产黄青霉菌原生质体的营养互补融合和二倍体的形成

采用0.5％纤维素酶(来自Trichoderma pseudokoningii)加0.5％玛瑙螺酶(来自Achatina fulica Férussac)的混合酶液获得的原生质体,以国产30％聚乙二醇分子量6,000(自5,500—7,500),0.01M CaCl_2作融合剂,成功地获得了产黄青霉菌(Penicillium chrysogenum)原生质体的营养互补融合。自7个菌株组成的7对杂交组合中获得了异核体,并分离到深绿色原养型杂种。比较亲本及杂种的孢子体积及DNA含量,证明杂种是二倍体,二倍体稳定。原生质体融合频率为0.07—0.38％。二个菸酸缺陷型807和817可以发生营养互补,并形成异核体,可能是非等位基因变异的原因。 试验中观察了融合剂的pH,聚乙二醇的纯化,以及残留酶液对融合的作用。     

产黄青霉原生质体融合杂种的产青霉素能力及非强制选择杂种的探讨

4个产黄青霉选育系谱的14列营养缺陷型原生质体融合率为0.01一8．88％。原生质体经紫外光照射后融合,有可能在非选择性的cM上分离出杂台二倍体。系谱内杂台二倍体的青霉素产量与直接亲本是否比原始亲本显著减产有关。系谱问杂合二倍体中双亲与产量有关的基因之间没有明显的显隐关系或累加效应。系谱I与I的杂合二倍体F16②—c24的分离子HP7②一1显示出比原始亲本更好的选育潜力。     

产黄青霉(Penicllium chrysogenum)两株营养缺陷型原生质体的形成和再生的因素的研究

采用0.5％纤维素酶(来自拟康氏木霉Trichoderma PseudokGningii)加0.5％褐云玛瑙螺酶(Achatina fulica Ferussac的消化液)的混合酶,自产黄青霉的两个营养缺陷型中获得了大量的原生质体。比较了渗透压稳定剂、温度、pH值、酶解温育方式和菌丝体的培养基成份等因素对两菌株原生质体的形成和再生的作用。801菌株的原生质体直径较小,原生质体的释放早而不稳定,但对钠离子较适宜,并且在后期有钙离子时较为稳定。822菌株的原生质体直径较大,释放较迟,较稳定,对钾钠两种离子的影响差异并不大。