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植物内生真菌产紫杉醇的研究* 总被引:12,自引:1,他引:11
紫杉醇(Taxol,商品名Paclitaxel)最早是由美国Wani等于1971年分离自短叶红豆杉(Taxus brevifolia)的茎皮部[1],具有独特的抑制微管解聚和稳定微管的作用,对多种临床恶性肿瘤具有突出的疗效,是近年来发现的最重要的抗肿瘤药物之一。随着紫杉醇的需求量日益增大,寻找紫杉醇的新来源已成为当务之急,如化学合成紫杉醇的研究[1],以10-去乙酰巴卡亭Ⅲ为原料半合成紫杉醇[3],利用红豆杉细胞培养技术生产紫杉醇等,但目前尚不具备实用价值。自发现了产紫杉醇的植物内生真菌以后[4… 相似文献
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目的:对尘螨主要变应原Der f 1进行核酸序列测定,探讨其系统进化信息。方法:根据Genbank公布的Der f 1基因序列设计引物,巢式PCR扩增Der f 1的cDNA,纯化、回收、克隆至pMD19-T simple后进行序列测定,序列比对后用Clustal W1.83构建分子进化树。结果:成功扩增出Der f 1的cDNA片段,测序表明该基因含ORF1个,长度966bp,与参考序列同源性达99.9%。该变应原具半胱氨酸蛋白酶活性,与果蝇进化关系最远,与梅氏嗜霉螨进化关系最近。结论:成功获得了尘螨变应原Der f 1基因片段.根据其编码的氨基酸序列构建出的系统进化树与形态学分类不一致。 相似文献
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利用电子差异展示方法克隆人类睾丸高表达新基因SPATA11 总被引:1,自引:0,他引:1
利用NCBI中的电子差异展示(digital differential display,DDD)软件,比较来自睾丸(包括睾丸癌)与来自其它组织的EST文库,从筛查人类睾丸中高表达而在其他组织中不表达或低表达的差异ESTs入手,成功克隆了一个在人类睾丸中高表达的新基因SPATA11.RT-PCR实验证实其在成人睾丸高表达.序列分析表明该基因含4个外显子,基因组跨越2.6kb,定位于19pl3.3.cDNA编码一个含221个氨基酸,相对分子质量为24.5kD的新蛋白.Northern杂交结果显示:该基因含有1.1kb大小的唯一转录本,主要在睾丸中强表达.肝脏、肺、卵巢和肾脏中有微弱表达.而其他组织中该基因无表达. 相似文献
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目的 构建尘螨变应原Der fl原核表达体系,并了解其分子特征。方法 提取粉尘螨总RNA,用RT—PCR合成Der fl编码基因,将其克隆至pMD19-T载体,亚克隆至表达载体pET-28a(+),转化至大肠杆菌并刚IPTG诱导表达。用生物信息学软件对测序结果进行分析并预测其空间结构。结果从粉尘螨总RNA中扩增获得Der fl cDNA片段,成功构建了表达质粒pET-28a(+)-Der fl,Western blotting显示原核表达获得成功。测序结果提交GenBank,臀陆号为EU095368,该基因长966bp,与参考序列同源性达99.9%,推测其编码氩基酸321个,属疏水蛋白,位于细胞外,信号肽位于1~18氨基酸处。同源性分析提示Der fl和Eur ml相似率为88%,而Der fl和Derpl的相似率为77%,分子进化树中粉尘螨和梅氏嗜霉螨聚成一簇。Derfl的二级结构由α-螺旋(109aa,33.96%)、延伸链(55aa,17.13%)、β-转角(18aa,5.61%)和随机卷曲(139aa,43.30%)组成:结论 尘螨变麻原Der fl原核表达获得成功,为进一步生产重组变麻原奠定了基础。生物信息学分析表明粉尘螨和梅氏嗜霉螨的亲缘关系可能更近,而与屋尘螨关系稍远,此与现行的形态学分类系统并不符合。 相似文献
