肉碱的生理功能及其应用前景

概述了Ｌ－肉碱的生理功能,及其机能性食品、饲料添加剂、药品方面的应用。     

肉碱脱水酶突变株的获得及其休止细胞反应条件的优化

对一株产肉碱脱水酶的菌株用溴化乙锭进行诱变,并经肉碱选择性培养基进行筛选,获得了一株高活性酶活的菌株,并进行了休止细胞转化巴豆甜菜碱为Ｌ－内碱的反应条件的研究。实验确定休止细胞的最适反应温度为３０℃～３２℃,ｐＨ８．１、０．０１ｍｏｌ／Ｌ磷酸缓冲液,时间８．５～１０ｈ。最适底物浓度为６０ｍｇ／ｍｌ,最适休止细胞浓度为６０ｍｇ／ｍｌ（湿重）,产率４０％（摩尔比）。建立了休止细胞酶反应的表观米氏方程,     

多胺与细菌病原的致病性

多胺是一类具有两个以上氨基的脂肪族化合物,它们在生物体内含量的动态平衡受合成、转运、降解及互换等过程的影响,多胺及其合成和转运系统与病原菌的致病性相关.本文综述了多胺在细菌毒力因子的转录和翻译、细菌生物膜的合成、细菌对抗生素的抗性、细菌对抗宿主的酸性胁迫和氧化胁迫、细菌对抗宿主的先天免疫防御机制、细菌致病性生物分子的合成等方面的重要作用.     

重组牙鲆MRF4在大肠杆菌中的表达、纯化及多克隆抗体分析

MRF4 是肌肉发生调节因子家族的一员,其对肌肉的发育有重要的调节作用. 对于养殖鱼类,生长速度是很重要的经济指标,而肌肉的发育对鱼类的生长非常重要. 制备了 MRF4 的多克隆抗体以分析在鱼类中 MRF4 的功能. 通过采用大肠杆菌表达系统及 pET-30 表达载体对牙鲆肌肉发生调节因子 MRF4 进行了体外重组表达. 所得到的 MRF4 重组蛋白为可溶性的. 在自然条件下,经金属离子螯合柱纯化后,得到了电泳纯的融合蛋白,通过免疫新西兰大白兔制备 MRF4 的多克隆抗体. 蛋白质印迹分析显示:重组蛋白能被抗组氨酸标签的抗体及所制备的多克隆抗体识别,而且这一多克隆抗体能检测到内源性的 MRF4 蛋白,从而进一步证明了抗血清中含有 MRF4 的抗体. MRF4 融合蛋白的成功表达及其多克隆抗体的制备为进一步深入研究其在牙鲆肌肉发育过程中的分子机制奠定了基础.     

产L—肉碱的菌种筛选及发酵条件优化

将D,L-肉碱(carnitine,β-羟基-γ-三甲胺丁酸)用浓硫酸脱水获得反-巴豆甜菜碱(trans-crotonobetaine),从本室保藏的菌株中筛选出1株能将反-巴豆甜菜碱非对称合成L-肉碱的菌株E.coliK74.利用它的休止细胞立体选择性地水合反-巴豆甜菜碱产生L-肉碱,起催化作用的酶是L-肉碱脱水酶,是一种可诱导的胞内酶,当培养基中加入反-巴豆甜菜碱并在部分厌氧条件下可诱导产生.如培养基中含有葡萄糖、硝酸盐或氧时,酶的合成受到抑制,在磷酸缓冲液中,E.coliK74休止细胞的最适反应条件是pH为7.8,温度为37～42℃.