明胶亲和层析介质分离纯化猪血浆纤维结合蛋白

目的：研究猪血浆中纤维结合蛋白的分离纯化方法,得到高纯度、高活性的目标蛋白。方法：以明胶亲和层析介质对猪血浆纤维结合蛋白进行分离纯化,考察了不同洗脱方式对纯化结果的影响,对产品进行了纯度、生物活性的测定。结果：通过对纯化工艺条件的摸索,采用含不同浓度尿素缓冲液进行分步洗脱,可以得到纯度为95％以上的产品,回收率达到50．96％;经BHK细胞培养实验证明其具有与人血浆纤维结合蛋白同样的生物活性。结论：采用了较温和的洗脱方式以明胶亲和层析介质对猪血浆纤维结合蛋白进行分离纯化,提高了动物资源的可利用性。     

山羊乳腺生物反应器表达人促红细胞生成素的分离纯化

以离子交换、疏水作用、HPLC和凝胶过滤层析等方法对山羊乳腺生物反应器表达的人促红细胞生成素 (erythropoietin ,EPO)进行了分离纯化 ,初步探讨了其分离工艺 ,结果得到了纯度达到 96%以上的纯品 ,所纯化的EPO分子质量为 32kDa ,糖基化程度根据理论分子质量测算为40 %。Western blot证明所得纯化产品具有天然EPO免疫原性 ,N端氨基酸序列测定与文献报道一致 ,ELISA检测免疫活性为 2 4 0 0 0 0IU mg,表明通过 4步纯化步骤可以得到高纯度的产品 ,为今后工艺放大提供了有力的实验依据。     

渤海危机

<正>根据世界自然保护联盟(IUCN)2012年发布的一份调查报告,在全球总计8条候鸟迁徙路线中,东亚-澳大利西亚迁飞路线上受威胁的水鸟物种数量最多。在这条迁飞路线上,有16处潮间带水鸟生物多样性关键区域,其中渤海就占了3个,它们分别是北部的辽东湾、西部的渤海湾、南部的莱州湾。我们发布的首轮报告指出,近20年来,黄渤海沿岸发生了大范围的围填海事件。在渤海,人     

刺槐日蒸腾过程的Penman-Monteith方程模拟

研究半干旱地区林木的实际蒸腾量 ,对研究防护林密度调控、提高林木水分利用率及林分稳定有着重要的理论意义。试验地位于山西省方山县的北京林业大学径流林业试验场 (北纬 37°36′5 8″,东经 1 1 0°0 2′5 5″)。试区平均海拔 1 2 0 0 m,多年平均降水量 41 6mm,水面蒸发 1 85 7.7mm。研究试验林为 1 986年春季造林的刺槐 ( Robinia pesudoacacia L .) ,6种造林密度 ( 830～ 3330株 / hm2 ) ,郁闭度 0 .85～ 0 .9。研究的主要思路是 :如忽略大气热层结问题 ,考虑气压订正 ,并用冠层整体气孔阻力 rs T代换冠层阻力 rc,将蒸散面净辐射限定于冠层截留净辐射 Rnl,便可在林木气孔阻力等实测数据的基础上 ,应用修改后的 Penman- Monteith公式并使用常规气象数据进行生长季林木蒸腾量的连续计算。研究通过各月 Rn和叶面积指数 LAI的实地观测资料统计计算出了不同月份林冠的消光系数 k,进而确定了由 Rn、k和 LAI计算 Rnl日变化的关系式 ;以各月典型天气实测的蒸腾量和冠层中部的平均单位叶片气孔阻力数据为依据 (由 LI- 1 60 0稳态气孔计测定 ) ,采用反推法并适度精度调整后推算出由 LAI和 rst计算冠层整体气孔阻力 rs T的经验系数 K′值。经与典型实测结果对比 ,模拟的相对误差平均在 1 2 %以内。最后 ,采用     

