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不同化学杂交剂(CHA)对小麦花药同工酶影响的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
在小麦叶枕距±2cm时,喷施4种不同化学杂交剂(CHA)后,分别取小孢子处于不同发育阶段的花药,进行过氧化酶(POD)、淀粉酶(Amy)和酯酶(Est)等同工酶的分析。研究表明:在小孢子母细胞减数分裂期,处理2、3和4三种CHA对POD的A1、A2;B2、B4和B5,C1、C2和C3同工酶带的活性均有明显的抑制作用;处理5除去对A1和A2表现抑制外,对其他酶带的活性均有增强作用。在单枚早期,处理2和3的A、B和C区POD同工酶活性均明显低于对照;处理4和5上述各区POD同工酶活性却明显高于对照。在上述两个发育时期,处理2对Amy1区酶活性有增强作用,而处理3、4和5对该区酶活性却表现了专一性的抑制。各处理对Est同工酶A区和B区的酶活性主要表现为抑制。实验结果表明,不同的CHA均通过干扰花药的物质和能量代谢而导致雄性生理性不育。 相似文献
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小麦耐盐突变体的分子生物学鉴定 总被引:20,自引:1,他引:19
利用F1花药培养、EMS诱变和耐盐性反复筛选后已稳定9 代的小麦耐盐突变体RH8706- 49、H8706- 34、H8706- 44、H8706- 48、H8706- 57 及其亲本濮农3665、百农3039 为材料,用生化标记(醇溶蛋白)及分子标记(RAPD)分析了各材料间的差异,发现突变体与亲本相比,不仅发生了蛋白质水平的变异,而且也在DNA 水平上证明了突变的发生,从而为耐盐突变体的真实性提供了有力的证据,排除了盐适应的可能性; 经用218 个引物对5 个突变体之间的多态性进行RAPD分析,结果表明,它们之间的差异很小,其遗传背景相似,因而它们是一系列耐盐性不同的近似等位基因系 相似文献
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利用基因枪法将Tagsk1基因导入敏盐小麦成熟胚愈伤组织提高其耐盐性的研究 总被引:2,自引:1,他引:1
以Tagsk1(TriticumasetiumL.glycogen synthase kinase1)基因的cDNA的碱基序列为基础,设计特异引物由小麦耐盐突变体RH8706-49基因组DNA进行扩增后,得到来自于基因组的Tagsk1基因。采用基因枪法,利用携带该基因的双元表达载体pBI121-gsk1转化敏盐小麦H8706-34和中国春的成熟胚愈伤组织,经Kanamycin和0.5%NaCl筛选获得耐盐愈伤组织。这些被转化的愈伤组织表现出较高的耐盐性,并且能够在含盐培养基上进一步分化出根和芽。 相似文献
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为确定拟南芥抗逆相关基因AtRPK1启动子的顺式功能元件,对其启动子区进行了分段克隆。通过5'端缺失方法得到203、316、604、809 bp 4个启动子片段,分别构建成p1300-pro-GUS表达载体,并转入拟南芥,进行GUS染色和GUS定量检测。通过对809 bp全长启动子转基因拟南芥GUS染色发现,转基因拟南芥的叶片、茎、花、根中均有表达,在分生能力强的组织和维管束集中的组织,AtRPK1基因启动子具有较高启动表达能力。5'端缺失启动子检测结果表明,转录起始点到启动子上游-114位点区域包含AtRPK1基因启动子的关键顺式作用元件。对启动子缺失片段转基因植株利用200 mmol·L-1NaCl胁迫3 h后,β-葡萄糖苷酸酶活力定量检测结果表明,在启动子上游-19位点处的GT-1顺式作用元件GAAAAA可能直接与盐胁迫应答相关。 相似文献
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类受体蛋白激酶基因OsRPK1在水稻的抗逆信号传导中起着重要作用。本研究扩增获得与OsRPK1高度同源的OsRPK2基因,构建p1300:35S:OsRPK2过表达载体后转化拟南芥。对35S:OsRPK2纯合体拟南芥进行抗逆性分析表明,在盐、ABA、PEG胁迫下,OsRPK2过表达拟南芥萌发率都明显低于野生型拟南芥,其幼苗的根长生长和成株生长状况方面比野生型拟南芥表现出更为明显的受抑现象。生理检测表明,盐胁迫处理后,与野生型拟南芥相比,35S:OsRPK2转基因拟南芥中叶绿素含量下降更为明显,脯氨酸上升量较小,丙二醛含量上升更为明显,这些内在生理机制使得OsRPK2过表达拟南芥抗逆性明显下降。通过对35S:OsRPK2拟南芥的qRTPCR检测发现,OsRPK2的过量表达使拟南芥抗逆信号通路下游的SAD、SOS3和FRY基因表达明显受到抑制,OsRPK2基因可能通过SOS和CDPK信号通路影响拟南芥的抗逆性。 相似文献
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沈银柱 刘植义 黄占景 何聪芬 柏峰 马闻师 朱正歌 葛荣朝 许顺芝 岳聚兴 张中良SHEN Yin-zhu LIU Zhi-yi HUANG Zhan-jing HE Cong-fen BAI Feng MA Wen-shi ZHU Zheng-ge GE Rong-chao XU Shun-zhi YUE Ju-xing ZHANG Zhong-liang 《遗传》1999,21(5):41-545
在小麦叶枕距±2cm时, 喷施4种不同化学杂交剂(CHA)后, 分别取小孢子处于不同发育阶段的花药, 进行过氧化酶(POD)、淀粉酶(Amy)和酯酶(Est)等同工酶的分析。研究表明: 在小孢子母细胞减数分裂期, 处理2、3和4 三种CHA对POD的A1、A2; B2、B4和B5; C1、C2和C3同工酶带的活性均有明显的抑制作用; 处理5除去对A1和A2表现抑制外, 对其他酶带的活性均有增强作用。在单核早期, 处理2和3的A、B和C区POD 同工酶活性均明显低于对照; 处理4和5上述各区POD同工酶活性却明显高于对照。 在上述两个发育时期, 处理2对Amy1区酶活性有增强作用, 而处理3、4和5对该区酶活性却表现了专一性的抑制。各处理对Est同工酶A区和B 区的酶活性主要表现为抑制。实验结果表明, 不同的CHA均通过干扰花药的物质和能量代谢而导致雄性生理性不育。
