酪氨酸激酶EphB2受体N端球状结构域的表达及纯化

根据酪氨酸激酶ＥｐｈＢ２受体的碱基序列,用ＰＣＲ方法扩增其结合配体的关键结构域Ｎ端球状区,定向克隆到融合表达质粒载体ｒＲＳＥＴ Ａ中,转化大肠杆菌ＪＭ１０９（ＤＥ３）。阳性克隆经ＩＰＴＧ诱导,由Ｔ７启动子调控表达了氨基端带６个连续组氨酸残基的融合蛋白。电泳分析表明,表达的融合蛋白主要以包含体的形式存在,约占细菌总蛋白的１４％。Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹确证,利用Ｎｉ－ＮＴＡ金属螯合亲和色谱法在变性条件下对     

低分子量GTP—结合蛋白Ras超家族研究进展

Ｒａｓ蛋白超家族结构上均由１９０个左右的氨基酸残基构成,仅有一个ＧＴＰ酶结构域。Ｒａｓ及相关蛋白在众多的细胞调节过程中起着关键作用,包括细胞增殖与分化,胞内胞液间运输,胞内氧化酶的产生,细胞骨架的调控以及胞外信息的跨膜传递等分子开关作用。     

蓖麻毒素对肝癌细胞有丝分裂原激活蛋白激酶的影响

为进一步探讨蓖麻毒素的毒作用机理 ,采用 Western印迹和免疫组化方法研究蓖麻毒素对人肝癌细胞内磷酸化状态和有丝分裂原激活蛋白激酶 (MAPK)的影响 .其结果表明 :蓖麻毒素能够影响细胞内的磷酸化状态 ,并能激活细胞内的有丝分裂原激活蛋白激酶 ,对 MAPK的激活有时间依赖性和剂量依赖性 . MAPK信号传导途径参与了蓖麻毒素对肝癌细胞的毒作用 .     

蓖麻毒素诱导肝癌细胞生成一氧化氮合酶——免疫组织化学研究

应用免疫组织化学方法观察不同浓度蓖麻毒素作用于肝癌细胞不同时间后,对iNOS的诱导作用。结果显示,未受蓖麻毒素作用的肝癌细胞胞浆iNOS呈阴性反应;当受到蓖麻毒素诱导后,才能在胞浆内合成,不同浓度的蓖麻毒素对肝癌细胞诱导iNOS的产生没有明显差别,而蓖麻毒素诱导iNOS的表达有明显的时间依赖性,2h没有表达,4h才出现,随着时间的延长,到8h时仍然有明显的表达,由于iNOS的合成涉及基因转录,蛋白质合成等过程,故需诱导数小时后显示酶活性,但一经诱导生成,酶活性持续时间长,蓖麻毒素诱导iNOS的产生在抗癌应用中具有重要的价值。