金黄色葡萄球菌儿童临床分离株携带PVL基因状况的分析

目的了解金黄色葡萄球菌儿童分离株携带Panton-Valentine杀白细胞素（PVL）基因的状况及感染类型。方法采用多重PCR同时检测金黄色葡萄球菌16SrRNA基因、PVL基因和mecA基因;多重PCR检测MR—SA的SCCmec基因型及亚型。结果66株金黄色葡萄球菌JL童临床分离株经多重PCR检测,其中MRSA有7株（10．6％）,MSSA有59株（89．4％）;携带PVL基因金黄色葡萄球菌有31株,总阳性率为47．O％（31／66）,其中2株为MRSA,29株为MSSA,阳性率分别为28．6％（2／7）和49。2％（29／59）。2株MRSA都属于SCCmecIV型;31株PVL基因阳性分离株有21株分离自脓液,7株分离自血液,仅1株分离自痰液。结论儿童MSSA是携带PVL基因的主要菌株,携带PVL基因的金黄色葡萄球菌主要引起化脓性感染和血流感染。     

环介导恒温扩增法检测肺炎链球菌的研究

目的 建立环介导恒温扩增(LAMP)检测肺炎链球菌的方法.方法 用LAMP技术扩增肺炎链球菌菌株,并应用50例临床标本采用传统培养法、PCR法、LAMP法进行检测,比较3种方法的检出率,同时检测方法特异性和灵敏度.结果 所测肺炎链球菌均获扩增产物,对其他非肺炎链球菌无交叉反应.LAMP检测灵敏度可达102 CFU/mL.50例临床标本使用LAMP法检出9例肺炎链球菌阳性(18.0％),使用传统培养法检出阳性4例(8.0％).结论 LAMP法较传统培养检测方法特异性强、灵敏度高、操作方便、快速,适合临床标本的肺炎链球菌检测.     

一株弗劳地枸橼酸杆菌中检出新ampC基因

目的探讨1株耐亚胺培南弗劳地枸橼酸杆菌的耐药机制。方法采用浓度梯度法（Etest）检测对抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC）。通过金属酶初筛试验（协同法）检测金属酶;改良Hoged试验检测碳青霉烯酶;头孢西丁三维试验检测AmpC酶;聚合酶链反应（PCR）检测耐药基因;DNA测序决定基因型;接合试验检测耐药基因的转移性。结果弗劳地枸橼酸杆菌临床分离株NC118对亚胺培南的MIC为〉16μg/ml,金属酶初筛试验阴性,Hoged表型确证试验碳青霉烯酶阳性,AmpC酶阳性,PCR扩增及测序显示含有blaKPC-2、blaAmpC基因,该菌株所产AmpC酶基因与CMY-45型AmpC酶（GenBank：ACU00152.1）比较有5个氨基酸发生了改变,该blaCMY-2-like基因为一个新型的AmpC酶基因。结论在弗劳地枸橼酸杆菌中发现一种新的ampC基因（blaCMY-49）。     

弗劳地枸橼酸杆菌的临床分布及耐药特性分析

目的了解弗劳地枸橼酸杆菌临床分离株的分布特点,探讨其耐药规律,为临床防治其感染提供帮助。方法常规方法进行菌株分离,VITEK-32型或VITEK-2全自动微生物分析仪进行菌株鉴定,K-B法进行药物敏感性试验,采用WHONET 5.5软件分析数据。结果 2007年6月至2009年12月从各种感染性标本中共分离到47株弗劳地枸橼酸杆菌,呼吸道标本占绝大多数,达51.1%(24/47),其次为脓液和尿液,分别为23.4%(11/47)和12.8%(6/47)。该菌种对氨苄西林和头孢唑啉的耐药性最严重,耐药率分别为92.6%和91.9%,其次是氨苄西林/舒巴坦、头孢西丁、头孢噻肟、左氧氟沙星及复方磺胺甲口恶唑,耐药率均45%,耐药率较低的有亚胺培南和阿米卡星,耐药率分别为8.3%和8.6%。结论弗劳地枸橼酸杆菌可引起患者多部位感染,下呼吸道是其主要感染部位,该菌种耐药性较严重,亚胺培南和阿米卡星对其有较强的抗菌活性。     

血流感染葡萄球菌菌种分布及耐药特性分析

目的了解血流感染中葡萄球菌的菌种分布及其耐药特性,以指导临床合理使用抗菌药物。方法回顾性分析南昌大学第二附属医院2013年1月至2013年8月期间临床各科室送检的血培养标本中葡萄球菌的菌种分布和耐药特性。采用BACT/ALERT 3D全自动血培养仪进行培养,VITEK2-compact全自动细菌分析仪进行菌种鉴定和药敏试验。WHONET 5.6软件分析数据。结果共分离获得176株葡萄球菌,其中金黄色葡萄球菌24株,占13.6%;路邓葡萄球菌1株,占0.6%;凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)151株,占85.8%,人葡萄球菌53株、溶血葡萄球菌32株、表皮葡萄球菌23株及头状葡萄球菌15株居前四位。最常见的葡萄球菌分别为人葡萄球菌、溶血葡萄球菌、金黄色葡萄球菌及表皮葡萄球菌。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林CNS(MRCNS)检出率分别为29.2%和85.4%,对青霉素耐药率均100.0%,磺胺甲噁唑对MRSA(耐药率仅14.3%)有较强的体外抗菌活性,利福平对MRCNS(耐药率仅18.2%)有较强的体外抗菌活性,均未发现耐万古霉素、利奈唑胺和替加环素的菌株。结论葡萄球菌引起的血流感染菌种分布较广,以人葡萄球菌、溶血葡萄球菌、金黄色葡萄球菌及表皮葡萄球菌为主,人葡萄球菌较金黄色葡萄球菌耐药及多重耐药性严重,但均仍对万古霉素、利奈唑胺、替加环素保持高度敏感。     

2013年临床分离菌耐药性分析

目的了解南昌大学第二附属医院2013年临床分离菌对抗菌药物的耐药性。方法采用纸片扩散法或自动化仪器法进行药敏试验,参照CLSI 2013年版判读结果,用WHONET5.5软件进行数据分析。结果2013年共收集非重复临床分离菌3996株,其中革兰阴性菌2 623株（65.6%）,革兰阳性菌1 373株（34.4%）。标本来源以痰液为主（23.2%）,其次为血液（21.6%）和尿液（17.8%）。居前5位的菌种依次为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌,分别占20.9%、10.1%、9.4%、8.7%和7.4%。甲氧西林耐药金葡菌和CNS（MRSA和MRCNS）分别占各自菌株的21.3%和82.0%,未发现对万古霉素和替加环素耐药的葡萄球菌。肺炎链球菌中青霉素耐药株占16.4%,β溶血性链球菌对红霉素、克林霉素和四环素耐药率较高。屎肠球菌对多数抗菌药物的耐药率高于粪肠球菌,共检测出2株粪肠球菌对万古霉素耐药。大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌（肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌）中ESBLs的检出率分别为60.2%和27.2%,产ESBLs株对大多数抗菌药物的耐药率高于非产ESBLs株。肠杆菌科细菌对厄他培南和亚胺培南的耐药率均低于10%。铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率为8.7%。鲍曼不动杆菌除对左氧氟沙星耐药率为34.6%外,对其他常用抗菌药物的耐药率均大于50.0%,多重耐药鲍曼不动杆菌的检出率为74.9%。结论我院临床分离菌仍以革兰阴性杆菌为主,细菌耐药性仍是临床重要问题,尤其是耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌（CRKP）增加较快,应引起临床高度重视。