MiR-210在黑素瘤细胞铁死亡中的作用和机制研究

摘要 目的：探讨miR-210在黑素瘤细胞铁死亡中的作用及其可能调控机制。方法：通过qRT-PCR实验检测0.5 μM铁死亡诱导剂RSL3刺激前后黑素瘤细胞系A2058和451Lu中miR-210的表达水平变化情况;在0.5 μM铁死亡诱导剂RSL3刺激的同时,给予antagomiR-210处理抑制黑素瘤细胞系A2058和451Lu中miR-210的表达后,通过CCK8法检测细胞存活水平,通过流式细胞术检测细胞内lipid ROS水平;在此基础上,通过生物信息学分析、qRT-PCR实验、免疫印迹实验和萤光素酶报告实验明确miR-210对靶分子TFRC的调控作用;在0.5 μM铁死亡诱导剂RSL3刺激的条件下,给予antagomiR-210处理抑制miR-210的表达,同时使用siRNA沉默TFRC的表达水平,通过CCK8法检测细胞存活水平。结果：1）在0.5 μM RSL3刺激后,黑素瘤细胞系A2058和451Lu中miR-210的表达水平显著升高;2） 在0.5 μM RSL3刺激后,抑制miR-210的表达可加剧黑素瘤细胞系A2058和451Lu的死亡,同时显著增加细胞内lipid ROS水平;3）miR-210可直接结合TFRC mRNA的3''UTR区域,过表达miR-210可以显著抑制TFRC的转录和蛋白表达;4）在0.5 μM RSL3刺激的条件下,沉默TFRC的表达可以显著逆转抑制miR-210对黑素瘤细胞系A2058和451Lu铁死亡的促进作用。结论：miR-210是黑素瘤细胞铁死亡的重要抑制因子,且是通过靶向调控TFRC实现的。     

17种陆生贝类齿舌的扫描电镜观察及分类学意义探讨

采用扫描电镜观察了3目10科12属17种陆生贝类的齿舌形态.结果 显示,17种陆生贝类齿舌的中央齿均为1列,侧齿12～218列不等,缘齿0～204列不等.中央齿依齿片上小齿数目分为单齿型、三齿型和多齿型;侧齿与缘齿的形态多样,侧齿齿片上小齿数1～6枚不等,缘齿齿片上小齿数1～10枚不等.结合以往报道的38种陆生贝类齿舌...     

留住黄渤海的潮间带

<正>东亚-澳大利西亚路线是世界上最具生态及生物多样性价值的候鸟迁徙路线之一,而黄渤海的潮间带,特别是其中的泥质滩涂是该路线中至关重要的一环。但是,它们即将被愈演愈烈的人类活动蚕食殆尽。根据最新调查结果,让候鸟飞公益基金于2014年9月发布了《"潮间带"消逝,候鸟何所依——黄渤海"围填海现状"调查》     

ATP-柠檬酸裂解酶在黑素瘤维罗非尼治疗抵抗中的作用机制研究

目的:探讨ATP-柠檬酸裂解酶(ATP-citrate lyase,ACLY)在黑素瘤维罗非尼治疗抵抗中的作用及其可能机制。方法:通过Western blot实验检测5μM维罗非尼处理前后黑素瘤细胞中ACLY的表达水平,采用shRNA干涉黑素瘤细胞中ACLY的表达后再给予5μM维罗非尼处理,通过流式细胞术检测细胞凋亡水平;通过Western blot实验检测黑素瘤特异性转录因子MITF的表达水平,以及抗凋亡蛋白BCL-2和促凋亡蛋白BAX的表达水平。结果:1)维罗非尼处理后黑素瘤细胞ACLY的表达水平较处理前明显升高;2)沉默ACLY可以显著增加维罗非尼处理后黑素瘤细胞的凋亡水平;3)在维罗非尼处理下,沉默ACLY可以导致MITF和BCL-2表达水平较对照组显著降低,BAX表达水平升高。结论:ACLY表达水平升高参与了黑素瘤维罗非尼治疗抵抗,可能与其调控MITF表达的作用有关。