miR-153-5p靶向SNAI1介导结直肠癌细胞的放疗抵抗

目的 探讨miR-153-5p在结直肠癌放疗抵抗中的作用,并进一步研究其潜在分子机制。方法 首先对放疗敏感细胞系SW480及放疗抵抗结直肠癌细胞系SW480R中miR-153-5p表达水平进行RT-qPCR检测;然后利用转染技术构建过表达miR-153-5p的SW480R细胞株,检测过表达miR-153后SW480R在接受放射后其细胞活力、侵袭能力、集落形成能力、凋亡水平的改变;免疫组织化学染色观察放疗敏感及放疗抵抗结直肠癌组织中SNAI1的表达差异;TargetScan分析miR-153-5p潜在靶点并利用荧光素酶实验验证;检测过表达miR-153-5p及SNAI1后SW480R细胞侵袭能力、集落形成能力及凋亡水平。结果 与SW480组相比,SW480R组细胞中miR-153-5p表达降低;过表达miR-153-5p的SW480R细胞细胞活力、侵袭能力、集落形成能力均明显减弱,而凋亡水平显著增加;与放疗敏感结直肠癌组织相比,放疗抵抗结直肠癌组织中SNAI1显著增加;SNAI1可能为miR-153-5p的作用靶点;过表达miR-153-5p及SNAI1后SW480R细胞侵袭能力、集落形...     

荷人肺癌裸鼠上肿瘤细胞Bcl-2 表达及其活性生物时间节律差异

目的:探索荷人肺癌裸鼠上肿瘤细胞Bcl-2表达及其活性生物时间节律差异。方法:体外培养A549人肺癌细胞系,移植到裸小鼠身上,10天成瘤后,随机分为6大组,每大组再分2小组,每组4只,一组不给任何处理,设为对照,各组小鼠分别于光照后不同时间点取肿瘤细胞制成细胞悬液,固定染色后,用流式细胞仪以每个样品检测10000个细胞的数量检测单个细胞的荧光强度,用流式细胞仪检测细胞周期情况,单因素方差分析法检验各期细胞在6个时间点差异的显著性,用Cosinor法考察G1,S,G2,M期细胞在24h的分布是否符合余弦函数,即是否有时辰节律。按6个时间点取的肿瘤细胞,匀浆后裂解细胞,Western Blot法测定Bcl-2的表达。结果:1.结果发现肿瘤的生长曲线高峰出现在睡眠期中点,其次在活动期中点;G1、S、G2期细胞变化符合余弦节律;2.Bcl-2的表达在光照后7h和19h达到峰值,变化趋势与肿瘤细胞的周期性改变一致。结论:荷人肺癌裸鼠上肿瘤细胞的细胞周期可能随昼夜交替呈节律性变化,Bcl-2的表达变化与肿瘤细胞的节律性改变一致。