HERG在鳞状细胞癌中的表达

目的:探讨HERG在鳞状细胞癌中的表达水平及其意义,对比其与正常骨与软组织中表达有何差别.方法:鳞状细胞癌患者组织标本来自于我科手术室,经免疫组化染色及PCR方法查看其HERG表达水平.结果:免疫组化染色与PCR结果显示,鳞状细胞癌中HERG的表达呈阳性,主要呈膜表达.结论:HERG在鳞状细胞癌中的表达水平呈阳性,且表达水平较高,它可能与肿瘤的发生发展有关.     

灵芝菌丝发酵提取液减肥作用的初步探讨

目的:对灵芝菌丝发酵提取液的减肥作用进行初步研究.方法:用高营养饲料建立营养性肥胖小鼠模型后,治疗组用灵芝菌丝发酵提取液灌胃,对照组用无菌生理盐水,观察体重变化.结果:灵芝菌丝发酵提取液能明显降低肥胖小鼠体重.讨论:灵芝菌丝发酵提取液具有减肥、降低体重作用.     

Annexin Ⅱ基因克隆及真核表达载体的构建

目的克隆人AnnexinⅡ全长cDNA序列,并构建其真核表达载体。方法根据Genbank中AnnexinⅡ基因的碱基序列,利用RT-PCR的方法从人肾脏组织中扩增编码AnnexinⅡ基因,将目的片段与pBS-T载体连接,利用亚克隆的方法将AnnexinⅡ的cDNA片段克隆到pcDNA3.1载体中,并进行序列测定。结果DNA测序证实该片段序列与Genbank完全一致。结论成功克隆人Annexin II全长cDNA序列,并构建出pcDNA3.1—Annexin II真核表达载体,为进一步研究其在肾脏疾病中的作用和机制奠定基础。     

β2微球蛋白在骨髓基质干细胞的表达

通过流式细胞技术和激光共聚焦显微镜探索骨髓基质干细胞（bone mesenchymal stemcells,BMSCs）β2微球蛋白（beta 2 microglobulin,β2M）的表达情况。取第3代相同状态的SD大鼠骨髓基质干细胞,分为A、B两组,A组为未分化的BMSCs,B组为软骨诱导分化1周的BMSCs,两组均采用流式细胞技术和激光共聚焦显微镜分别从数量和细胞轮廓上检测β2M的表达。流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测结果均表明,未分化BMscs的β2M表达明显低于软骨诱导分化的BMSCs。结果表明,未分化的BMSCs免疫原性较低,处于软骨分化的BMSCs免疫原性明显增强。     

不同温度下成骨细胞增殖及其OPG/RANKL mRNA表达的影响

目的:探讨不同温度下对小鼠成骨细胞MC3T3-E1的增殖以及OPG/RANKL表达水平的影响。方法:1.以小鼠成骨细胞MC3T3-E1为体外实验模型,MTT法检检测细胞的增殖情况。2.RT-PCR方法检测MC3T3-E1OPG/RANKL mRNA的表达水平。结果:设定对照组为37℃,高于对照组(38℃-39℃-40℃-41℃-42℃)分别作用于MC3T3-E1细胞1小时/天,连续1周,可刺激细胞增殖,OD值显著增加(P<0.05)。同时可增加OPG mRNA表达,降低RANKL mRNA表达,呈温度梯度依赖性。结论:热刺激促进MC3T3-E1细胞增殖,同时通过调节OPG/RANKL mRNA的表达,直接促进骨形成,抑制骨吸收。     

蔓花生PEPC基因家族的生物信息学分析

为了解花生中磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(phosphoenolpyruvate carboxylase,PEPC)的功能,对二倍体祖先种野生蔓花生(Arachis duranensis)基因组数据库进行分析,发现存在9个Ad PEPC基因家族成员,这些基因的序列长度为3 584~12 956 bp,开放阅读框(ORF)长度为702~3 168 bp,分布在3、5、7、8、9、10号染色体上。蔓花生Ad PEPC家族蛋白的氨基酸序列中均含有HCO3-结合位点和PEP结合位点等保守结构域,根据序列特征可分为植物型、细菌型和序列较短的PEPC等3类,同类蛋白序列的同源性较高,基因结构中的内含子与外显子的数目也较相似。基因表达分析表明,多数成员在花或茎中的表达量较高,Ad PEPC1;2和Ad PEPC4;2在茎中的表达量最高,其他家族成员尤其是Ad PEPC2、Ad PEPC1;5和Ad PEPC1;3在花中的表达量明显高于其他组织,Ad PEPC1;5基因在叶中不表达。Ad PEPC3在根、茎、叶和花中均不表达,推测该基因为假基因。这为深入研究Ad PEPC家族基因的功能奠定了基础。     

