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毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统是目前最为成功的外源蛋白表达系统之一。该表达系统不存在原核表达系统的内毒素难以除去的问题,也不存在哺乳动物细胞表达系统的病毒和支原体污染问题;并能够对目的蛋白进行类似于高等真核生物的信号肽剪切、二硫键形成、糖基化等蛋白翻译后加工。但是不论是胞内表达或是分泌表达,大多数外源蛋白均面临着被降解的问题,这也是影响目的蛋白表达量的一个重要因素,同时还增加了纯化目的蛋白的难度。目的:研究毕赤酵母GS115在不同碳源培养过程中胞内外蛋白质组学的差异,指导毕赤酵母表达系统的优化。方法:利用LC-ESI-MS/MS方法分析了不同碳源的四种培养基中毕赤酵母GS115的胞内和胞外蛋白种类,利用Griffin等的计算方法计算各个蛋白的含量。结果:利用LC-ESI-MS/MS结合Griffin等的归一化非标定量法SIN得到GS115胞内胞外详尽的蛋白质种类及准确百分比含量。结论:分析不同培养基之间蛋白质组成的差异,从而为以后构建新的毕赤酵母表达体系,为外源蛋白表达系统的优化提供一定的指导意义。 相似文献
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贵州雷公山秃杉种群生活史特征与空间分布格局 总被引:8,自引:0,他引:8
秃杉是一种珍稀濒危植物,以斑块状分布于雷公山东南面斜坡海拔800-1300 m之间的沟谷两侧。从年龄结构、生命表特征、存活曲线以及种群不同龄级个体空间分布格局等方面研究了雷公山秃杉种群生活史特征与空间分布格局。研究结果表明:秃杉的种群结构存在波动性,成年阶段个体较丰富,幼苗与老龄数目相对较少,秃杉自身的生物学特性及环境因素是形成这种现象的主要原因;秃杉种群存活曲线趋于DeeveyⅡ型,出现2个死亡率高峰,一个出现在第6龄级阶段,另一个出现在第12龄级阶段,期望寿命单调下降;秃杉种群空间分布格局总体上为聚集分布,处于不同发育阶段的秃杉种群,其分布格局随时间而发生变化,从幼龄期到中龄期再到老龄期,种群分布格局由聚集分布逐渐变为随机分布,秃杉种群在不同发育阶段的空间分布格局差异与其生物学和生态学特性密切相关,同时受群落小环境的影响。 相似文献
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摘要 目的:探讨微小RNA(MicroRNA,miR)-1165-3p、miR-145水平在支气管哮喘患者中的表达及其临床意义。方法:收集2021年1月-2022年3月中国人民解放军总医院第六医学中心62例支气管哮喘患者作为研究组,其中轻度急性发作27例,中度急性发作22例,重度急性发作13例。另收集同时期、同年龄段30例健康体检者作为对照组。采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测各组血清miR-1165-3p、miR-145表达水平。采用Spearman相关分析不同程度支气管哮喘患者与血清miR-1165-3p、miR-145之间的相关性。通过受试者工作特征(ROC)分析血清miR-1165-3p、miR-145表达水平对不同程度支气管哮喘的诊断效能。结果:与对照组相比,研究组中白细胞介素-6(IL-6)、嗜酸性粒细胞、总免疫球蛋白E(IgE)水平显著升高,第1秒用力呼气容积(FEV1)占预测值百分比(FEV1%)则显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。不同严重程度支气管哮喘患者(轻度、中度、重度)血清miR-1165-3p、miR-145表达水平均高于健康对照组,支气管哮喘越严重,其表达水平越高,且组间、组内比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析显示,miR-1165-3p、miR-145、IL-6表达水平与哮喘严重程度呈正相关(P<0.05),FEV1%与哮喘严重程度呈负相关(P<0.05),嗜酸性粒细胞、总IgE与哮喘严重程度无相关性(P>0.05)。对轻度、中度、重度急性支气管哮喘发作的诊断效能显示:血清miR-1165-3p的曲线下面积(AUC)(0.95CI)分别为3.085(0.326~29.221)、0.712(0.611~0.829)、0.755(0.602~0.948)。血清miR-145的AUC(0.95CI)分别为0.833(0.708~0.979)、0.754(0.590~0.964)、0.816(0.671~0.993)。结论:血清miR-1165-3p、miR-145表达水平具有较高的诊断效能,支气管哮喘越严重,诊断的特异性越高,可作为支气管哮喘严重程度的无创诊断指标。 相似文献
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