不同防冻剂对兔胚胎干细胞慢速冷冻保存的影响

干细胞冷冻保存是干细胞研究和临床应用中的必需技术。为提高兔胚胎干细胞在慢速冻存过程中的保存效果，比较了二甲基亚砜(DMSO)和乙二醇(ethylene glycol，EG)对兔胚胎干细胞冷冻保护效果。对冷冻复苏后的细胞进行台盼蓝染色，并研究其胚胎干细胞分子特性，结果表明DMSO比EG具有更好的冷冻保护效果。再在以10% DMSO为基础的防冻液中添加膜稳定剂海藻糖(trehalose)或谷氨酰胺(glutamine)，细胞冷冻复苏后结果显示，谷氨酰胺对兔胚胎干细胞有明显的冷冻保护作用，使细胞存活率从71%提高到83.7%。当谷氨酰胺浓度为0、5、10、20、40 mmol/L分别加入防冻液中后，20 mmol/L的谷氨酰胺具有最佳的冷冻保护效果。以上结果得出兔胚胎干细胞慢速冷冻的防冻液改进配方为：在胚胎干细胞培养液中添加10% DMSO＋20 mmol/L谷氨酰胺。     

叶绿体中醛缩酶的两种存在状态

小麦、水稻、大豆、烟草和菠菜叶绿体间质中的醛缩酶有两种存在状态,即可溶状态(S)和与层膜相结合的状态(M)。两种状态的醛缩酶的氨基酸组成上大体相同。两种状态可以相互转化,活性随植物的生育期而有明显的变化。醛缩酶在间质中的活性约为总活性的60％,与类囊体膜结合的约为40％。间质和层膜的醛缩酶的分子量分别为108KD和104KD。提纯菠菜叶绿体中与层膜结合的醛缩酶经盘状凝胶电泳,为一条均一的蛋白染色带。抗间质醛缩酶的免疫球蛋白对层膜醛缩酶有明显的沉淀反应。去污剂的强弱对“溶解”类囊体膜上的醛缩酶作用明显不同。     

叶绿体中依赖NAD(P)H的甘油醛-3-磷酸脱氢酶活性的测定

甘油醛-3-磷酸脱氢酶(以下简称GAP脱氢酶)是叶绿体卡尔文环中的一种重要的调节酶,它是卡尔文环中唯一利用由光系统Ⅰ产生的还原能力(NADPH),催化光合作用的最初产物3-磷酸甘油酸(3-PGA)还原成3-磷酸甘油醛,反应如下:     

孕早期亚临床甲状腺功能减退与流产发生的相关性

目的:探讨孕早期亚临床甲状腺功能减退与流产发生的相关性.方法:2017年2月至2019年选择在本院进行建档的孕早期孕妇120例,检测血清游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)、游离甲状腺素(free thyroxine,FT4)、促甲状腺激素(thyroid stimulating ...     

Notch1信号通路激活在低氧诱导人脐静脉内皮细胞血管形成中的作用

目的观察低氧条件下HIF-1α/VEGF/Notch信号通路在人脐静脉内皮细胞（HUVEC）血管生成中的作用。 方法将HUVEC进行常氧和低氧[二氯化钴（CoCl2）,200 μmol/L]诱导,再将常氧和低氧处理的HUVEC应用Notch1信号通路的抑制剂DAPT （30 μmol/L,24 h）和激活剂JAG-1 （30 μmol/L,24 h）干预。通过体外小管形成实验观察低氧对HUVEC血管生成能力的影响。应用RT-PCR和Western blot检测HUVEC中低氧诱导因子-1α （HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶-9 （MMP-9）和Notch1信号分子（Notch1、Dell4和JAG-1）的mRNA和蛋白表达。通过Transwell迁移实验和伤口愈合实验观察低氧、DAPT、JAG-1对HUVEC迁移能力的影响。应用MTT法检测低氧及Notch1对HUVEC增殖的影响。两组间比较采用t检验,采用析因设计方差分析低氧和DAPT以及低氧和JAG-1对HUVEC迁移能力、距离、小管形成能力和细胞增殖的交互作用。 结果与常氧组比较,低氧组小管总长[（8.18±0.62）mm比（15.43±1.32）mm]增高,差异具有统计学意义（P < 0.05）。与常氧组比较,低氧组的HIF-1α、VEGF、MMP-9、Notch1、Dell4和JAG-1的mRNA相对表达量和蛋白相对表达量（1.01±0.03比4.43±0.35,1.02±0.03比3.55±0.28,0.98±0.04比3.24±0.25,1.01±0.03比3.22±0.25,0.99±0.02比2.89±0.22,1.02±0.04比2.43±0.19,0.98±0.01比3.13±0.24,0.98±0.02比2.67±0.21,0.97±0.03比2.45±0.19,1.01±0.03比2.44±0.19,1.00±0.04比2.30±0.18,1.03±0.05比2.27±0.18）均升高,差异有统计学意义（P均< 0.05）。Transwell迁移实验和伤口愈合实验显示,低氧条件下,DAPT干预使HUVEC的迁移能力降低,JAG-1干预使HUVEC的迁移能力升高（P均< 0.05）。小管形成和MTT法测定显示,低氧条件下,DAPT干预使HUVEC的小管形成能力和细胞增殖能力降低,JAG-1干预使HUVEC的小管形成能力和细胞增殖能力升高（P均< 0.05）。析因设计的方差分析结果显示,低氧和JAG-1对迁移细胞数、小管形成和细胞增殖能力交互作用具有协同作用（P < 0.05）。 结论低氧可通过激活HIF-1α/VEGF/Notch1信号通路提高HUVEC的血管生成能力、迁移能力和细胞增殖能力。     

