Southern十字转印杂交法——一个组建DNA物理图谱的最新技术

New England Nuclear(NEN)公司1984年推出一个组建DNA物理图谱的最新方法：Southern十字转印杂交系统。其构思之巧、效率之高、结果之精为其他方法所望尘莫及。此法是将一个限制酶的消化物制成放射性探针,与另一个酶的消化物分别进行制备性电泳,并转印到特制的膜上。将两膜面对面、垂直的叠合进行固体杂交。经放射自显影后,在一张X光片上可直接排出各片段的顺序,组建成这两个酶的物理图谱。一次实验甚至可完成十个酶物理图谱的组建。     

紫外线诱发白地霉(Geotrichumcandidum)变異的研究

(一)研究了紫外线照射的剂量与白地霉AS 2．361存活率和变异率的关系,存活率是随着剂量的增加而降低,变异率则随着剂量的增加而增高,井达到最高峯;当继续增加剂量时变异率就下降,当剂量达到最高时变异率重新上升,而获得双峯曲线。出现最大变异频率的最适剂量为距离在25厘米照射时间为5分钟。 (二)共研究了10761个菌落,得到形态变异菌落6…60个,变异性最大的有360个,分为六个类型：第一类型是凉帽状菌落;第二类茵落干癣而薄,表面满布针状小孔;第三类菌落紧密;第四类为中部下陷成空窗状菌落;第五类菌落茸毛短而稀疏;第六类菌落厚,中部呈梗状突起。其中以照射5分钟出现的类型和菌落都最多,照射1分钟最少。 (三)白地霉As 2．361经单次紫外线照射结果,筛选出的形态变株中能显著增高菌体内脂肪和蛋白质的含量。所测20个变株中,其脂肪合量全部高于原始菌株,有65％的变株增高了蛋白质含量。2次照射后所选出变株蛋白厦含量又有提高,脂肪情况刖相反。3次照射,蛋白质含量下降,而脂肪增高。     

泸州大曲酒窖泥中微生物的生态分布和嫌气发酵特征

在泸州大曲酒新窖老熟的研究方面,我们对酒窖窖泥中细菌的生态分布及嫌气性细菌的代谢活动作了一些探讨,本文主要报道这方面     

用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统高效表达绿色荧光蛋白标记的HBVe抗原

通过基因工程操作,使乙型肝炎病毒ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）基因与绿色荧光蛋白基因（ＧＦＰ）融合,用新型Ｂａｃ－ｔｏ－Ｂａｃ杆状病毒表达系统在昆虫细胞中高效表达了ＨＢｅＡｇ－ＧＦＰ双功能融合蛋白。经ＥＬＩＳＡ法和荧光显微镜观察证实,表达产物既能发射易于检测的绿色荧光,又具有ＨＢＶ的ｅ抗原活性,为免疫诊断新方法的建立进行了有益的探索     

环孢菌素A的研究进展及应用

环孢菌素A是从真菌中提取的一种新型免疫抑制剂,可选择性作用于T细胞,抑制其活化,现主要应用于器官移植时的排斥反应。工业上多以真菌孢子为原料,发酵生产进而分离纯化的方法得到环孢菌素A,以D-丙氨酸作为底物,在丙氨酸消旋酶和环孢菌素合成酶的作用下,通过复杂的40步反应也可以合成环孢菌素A。     

杆状病毒lef基因家族及其功能

病毒基因结构与功能和表达调控的研究是分子生物学领域的热点之一。其核心内容是揭示病毒基因组的复制机理以及早期基因对晚期基因的调控机制。昆虫杆状病毒基因的表达是级联式调控,按其表达的时序可分为极早期基因、早期基因、晚期基因和极晚期基因。早期基因主要为病毒基因组DNA复制、晚期基因的表达提供必需的蛋白因子。     

一种新杨树菇(Agrocybe aegerita)凝集素的纯化及生化特性

用硫酸铵分级沉淀、离子交换和分子筛等方法 ,从食用菌杨树菇子实体中分离纯化了一种凝集素 ,称作为AAVP(Agrocybeaegeritaantiviralprotein) .经SDS PAGE测定其亚基的相对分子质量为15 8kD ,凝胶过滤分析分子量为 32kD .IEF PAGE计算其等电点为 3 8.AAVP不含糖 ,是一种N端焦谷氨酰环化封闭的蛋白质 ,经N端去封闭后测得N端氨基酸序列为QGVNIYNIVAGA ,用胰蛋白酶消化后得到一大片段 ,测定的氨基酸序列为PDGPWLVEK .AAVP可以凝集供试的 12种动物血和3种血型人血的血红细胞 ,但对各种血红细胞凝集滴度不同 .糖抑制实验表明 ,在供试的 18种单糖和 3种糖蛋白中 ,只有猪胃粘蛋白强烈抑制AAVP的凝血活性 .AAVP具有较好的热稳定性 ,能够忍受极端的酸碱条件 .AAVP的凝血活性不受Ca2 + 、Mg2 + 、Zn2 + 等二价阳离子的影响 .抗肿瘤活性检测表明 ,AAVP对胃癌细胞株SGC 790 1,MGC 80 3,BGC82 3及人急性白血病细胞株HL 6 0有明显的抑制作用 .AAVP对小鼠腹腔注射的半致死剂量为 15 85mg kg .