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小鼠睾丸生精细胞凋亡相关基因SRG2的分子克隆及其在隐睾中的表达特征 总被引:2,自引:1,他引:2
从已获得的在隐睾和正常睾丸对照中表达量有明显差异的EST片段(BE644542)入手,利用网上生物信息学克隆了SRG2基因全长,GenBank登录号为AF395083。从小鼠睾丸cDNA文库中分离出该基因完整阅读框cDNA,SRG2基因的cDNA全长为1088bp,为编码295个氨基酸、分子量为33579kD、等电点为9.64的蛋白质,与人类同源基因TSARG2相似性为78%,而与其他已知蛋白质无明显同源性。RT-PCR结果表明:该基因只在睾丸中有高表达。应用新型的分子信标检测该基因在不同时期隐睾中的mRNA表达水平,发现该基因呈明显上调,证明该基因在隐睾的发生发展中具重要作用。 相似文献
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不同海拔高原适应相关肝脏功能与脂代谢变化 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:分析高原移居者肝脏功能及血脂水平。方法:选择不同海拔高原移居者(平均10年以上)男性80名,无高血压及糖尿病病史。按高原会议订立标准分组:低海拔组(〈1500米)8例,中海拔组(1500-2500米)9例,高海拔组(2500-4500米)36例,特高海拔及以上组(〉4500米)9例,运输组(2700-4600米)18例。清晨抽取空腹静脉血5mL,Roche Modular PE全自动生化免疫分析仪检测肝脏功能及血脂水平。结果:高海拔移居者,总胆红素和直接胆红素升高,总胆固醇、低密度脂蛋白降低;特高海拔及以上移居者(〉4500米),直接胆红素升高,总胆固醇、低密度脂蛋白、载脂蛋白B降低。结论:本文研究结果提示了,高原缺氧环境下,肝脏自身功能抗缺氧发生改变或高原饮食受限可引起肝脏功能变化,进而影响脂类代谢,是机体对长期乏氧状态的适应性改变。 相似文献
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摘要 目的:探讨血清同型半胱氨酸(Hcy)、胰腺衍生因子(PANDER)、肥胖抑制素(Obestatin)与妊娠期糖尿病(GDM)患者血糖控制情况和妊娠结局的关系。方法:选择2021年1月至2022年1月于我院就诊的286例GDM患者,根据分娩前糖化血红蛋白(HbA1c)水平分为血糖控制达标组(HbA1c<7%,173例)和血糖控制不达标组(HbA1c≥7%,113例),检测并比较两组患者入组时血清Hcy、PANDER、Obestatin、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗(HOMA-IR)水平,采用Pearson相关分析Hcy、PANDER、Obestatin与FPG、FINS、HOMA-IR的相关性。根据妊娠结局分为妊娠结局不良组(90例)和妊娠结局良好组(196例),采用多因素Logistic回归分析GDM患者妊娠结局的影响因素。结果:血糖控制不达标组血清Hcy、PANDER、FPG、FINS、HOMA-IR水平均高于血糖控制达标组,而Obestatin水平低于血糖控制达标组(P<0.05)。血清Hcy、PANDER水平与FPG、FINS、HOMA-IR水平均呈正相关,Obestatin水平与FPG、FINS、HOMA-IR水平均呈负相关(P<0.05)。妊娠结局不良组年龄、入组时体质量指数(BMI)、糖尿病家族史、血糖控制不达标比例以及血清Hcy、PANDER、FPG、FINS、HOMA-IR水平均高于妊娠结局良好组,Obestatin水平则低于妊娠结局良好组(P<0.05)。血糖控制不达标、血清Hcy、PANDER水平是GDM患者妊娠结局不良的危险因素,而Obestatin水平是保护因素(P<0.05)。结论:GDM血糖控制不达标患者血清Hcy、PANDER水平增高,Obestatin水平降低,且与胰岛素抵抗和妊娠结局不良有关。 相似文献