血小板生成素诱导胎肝CD34~ 造血干/祖细胞增殖分化与周期蛋白表达的关系

为了解胚胎时期巨核细胞增殖分化特有的内在机制 ,本研究观察了在体外培养体系中 ,胎肝源CD3 4 造血干 /祖细胞在血小板生成素 (thrombopoietin ,TPO)作用下增殖分化特征与相关周期蛋白B1、D1和D3表达及细胞内水平变化的关系。结果发现 :( 1)经 12d培养后 ,TPO使胎肝源CD3 4 细胞数从 1× 0 5个细胞 /ml增加到 13 12± 4 0 6× 10 5个细胞 /ml,CD4 1 细胞增加到了 95 % ,CD3 4 细胞下降到了 3 % ,大部分细胞的DNA倍性为 2N ,少数为 4N ,无大于 4N巨核细胞 ,TPO对MegaCultTm C胶原半固体培养体系中胎肝源CD3 4 细胞形成CFU Mk集落产率的影响呈明显的剂量效应关系 ;( 2 )在整个培养期间 ,周期蛋白B1表达逐渐增加 ,并保持在一个高水平上 ,培养后期 ,高水平的周期蛋白B1出现在G1期细胞上 ;( 3 )周期蛋白D1和D3表达先增加 ,培养后期细胞内水平下降 ,且以G2期细胞为主。该结果提示 :( 1)TPO通过上调周期蛋白B1和在所有细胞周期时限上调周期蛋白D1和D3表达 ,促进巨核细胞祖细胞的增殖分化 ;( 2 )周期蛋白B1在G2 M期的持续高水平和周期蛋白D1和D3在G2 M期的水平下降 ,可能导致胎肝源巨核细胞核内有丝分裂延迟或阻滞。     

热对成骨和破骨细胞影响及热休克蛋白和因子参与调节的研究进展

热物理因素在骨疾病的治疗、骨再生修复过程中的应用及对成骨细胞影响重要性的认识不断被深化,一定温度热处理可促进成骨细胞分化,热休克蛋白及热休克因子参与细胞保护与分化.但目前尚未阐明热对成骨细胞与破骨细胞偶联关系的影响及热休克蛋白70(HSP70)和热休克因子2(HSF2)对成骨细胞RANKL的调节机制.探明该影响及调节机制可能成为揭示热物理干预影响骨转化的关键所在之一.     

热作用下成骨细胞HSP70 mRNA的表达变化及其对破骨细胞增殖的影响

目的:研究不同温度热作用对小鼠成骨细胞系中HSP70 mRNA表达水平的影响及其培养液对小鼠破骨细胞增殖的影响.方法:取小鼠成骨细胞系MC3T3,不同温度(37℃-39℃-41℃-42.5℃)作用其一周,RT PCR方法观察其HSP70表达水平变化,同时取其培养液上清与小鼠破骨前体细胞RAW264.7共培养,MTT法观察其增殖情况.结果:经不同温度热(37℃-39℃-41℃-42.5℃)处理后,MC3T3细胞系中HSP70表达水平明显增加,并且呈现与温度梯度依赖性,其处理后的上清液分别与小鼠破故前体细胞系RAW264.7共培养,MTT法测定其增值水平,结果其增殖受到抑制,且抑制水平与温度呈梯度依赖关系.结论:热刺激可以促进成骨细胞中HSP70的表达,促使成骨细胞抑制破骨细胞增殖,HSP70可能是参与调控成骨细胞与破骨细胞平衡的重要因子.     

微波灭活与射频消融术中联合应用于治疗四肢骨肉瘤的疗效分析

目的:探讨微波灭活与射频消融技术联合应用治疗骨肉瘤的临床疗效。方法:回顾性分析我院自2007年至2012年间手术治疗的具有完整临床资料的骨肉瘤患者29例,其中发生于肱骨上端9例,股骨远端12例,胫骨上段5例,盆腔3例,并经TNM分期。术前采取动脉植入式化疗泵化疗2疗程,并于术中给以微波灭活与射频消融方法联合灭火肿瘤瘤体,刮除肿瘤后行骨水泥填充。术后随访8-60个月,平均50±2月。结果:29例患者中死亡1例,局部复发3例,远端转移2例。结论:微波灭活与射频消融术中联合应用于恶性骨肿瘤术中瘤体灭活,可以达到良好的肿瘤灭活效果,减少术中出血,大大提高患者生存率及降低复发率。