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采用Tn5-mob-sacB转座子对华癸中生根瘤菌(Mesorhizobium huakuii)菌株7653R的共生质粒进行定向标记,获得该质粒标记菌株7653RT14.利用sacB基因对蔗糖的敏感性,对标记质粒进行消除实验,获得7653R的共生质粒消除突变株7653R-1.测得Tn5-mob-sacB转座频率高于10-5.突变株的培养特征与出发菌株基本一致.采用琼脂管法对7653RT14和7653R-1进行回接实验,结果显示7653RT14能正常结瘤固氮,表明Tn5的插入并未影响其共生能力,但失去共生质粒的7653R-1则为不结瘤或只结个别小瘤.稳定性实验结果表明供试菌株的标记质粒在本实验条件下是稳定的,可以作为共生质粒转移的供体菌. 相似文献
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金针菇品系间酯酶同工酶标记筛选研究 总被引:6,自引:0,他引:6
采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板状电泳,研究了不同生长发育期,不同组织对金针菇酯酶同工酶电泳表型的影响,筛选出不受生长发育期及常规培养条件等影响的酯酶标记区带。标记区带分所有品系的出现的基本带和部分品系出现的识别带。酯酶同工酶标记区带电泳表型显示出多态性。 相似文献
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采用三亲本杂交将Tn5-mob-sacB标记华癸中生根瘤菌(Mesorhizobium huakuii)HN3015的非共生质粒pMhHN3015a分别导入HN308SR和7653R-1SR, 获得2个转移接合子HN308SRN29和7653R-1SRN29。HN308SRN29的质粒图谱显示HN308SR的pMhHN308b被消除, 该结果暗示pMhHN3015a和pMhHN308b不相容。然而, HN308SRN29的质粒消除实验未获得标记质粒消除突变株。pMhHN3015a和pMhHN308a的大小 相似文献
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前期研究从臭蒿中提取分离出臭蒿抗菌流分Fr.5.2主要成分为青蒿素衍生物。为了研究青蒿素衍生物的抗菌机理,测试Fr.5.2和双氢青蒿素(Dihydroartemisinin,DHA)对烟草链格孢菌的抗菌活性、细胞膜完整度、胞内物质的泄露、菌体和孢子的影响。结果发现:Fr.5.2对烟草链格孢菌最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)为1.25 mg/m L,最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)为2.5 mg/m L,DHA对烟草链格孢菌的MIC为10 mg/m L,MBC为10 mg/m L。0.625 mg/m L Fr.5.2和2.5 mg/m L DHA作用于烟草链格孢菌,在0~3 h,细胞膜完整度不断下降,胞内核酸大分子不断流失;SEM观察发现菌丝体细胞膜细小、有空洞,孢子表面也有凹陷;Fr.5.2和DHA还可以抑制麦角甾醇的合成,与空白组相比,麦角甾醇的含量分别降低29.77%,28.99%,孢子平均密度提高,但是萌发率降低。这些实验结果表明,青蒿素衍生物能够抑制真菌麦角甾醇的合成,破坏细胞膜,阻碍真菌细胞的新陈代谢,破坏真菌孢子,能有效的抑制、杀死真菌。 相似文献
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【目的】分析和研究产气荚膜梭菌中前噬菌体的分布情况、基因组特点及遗传进化关系。【方法】利用PHASTER (phage search tool enhanced release)软件预测产气荚膜梭菌携带的前噬菌体,基于ANI (average nucleotide identity)值对前噬菌体进行分群,利用CARD (comprehensive antibiotic research database)、Res Finder 4.1、VFDB (virulence factors database)和Bac Met(antibacterial biocide&metal resistance genes database)分析前噬菌体携带的耐药基因、毒力基因、抗菌剂/金属离子抗性基因,利用CRISPRCas Finder分析产气荚膜梭菌的CRISPR-Cas系统,利用MEGA 7.0进行前噬菌体的遗传进化关系分析。【结果】产气荚膜梭菌平均携带前噬菌体2.67条,其长度呈双峰分布,平均占基因组2.23%;前噬菌体不携带耐药基因,但携带了α毒素、唾液酶和溶血素等毒力基因以及重金属... 相似文献
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摘要:【目的】repC为质粒复制必需的起始蛋白基因。本研究旨在对华癸中生根瘤菌菌株HN3015及其质粒消除突变株进行repC基因的克隆和鉴定。【方法】采用通用引物RC1和RC3进行repC基因的PCR扩增,扩增产物克隆到载体pMD-18T,然后测序。利用Southern 杂交对repC基因定位。利用在线软件分析基因的序列特征,BLAST 工具进行同源性搜索;ExPASy推断其氨基酸的序列;ClustalW进行同源核苷酸和氨基酸序列的多重比较分析;PredictProtein 进行蛋白二级结构分析。【结果】 相似文献
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