处理石油化工废水的活性污泥中优势微生物群系及其降解效能的研究

处理石油化工废水的活性污泥中微生物以细菌为主体,霉菌、酵母菌数量较少。分离到167株细菌,主要群系为不动细菌属,假单胞菌属,产碱杆菌属、微球菌属、棒状杆菌属、芽孢杆菌属等、其中大部分菌株对苯酚、苯乙烯、丙酮、甲醇具有降解效能,尤其对苯酚、苯乙烯降解能力较强,菌株数量也较多。     

妊娠期高血压患者血清热休克蛋白70水平与心功能及免疫球蛋白的关系研究

目的:探究妊娠期高血压患者血清热休克蛋白70(HSP70)水平与心功能及免疫球蛋白的关系。方法:选择2017年4月至2018年4月在陕西省人民医院诊治的200例妊娠期高血压患者作为妊娠期高血压组,同时选择同期在我院进行孕检的200名健康孕妇作为对照组。采用酶联免疫吸附法检测血清HSP70水平,采用全自动生化分析仪检测免疫球蛋白G(Ig G)、免疫球蛋白M(Ig M)、免疫球蛋白A(Ig A)、免疫球蛋白D(Ig D)和免疫球蛋白E(Ig E)水平,采用多普勒超声心动图监测两组的左心室后壁厚度(LVPWT)、左心室舒张末期内径(LVEDD)和室间隔厚度(IVST)、左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室射血分数(LVEF)和每搏指数(SVI),计算左心室质量(LVM)、二尖瓣舒张早期血流速度峰值与二尖瓣环侧壁舒张早期运动峰速度的比值(E/Em)、舒张早期与舒张晚期血流速度峰值的比值(E/A)。采用spearman相关性分析血清HSP70水平与血清免疫球蛋白水平及心功能指标的相关性。结果:与对照组相比,妊娠期高血压组的血清HSP70水平明显升高,而Ig G和Ig M水平明显下降,并且LVESD、LVEF、E/A也明显下降(P0.05)。血清HSP70水平与Ig G、Ig M、LVESD、LVEF、E/A均呈负相关性(P0.05)。结论:妊娠期高血压患者的血清HSP70水平明显升高,并且血清HSP70水平与妊娠期高血压患者免疫功能和心功能下降存在相关性,在妊娠期高血压患者的诊断和治疗中具有一定临床价值。     

小麦叶绿体中甘油醛-3-磷酸脱氢酶、果糖-1,6-双磷酸酯酶和醛缩酶的比较研究

现已证明光合作用同化CO_2的循环(卡尔文环)生成的糖磷酯可向环外运输,以致在叶绿体内形成淀粉和在细胞质中合成蔗糖、脂肪酸,并提供能量。而卡尔文环光合产物的输出与环中的甘油醛-3-磷酸脱氢酶     

不同防冻剂对兔胚胎干细胞慢速冷冻保存的影响

干细胞冷冻保存是干细胞研究和临床应用中的必需技术。为提高兔胚胎干细胞在慢速冻存过程中的保存效果,比较了二甲基亚砜(DMSO)和乙二醇(ethylene glycol,EG)对兔胚胎干细胞冷冻保护效果。对冷冻复苏后的细胞进行台盼蓝染色,并研究其胚胎干细胞分子特性,结果表明DMSO比EG具有更好的冷冻保护效果。再在以10%DMSO为基础的防冻液中添加膜稳定剂海藻糖(trehalose)或谷氨酰胺(glutamine),细胞冷冻复苏后结果显示,谷氨酰胺对兔胚胎干细胞有明显的冷冻保护作用,使细胞存活率从71%提高到83.7%。当谷氨酰胺浓度为0、5、10、20、40mmol/L分别加入防冻液中后,20mmol/L的谷氨酰胺具有最佳的冷冻保护效果。以上结果得出兔胚胎干细胞慢速冷冻的防冻液改进配方为:在胚胎干细胞培养液中添加10%DMSO 20mmol/L谷氨酰胺。     

叶绿体中果糖-1,6-双磷酯酶(FDP-酶)的研究 Ⅰ.菠菜叶绿体中FDP-酶的提纯与某些动力学特性

分离的 FDP-酶在 pH 8—9下催化活性最高,而在 pH6下可在几个月内保持其活性。电泳的结果表明提纯后的酶只有一个区带。比较存在于低渗涨破的叶绿体中的 FDP-酶与提纯的 FDP-酶,初步结果说明这两种状态下的酶在动力学特性上有明显差异。虽然它们的活性都与 Mg~( )浓度有关,但涨破叶绿体中的 FDP-酶对 Mg~( )的 Km 较小。Mg~( )浓度明显限制着此酶的活性。EDTA 对其活性也有抑制作用。EDTA 对提纯的 FDP-酶与涨破叶绿体中的 FDP-酶的抑制效应不同,15μmoleEDTA 可完全抑制前者的活性,但30—45μmole EDTA 只能抑制后者活性的70%。用0.2% Triton X-100处理叶绿体,对其中的 FDP-酶有增活效应。这说明 FDP-酶的活性与叶绿体中的层膜可能有关。