短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus) WHK4以羽毛粉为底物产蛋白酶条件的优化

探索Bacillus pumilusWHK4以羽毛粉为底物产酶的最佳条件和最佳培养基组成。以羽毛粉发酵培养基为基础,首先采用单因子试验考察底物浓度、初始pH、接种量、外加碳源、外加氮源对WHK4产酶活力的影响。在单因子试验的基础上采用正交试验设计对底物浓度、温度、初始pH、接种量、外加(NH4)2SO4、外加麦芽糖进行优化。结果显示:Bacillus pumilusWHK4最佳的产酶条件为初始pH7.38,菌龄16 h,接种量5%,37℃。最佳的培养基组成为:1 L基础发酵培养基,40.0 g羽毛粉,10.0 g(NH4)2SO4和10.0 g麦芽糖。在优化的条件下Bacillus pumilusWHK4 24 h产蛋白酶活力为每毫升90 U。对培养条件和培养基的优化为Bacillus pumilusWHK4产蛋白酶的分离纯化奠定了基础。