预防知识掌握率较对照组显著增高,差异具有统计学意义(P＜0.05);试验组患者住院时间和费用较对照组有所降低,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:对试验组实施整体护理干预后,能有效的提高患者治疗依从性,增加对护理工作的满意度,提高患者的主要照顾者对冠心病二级预防知识掌握率,降低了患者的住院时间及住院费用.     

葛根素对胃蛋白酶部分性质的影响

考察葛根素对胃蛋白酶的抑制作用,并通过紫外光谱法和荧光光谱法研究葛根素与胃蛋白酶的结合方式。以1/v对抑制剂量用Dixon作图法得出ki值为0.51×103mol/L,抑制剂类型为非竞争性抑制。葛根素与胃蛋白酶分子结合形成稳定缔合物,从而改变后者分子构象,使胃蛋白酶的紫外吸收差谱迅速增强,特征荧光峰产生静态淬灭。     

粪臭素对胃蛋白酶部分理化性质的影响

采用紫外光谱法和荧光光谱法研究了粪臭素与胃蛋白酶的结合作用。观测到粪臭素使胃蛋白酶的紫外吸收峰增强,特征荧光峰淬灭。Stern-Volmer淬灭曲线显示,粪臭素对胃蛋白酶的荧光淬灭很可能是一个单一的静态淬灭过程。     

人巨细胞病毒即刻早期蛋白IE2在Tet-On系统调控下的表达及其抗凋亡作用

即刻早期蛋白IE2是人巨细胞病毒(HCMV)感染后最先表达的蛋白质,具有调节细胞周期和抑制细胞凋亡的作用。但IE2蛋白的表达水平与其抗凋亡活性之间的关系尚不清楚。本实验通过建立Tet-On系统调控下表达HCMVIE2蛋白的细胞株,在不同诱导条件下检测IE2蛋白对细胞凋亡和p53表达的影响。结果发现IE2蛋白能抑制TNF-α诱导的细胞凋亡,其抑制效应与IE2蛋白的表达量相关,而原位杂交结果显示IE2蛋白不影响p53的表达,提示IE2蛋白可能通过多种途径抑制细胞凋亡。     

HSV-1感染对人星形胶质瘤细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响

目的:研究单纯疱疹病毒1型(Herpes simplexvires,HSV-1)感染对人星形胶质瘤细胞U251增殖、凋亡和细胞周期的影响.方法:以感染复数(MOI)为5的HSV-1感染体外培养的U251细胞,在感染后24 h、48 h、72 h和96 h用倒置显微镜观察U251细胞的形态改变:用MTT法、流式细胞术观察HSV-1感染对U251细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响.结果:①U251细胞在感染24h后开始出现细胞融合,48 h后开始出现典型的细胞病变效应(Cytopathic effect,CPE),72h后超过80%的细胞出现CPE,.96h后细胞大部分死亡.②MTT法显示HSV-1感染U251细胞24 h、48 h、72 h及96 h的U251细胞OD值均低于对照组(P<0.05).③HSV-1感染U251细胞12h后凋亡率与对照组无显著差异(P0.05),感染24h和36h后凋亡率比相应对照组有显著差别(p<0.05).④HSV感染12h、24h和36h后均可引起U251细胞S期细胞增多和G0/G1期细胞减少,24 h后G2/M期细胞比例开始增加.结论:HSV.1能感染体外培养的U251细胞,抑制其增殖,促进其凋亡并影响其细胞周期.     

粪臭素对胰蛋白酶部分性质的影响

研究发现粪臭素对胰蛋白酶活性具有抑制作用。采用紫吸收法察到粪臭素使胰蛋白酶紫外吸收峰增强,采用荧光光谱法发现粪臭素对胰蛋白酶有很强的荧光淬灭作用。根据Stern-Volmer方程测得胰蛋白酶的表观猝灭常数Kq为2.72×1012L/mol.s。表明粪臭素对胰蛋白酶的荧光猝灭很可能是静态猝灭。     

布拉酵母菌辅助治疗对老年CagA和VacA阳性幽门螺杆菌感染患者IL-6和IL-8及肠道菌群的影响

评价布拉酵母菌（S. boulardii）对老年细胞毒素相关蛋白A（cytotoxin-associated gene A protein, CagA）和空泡毒素（vacuolating cytotoxin A, VacA）阳性幽门螺杆菌（H. pylori）感染患者炎症因子及肠道菌群的影响,以探讨S. boulardii治疗H. pylori I型高毒力株感染的机制。

选择我院200例CagA和VacA阳性的老年H. pylori感染者,采用随机数字表分成四联组和S. boulardii组。四联组患者采用铋剂四联疗法,S. boulardii组在铋剂四联疗法基础上加用S. boulardii。比较两组患者H. pylori根除率、胃黏膜组织学评分、临床疗效评分、不良反应、血清白细胞介素（IL）-6及IL-8水平、肠道菌群分布。

（1）S. boulardii组H. pylori根除率按方案（PP）分析和按意向性（ITT）分析均高于四联组（85.1% vs 72.8%;80.0% vs 67.0%）,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。（2）S. boulardii组患者不良反应发生率（7.0%）低于四联组（21.0%）,差异有统计学意义（χ² = 8.140,P = 0.004）。（3）治疗后,两组患者胃黏膜组织学评分、临床症状评分、血清IL-6及IL-8水平均较治疗前降低,且S. boulardii组低于四联组（均P＜0.05）。（4）治疗后,四联组患者肠道乳杆菌、双歧杆菌数量较治疗前减少,肠杆菌、肠球菌数量较治疗前增加（均P＜0.05）;而S. boulardii组患者肠道乳杆菌、双歧杆菌数量较治疗前增加（均P＜0.05）,肠杆菌、肠球菌数量较治疗前差异无统计学意义（均P＞0.05）。

S. boulardii辅助四联疗法可提高老年患者H. pylori I型高毒力株的根除效果,减轻患者胃黏膜组织炎症,降低不良反应,其机制可能与S. boulardii下调免疫炎症介质表达和改善肠道菌群分布有关。

     

Split-marker 重组技术构建泛素C 末端水解酶基因缺失菌株

目的:对烟曲霉(Aspergillus fumigatus)泛素末端水解酶(creB)基因进行敲除。方法:通过氨基酸序列分析软件初步分析烟曲霉CreB蛋白结构.利用split-marker重组技术构建重组片段,并通过PEG-原生质体方法对烟曲霉野生菌株进行转化,采用PCR方法对转化子进行筛选,最后选取初步筛选的转化子进行测序鉴定。结果:结构分析显示烟曲霉CreB蛋白具有泛素特异蛋白酶(ubiquitin-processing protease)UBP亚家族六个结构域。本实验构建了转化片段并转化,在抗性平板中获得了25个Hyg抗性转化子,进一步采用PCR方法筛选到20个转化子,最终通过测序分析获得一株creB基因缺失菌株。结论:Split-marker重组技术是对烟曲霉creB基因进行敲除的快速有效的方法。获得的creB缺失菌株可用于基因功能研究。