牛血清中牛腺病毒3型EvaGreen qPCR检测方法的建立

目的 建立EvaGreen qPCR检测牛腺病毒3型(bovine adenovirus 3, BAV3)的方法,用于牛血清等牛源材料的检测。方法 依据GenBank公布的BAV3标准毒株WBR-1全基因序列,基于E2B区域高度保守序列设计引物,提取并制备DNA标准品,建立EvaGreen qPCR检测BAV3的方法,并对该方法的特异性、灵敏度及精密度进行验证。最后利用该方法检测牛血清中的BAV3,并与细胞培养法及荧光抗体检测对比,以验证该方法的适用性。结果 建立的EvaGreen qPCR检测BAV3的方法标准曲线R²>0.99,扩增效率处于90%～110%,可检测范围为0.2×10⁰～0.2×10⁷ copies/μL。实验内Ct值的CV<2.2%,在不同实验间Ct值的CV<1.8%。设计的BAV3引物与牛腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus, BVDV)、副流感病毒3型(parainfluenza virus 3, PI3)、呼肠孤病毒(reovirus, REO)、呼...     

疫苗制备中外源病毒检测方法

疫苗安全性是公众及药品监管机构非常关注的问题。由于疫苗生产原材料如组织、细胞基质、血清、胰蛋白酶等来源于动物,因此疫苗产品存在外源病毒污染的风险。外源病毒对人有潜在危害,实施系统性的检测和采取严格的预防措施可以有效降低外源性因子污染的风险。几十年来,某些经典的检测法已经成为广谱筛查外源病毒污染的标准方法,但其存在一定的局限性。随着大规模基因并行测序、微阵列等分子生物学检测新方法的建立,疫苗外源因子检测方法日趋多样化,增加了检测疫苗外源因子污染种类和概率。     

圈养亚洲象尿液中雌二醇和孕酮含量的周期性变化

针对北京动物园2头圈养雌性亚洲象从未动情的现象,本研究于2003年12月至2005年3月,采用放射性免疫分析法测定了2只不动情象与另一只已受孕象尿液中孕酮和雌二醇的变化,并结合国内外研究探讨圈养亚洲象不动情的原因,为圈养象机构提供相应的繁殖管理建议。研究结果表明,受孕雌象在分娩前一周左右孕酮含量突然升高,后在很短时间内降低,分娩后也维持在较低水平;雌二醇含量分娩前维持在较高水平,分娩前一周骤降,并保持较低水平至本研究结束。非动情象尿液中孕酮和雌二醇水平都显著低于受孕象相应的激素水平,且无明显的波动,推测其卵巢不具活性,导致孕酮与雌二醇水平不具波动性,是这2头圈养雌象未见动情现象的主要原因。     

膳食因素对社区老年人认知功能损伤影响的病例对照研究

目的：探讨膳食因素对社区老年人轻度认知功能障碍（Mild Cognitive Impairment,MCI）发生的影响,筛选与认知改善密切关联的膳食种类,为老年性痴呆的一级预防提供科学依据。方法：采用病例对照研究,按照严格的入选标准从社区的65岁以上的老年人群中筛选形成MCI组和正常对照组。采用调查问卷获取两组对象的基本信息和膳食情况。对全部对象进行MMSE、ADL、GDS量表测试,采用Logistic回归模型探讨不同膳食因素与MCI发生的关联。结果：本研究纳入MCI患者169名、正常对照组131名,结果显示,排除一般人口学信息干扰,膳食因素中食用菠菜（β= 1426,OR=0240,P=0006）和猪肝（β= 1105,OR=0331,P=001）与MCI发生具有显著统计学意义关联。结论：较多进食菠菜和猪肝可延缓老年认知功能减退,可能与这两种食物中富含叶酸有关。     

昆虫质型多角体病毒的研究进展

质型多角体病毒(Cytoplasmic polyhedrosis virus,CPV)隶属呼肠孤病毒科Reoviridae质型多角体病毒属Cypovirus,通常基因组由10个节段双链RNA构成。RNA分子量为3～27u。根据病毒基因组dsRNA片段在聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶中电泳图谱的差异,目前CPV已被分为19个电泳型。不同于呼肠孤病毒科其它成员,CPV为单层衣壳,而不是常见的双层衣壳结构,衣壳蛋白主要由衣壳蛋白、大突起蛋白及塔式突起蛋白组成。大部分质型多角体病毒引起昆虫慢性疾病,造成寄主死亡或适应性降低。随着RNA病毒基因序列测定技术的成熟,质型多角体病毒的序列测定方面取得较大进展,目前GenBank核苷酸序列数据库中已经公布了家蚕Bombyx mori CPV电泳型1两个株系(H株和I株)、舞毒蛾Lymantria dispar CPV电泳型1、舞毒蛾CPV电泳型14及粉纹夜蛾Trichoplusia ni CPV电泳型全基因组序列,为该病毒的进化与起源的研究提供更多的遗传信息。本文从结构功能、侵染特点、基因组特点及应用前景等方面综述了昆虫质型多角体病毒的研究进展。