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一种利用Taq酶快速标记DNA探针的方法 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探索低成本、高效、快速的DNA探针标记方法。方法:以特定引物和16nler的随机引物作为延伸引物,利用Taq酶标记DNA探针。以大肠杆菌Klenow片断随机引物延伸标记法作为对照。点杂交方法检测探针标记效果。结果与结论:Taq酶标记法和大肠杆菌Klenow片段随机引物延伸标记法同样有较好的标记效果,且随机引物或特定引物作为延伸引物均可以合成足够有效的探针。Taq酶标记法是一种低成本、高效、快速的DNA探针标记方法。 相似文献
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摘要:【目的】通过分析FTR1、FTR2基因缺失株在不同培养条件下的生长情况以及菌丝生长能力,明确高亲和性铁离子渗透酶在白念珠菌生长和形态发生中的功能。【方法】将不同基因型的菌株分别置于不同的培养基和培养温度下进行培养,对其生长速度以及菌丝的生长状态进行观察,获取相应的实验结果。【结果】FTR1或FTR2单基因缺失对于白念珠菌的生长没有显著的影响,但是FTR1、FTR2双基因缺失使白念珠菌在Spider培养基中不能生长,铁离子的增加能够恢复该双基因缺失株的生长能力。FTR1、FTR2双基因缺失株在营养贫瘠的合成培养基上生长速度也较慢。此外,ftr1/frt1菌株的菌丝生长能力增强,而ftr2/ftr2菌株的菌丝生长能力减弱。双突变株ftr1/ftr1 ftr2/ftr2的菌丝生长能力能够恢复到野生对照株的水平。【结论】Ftr1与Ftr2对白念珠菌在微量铁元素环境中的生存有着重要的作用,还参与了白念珠菌对碳源N-乙酰葡萄糖胺、乙醇和甘油等的利用。此外,Ftr1对白念珠菌菌丝生长起负调控作用,Ftr2对菌丝生长起正调控作用。因此,ftr1/ftr1 ftr2/ftr2双基因突变株的菌丝生长能力能够恢复到野生对照株的水平。 相似文献
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ste20基因突变抑制葡萄糖诱导的酿酒酵母细胞凋亡 总被引:1,自引:0,他引:1
近年来,酿酒酵母的细胞调亡研究取得了很大进展。多种因素可以诱导其调亡,譬如过氧化氢(H2O2)、醋酸、高渗透压和高盐浓度等。葡萄糖是酿酒酵母生长所必须的重要营养物质之一。同时,在其他营养元素缺乏的条件下,只用葡萄糖培养将迅速的诱导酿酒酵母的细胞凋亡。Ste20是PAK(p21 activated kinase)家族的成员,它参与酿酒酵母的信息素应答、假菌丝生长和侵入生长等途径。有研究表明,ste20突变株能抵抗由信息素和过氧化物诱导的细胞调亡。我们发现STE20基因突变也能抑制葡萄糖诱导的凋亡,用葡萄糖处理时,与野生型相比,ste20突变株细胞能保持完整的细胞膜和细胞核结构。H2O2诱导酿酒酵母细胞凋亡时,需要Ste20激酶磷酸化组蛋白H2B第十号丝氨酸(S10)。因此,葡萄糖诱导的酿酒酵母细胞凋亡作用可能通过类似于过氧化氢诱导的酿酒酵母细胞凋亡的途径进行的。 相似文献
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耳念珠菌Candida auris已成为引起严重院里感染的新兴病原真菌。自2009年第一次报道以来,耳念珠菌在全球迅速传播并导致几次院内感染的暴发。与念珠菌属其他成员相比,耳念珠菌具有诸多特点,比如多重耐药、鉴别困难、死亡率高、易在医院内传播等。关于耳念珠菌的生物学和致病性研究越来越多,我们对耳念珠菌的认识也逐渐增强,本综述详细地介绍了耳念珠菌全球感染的流行病学以及该病原真菌的基本生物学特征,并对其毒力和耐药机制研究进展进行汇总,对未来关于耳念珠菌研究的前景进行了展望。 相似文献
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从水稻中分离克隆出一个双功能激酶(OsSTY)基因,它编码一个含417个氨基酸的蛋白,其分子量为45926Da,等电点为7.689。OsSTY参与多种胁迫条件下的信号传导途径。低温或高温(4℃和37℃)处理后,OsSTY激酶的表达显著提高。机械损伤、水杨酸、乙烯等处理也促进该基因转录。另外,0sSTY基因在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)ste7基因缺失株(ste7/ste7)中的异源表达能够抑制该菌株在氮源饥饿条件下假菌丝生长的缺陷。Ste7是酿酒酵母的一个丝氨酸/苏氨酸/酪氨酸双功能激酶,它与OsSTY的激酶功能域有32%的同源性和50%的相似性。这揭示出OsSTY激酶能够校正,至少能部分地校正酿酒酵母ste7基因缺失株的假菌丝生长缺陷。 相似文献
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