甲氨蝶呤诱导巨噬细胞M1极化促进骨肉瘤细胞凋亡的实验研究

目的:探讨甲氨蝶呤诱导巨噬细胞分化情况和分化后巨噬细胞对骨肉瘤细胞凋亡的影响。方法:采用甲氨蝶呤刺激小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞24小时后,使用流式、免疫荧光等技术检测M1型巨噬细胞标志物CD86、诱导型一氧化氮合酶(Inducible nitric oxide synthase,i NOS)的表达量,并以脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)诱导巨噬细胞极化为阳性对照,未处理细胞为阴性对照,评估甲氨蝶呤的诱导效果。将经甲氨蝶呤刺激的巨噬细胞与骨肉瘤细胞K7共培养,使用流式技术检测骨肉瘤细胞K7凋亡程度。结果:一定剂量的甲氨蝶呤作用于小鼠单核巨噬细胞后,可以显著上调M1型巨噬细胞的标志物CD86、i NOS,上调程度与LPS组相当。与脂多糖诱导巨噬细胞极化类似,甲氨喋呤可以激活NF-κB。经甲氨蝶呤刺激后的巨噬细胞可以促进骨肉瘤细胞的凋亡。结论:甲氨蝶呤诱导向M1型分化的巨噬细胞可以促进骨肉瘤细胞的凋亡。