Abstract:When the distance between wheat (T. aestivum ) flag leaf and it's adjucent leaf is about ± 2cm, four different kinds of CHA (Chemical Hybridizing Agents) were sprayed, then we took the anthers which were at different microspore's development stages to make POD、Amy and Est isoenzymes analysis. The study showed that: during the microsporocyte meiophase, treatmant 2、3 and 4, the three kinds of CHAs had evident inhibitation on the activity of POD's bands A1、A2; bands B2、B4 and B5; bands C1、C2and C3. CHA of treatment 5 had inhibitation on bands A1 and A2, but could promote the activity of the other POD bands. During the early uninucleate stage, the POD activity on area A、area B and area C with CHAs of treatment 2、3 was obviousely lower than the control. But in these areas POD activity with CHAs of treatment 4、5 was obviousely higher than the control. During the above two development stages, CHA of treatment 2 obviously strengthened the activity of Amy1area; on the other hand, CHAs of treatment 3、4 and 5 have the unique inhibitation in the same area. All the treatments mainly had inhibitant effects on the activities of Ests area A and area B. The study shows that all the different CHAs bring about male physiological sterility. Through disturbing the anther's metabolism of substances and energy. 相似文献
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秘彩莉 沈银柱 黄占景 何聪芬 柏峰 马闻师 赵宝存 葛荣朝BI Cai-li SHEN Yin-zhu HUANG Zhan-jing HE Cong-fen BAI Feng MA Wen-shi ZHAO Bao-cun GE Rong-chao 《遗传》1999,21(6):32-42
利用F1花药培养、EMS诱变和耐盐性反复筛选后已稳定9代的小麦耐盐突变体RH8706-49、H8706-34、H8706-44、H8706-48、H8706-57及其亲本濮农3665、百农3039为材料,用生化标记(醇溶蛋白)及分子标记(RAPD)分析了各材料间的差异,发现突变体与亲本相比,不仅发生了蛋白质水平的变异,而且也在DNA水平上证明了突变的发生,从而为耐盐突变体的真实性提供了有力的证据,排除了盐适应的可能性; 经用218 个引物对5个突变体之间的多态性进行RAPD分析,结果表明,它们之间的差异很小,其遗传背景相似,因而它们是一系列耐盐性不同的近似等位基因系。
Abstract: In this paper, 5 wheat salt tolerant mutants(H8706-34、H8706-44、H8706-48、RH8706-49、H8706-57)derived from anther culture、EMS induction and salt tolerance selection and their parents (Punong3665、Bainong3039)were used as materials, all the mutants have inherited stably for 9 generations. Differences were revealed between the mutants and their parents using chemical marker(gliadin)and molecular marker(RAPD), the results showed that compared with the parents, the mutants varied not only on the protein level,but also on the DNA level,which supplied hard evidence of the truth of the mutants and ruled out the possibility of salt adaptation. RAPD analysis were conducted among the 5 mutants by 218 primers,which proved they were a series of near isogenic lines of different salt tolerance because of their little difference and similar genetic background. 相似文献
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在经典TAIL-PCR(Thermal asymmetric interlaced PCR)的基础上, 对其进行了如下四处改进: 用10个碱基的RAPD引物代替16个碱基的随机兼并引物作为PCR中的随机引物; 将较低特异性循环的复性温度由44°C降至29°C; 增加5个高特异性反应循环, 减少5个较低特异性反应循环; 用单引物对第三轮PCR产物进行初步鉴定。利用改进的TAIL-PCR方法分离了小麦X基因的5′未知的侧翼序列, 与GUS基因融合后转入拟南芥, 通过组织化学检测分析表明分离到的5′侧翼序列具有启动子功能, 同时说明改进的TAIL-PCR能更好地应用到较复杂基因启动子的分离。 相似文献