草鱼生长激素单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及鉴定

用经草鱼生长激素(gcGH)免疫的BALB/c小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(Sp2/O-Ag14)融合,经3次克隆化培养和ELISA筛选,得到7株阳性杂交瘤细胞株,其中2株为强阳性。交叉试验表明,这些杂交瘤细胞株所分泌的单克隆抗体(McAb)同大鳞大马哈鱼生长激素(sGH)、大鳞大马哈鱼促性腺激素(sGTH)及牛生长激素(bGH)均不起反应。小鼠腹水McAbs滴度高达1:1280000。受体-gcGH-McAb夹心试验表明,McAb确与有活性的gcGH有特异反应。用间接ELISA方法可检测到浓度为0.125#g/ml的gcGH。     

长时间灌流式器官培养方法

用灌流方式优化器官标本的生存环境。灌流通道的对外进出口端分别以小孔径疏水型空气过滤器和双重无菌气体隔离区作为防菌屏障,配以恒流泵的驱动作用,保证了在长时间的实验期间内不仅能有效地防止污染,而且灌流速度具有足够范围内的可调性和持续恒定性。用这种方法使草鱼脑垂体在长达８２天的连续灌流中保持着较为稳定的生长激素分泌水平,证实了草鱼脑垂体的生长激素分泌水平与培养液中Ｃａ２＋、Ｋ＋离子浓度（一定范围内）成正相关。     

草鱼生长激素单抗免疫亲和柱的制备及初步应用

用纯化的草鱼生长激素单克隆抗体偶联到CNBr活化的Sepharose4B凝胶上,制成约10ml的亲和层析柱．用该柱一步纯化了重组鲤鱼生长激素基因的表达产物．偶联有13．65mg单克隆抗体的亲和柱一次可纯化得到约0．7mg重组鲤鱼生长激素．酶联免疫受体测定表明它具有强烈的生物学活性,SDS－PAGE表明它为单一蛋白带,分子量约为22000．