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目的 探讨可高效分离小鼠骨髓间充质干细胞(mBMSCs)的技术方法。方法 分别采用骨片消化爬片法、全骨髓贴壁法、骨片消化液上清法和骨片消化研钵法等四种方法分离7～9周龄雄性C57BL/6小鼠的mBMSCs;于倒置显微镜下观察原代mBMSCs形态；运用流式细胞术检测mBMSCs特征性免疫表型；采用多向分化诱导检测mBMSCs成骨分化能力与成脂分化能力。结果 分离获得的原代细胞首次换液后于倒置显微镜下观察：骨片消化爬片法分离的细胞，仅见大量骨碎片和杂细胞，该法所分离细胞不再进行后续检测评估；全骨髓贴壁法分离的细胞，仅可见少量多角形贴壁细胞，夹杂大量杂细胞；骨片消化液上清法分离的细胞也可见较多长梭形、三角形贴壁细胞，但杂细胞较多；骨片消化研钵法分离的细胞，可见较多长梭形、多角形贴壁细胞，杂细胞少。分离细胞经培养传代到第3代(P3代)时，一方面采用流式细胞术分析mBMSCs特征性免疫表型，结果表明骨片消化液上清法和骨片消化研钵法分离的mBMSCs纯度均较高，全骨髓贴壁法不理想；另一方面，进行成骨分化诱导与成脂分化诱导，结果表明与全骨髓贴壁法分离的细胞相比，骨片消化液上清法和骨片消化研钵法所分离... 相似文献
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