NIH3T3-CD40L稳定细胞系构建及在EBV转化B淋巴细胞中的应用

通过脂质体法转染p CMV6-CD40L重组质粒和G418阳性克隆筛选,构建了稳定表达CD40L的NIH3T3细胞系,在RNA和蛋白质水平进行了功能鉴定,对其作为饲养细胞在体外B淋巴母细胞系(B lymphoblastoid cell lines,B-LCLs)培养和在EBV转化B细胞中的作用进行了实验验证。结果表明,NIH3T3-CD40L细胞系不仅可以提高体外低密度B-LCLs存活率,而且可以降低成功建立B-LCLs所需的细胞密度,促进其增殖。该细胞系的成功构建,进一步确证了NIH3T3-CD40L作为饲养细胞可以促进体外低密度B-LCLs的增殖及提高EBV转化B淋巴细胞的效率,优化了体外B细胞培养及EBV转化B淋巴细胞的流程,也为单克隆抗体的制备奠定了基础。     

中华民族永生细胞库在生命科学研究中的支撑作用

人类样品是生物医学研究必需的物质基础。B淋巴母细胞系(LCL)是利用Epstein-Barr(EB)病毒转化人的B细胞获得,制备简便,可以无限繁殖,是非常便捷的保存人类样品的形式。中华民族永生细胞库保藏有中国各个民族群体的LCL。目前,已经有详实的LCL的性质研究以及关于LCL的全基因组数据,因而, LCL已经广泛应用于遗传学、免疫学、药学基因组学、再生医学、癌症发生与免疫治疗、筛选制备全人单克隆中和抗体及EB病毒致病机理等研究领域。本文对LCL的特性以及LCL在上述研究领域中的应用进行了综述,最后对中华民族永生细胞库的保藏内容做了简单介绍,以促进广大科研人员进一步了解该细胞库的科研价值,充分发挥该库保藏资源在基础科学、生物医学研究中的科技支撑作用。