一个RNAi载体上反向重复片段的测序策略

相邻的反向重复DNA片段有形成单链内二级结构的倾向,属于一种测序困难的DNA模板。解决RNAi载体插入的反向重复片段的测序问题,为该类载体正确性的测序验证奠定基础。采用常规分子克隆方法构建表达小麦TaATG2串联反向重复片段的RNAi载体,设计2种策略对经菌落PCR初步鉴定的载体进行测序验证:一种是以完整的载体质粒为模板进行测序;另一种是先对载体进行酶切处理,切除反向重复片段中的一个后对保留另一个片段的线性载体进行测序。结果表明,第一种测序策略受到串联反向重复片段形成的单链内部二级结构的影响,测序信号在反向重复片段处出现衰减或乱峰,无法读取序列。第二种测序策略排除了2个反向重复片段之间的干扰,保留在载体上的片段测序信号清晰,序列准确。采用酶切切除一个片段后进行测序的方法,经过2次酶切和2次测序可以有效地对载体上的2个反向重复片段分别进行序列测定,进而确认构建载体的正确性。     

伴与不伴边缘性人格障碍的首发中青年抑郁症患者认知功能、临床症状的差异及其相关性分析

目的:比较伴与不伴有边缘性人格障碍(BPD)的首发中青年抑郁症患者认知功能及临床症状的差异,并分析相关性。方法:选取自2017年3月至2020年1月于我院就诊的首发中青年抑郁症患者167例,按照纳入标椎及排除标椎,剔除21例不符合者,最终入组146例。将伴有BPD的抑郁症患者归为研究组(72例),不伴有BPD的抑郁症患者归为对照组(74例)。采用韦氏记忆量表(WMS-RC)、韦氏智能量表(WAIS-RC)、威斯康星卡片分类测验(WCST)对两组患者进行认知功能的对照性评估,采用症状自评量表(SCL-90)评估患者临床症状,Pearson相关性分析患者认知功能与临床症状的关系。结果:研究组的人际关系敏感因子评分较对照组升高(P<0.05)。研究组即刻记忆、语言智商数、操作智商数评分均低于对照组,而持续错误数多于对照组(P<0.05)。经Pearson相关性分析可得:伴有BPD的首发中青年抑郁症患者人际关系敏感因子评分与即刻记忆、语言智商数、操作智商数均呈负相关关系(P<0.05),而与持续错误数呈正相关关系(P<0.05)。结论:伴有BPD的首发中青年抑郁症患者较不伴有BPD的抑郁症患者认知功能受损更为严重,人际关系敏感性更高,且患者的认知功能与临床症状存在一定的关联。