ERK介导的炎性反应参与肾缺血再灌注损伤

目的研究小鼠肾缺血再灌注损伤的发病机制。方法建立小鼠肾缺血再灌注损伤模型。12只雄性C57BL／6随机分为2个组（n=6）,分别为假手术组（Sham）,肾缺血再灌注损伤模型组（IRI）。IRI组血管夹夹闭左肾动脉,置于32℃温箱后1h松开血管夹,去除右肾。Sham组操作同上,但不夹闭左肾动脉。再灌注24h后处死小鼠,收集血清和肾脏标本。测定血清肌酐（Cr）和血尿素氮（BUN）。PAS染色后显微镜下观察肾脏形态学变化,Western印迹分析ERK、p-ERK的表达,PCR检测MCP-1、IFN-γ。结果与假手术组（Sham）相比,IRI组血清肌酐、血尿素氮明显升高,病理检查可见肾脏内肾小管上皮细胞明显肿胀坏死、蛋白管型形成明显,还可观察到炎性细胞浸润明显增加。ERK、p-ERKWestern印迹结果PCR显示MCP-1、TNF-α也明显上调,但ERK表达不变。结论在肾缺血再灌注中,ERK激活介导的炎性后府可能参与了肾扣伤。     

替米沙坦对UUO小鼠肾脏HIF-1α表达的影响及其与巨噬细胞的关系

目的 研究单侧输尿管结扎小鼠肾脏缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor-1 alpha,HIF-1α)的表达及替米沙坦对其表达的影响和机制.方法 采用单侧输尿管结扎(UUO)建立肾间质纤维化小鼠模型.30只雄性CD1小鼠随机分为假手术组(0d)、单侧输尿管结扎7天组(7d)及14天组(14d)、单侧输尿管结扎7天及14天并替米沙坦(10mg·kg-1·d-1)治疗组(7dT、14dT).MASSON染色观察肾脏病理改变;免疫组织化学检测各组α平滑肌动蛋白(α-SMA)、HIF-1α、巨噬细胞(F4/80)在肾脏组织中的表达及分布、连续切片检测HIF-1α与F4/80的共定位;Western-blot检测α-SMA、HIF-1α的变化.结果 随时间进展,输尿管结扎小鼠(7d、14d)肾脏病理改变逐渐加重,α-SMA、HIF-1α、F4/80表达均增加,与假手术组相比有统计学意义(P＜0.05);HIF-1α主要分布于肾间质细胞中,HIF-1α与F4/80存在明显的共定位现象;给予替米沙坦治疗后,它们的表达均下降(均P＜0.05).结论 替米沙坦可抑制巨噬细胞的浸润,降低UUO小鼠HIF-1α的表达,减轻UUO小鼠肾脏纤维化.     

肾缺血再灌注损伤小鼠肾内纤维化和胆绿素还原酶阳性巨噬细胞增加

目的 通过研究肾缺血再灌注损伤时肾组织中胆绿素还原酶（biliverdin reductase, BVR）的表达与巨噬细胞的关系,为进一步研究BVR与巨噬细胞在肾脏纤维化中的作用提供依据。方法 16只C57BL/6雄性小鼠随机分为假手术组（Sham组）和肾脏缺血再灌注组（ischemia-reperfusion injury,IRI组）,取肾组织切片行PAS、Masson、Sirius red染色,免疫组织化学检测α-SMA、PDGF-β和Collagen IV的表达,RT-PCR检测α-SMA、FN、Collagen I和KIM-1 mRNA表达,流式细胞术和免疫荧光染色检测BVR与巨噬细胞的关系。结果 在缺血再灌注小鼠损伤肾组织内,PAS染色发现IRI组肾小球硬化明显,系膜细胞增生,肾小管管腔扩张,小管上皮细胞肿胀或发生空泡变性、细胞脱落、基膜裸露。Masson和Sirius Red染色发现肾间质胶原纤维表达明显增加;免疫组织化学染色显示IRI组α-SMA、PDGF-β和collagen IV免疫反应性增强,RTPCR检测显示IRI组α-SMA、FN、collagen I和KIM-...