铜绿假单胞菌一氧化氮还原酶编码基因norD的生物学功能研究

一氧化氮还原酶(Nitric oxide reductase,NOR)是反硝化过程中一个非常重要的催化酶,本文通过同源重组的方法敲除铜绿假单胞菌中norD基因,并研究该基因敲除后菌株ΔnorD在好氧条件下的表型变化。研究结果表明,与野生菌株和回补菌株相比,ΔnorD对BIT的抗性增强。同时在BIT作用下,ΔnorD泳动能力减弱、绿脓菌素的合成能力降低,但norD基因不是BIT唯一的作用位点。上述结果明确了好氧条件下norD基因的部分功能,为更好的利用反硝化过程奠定基础。     

一氧化氮在细菌抗药性和生物膜形成中的分子作用

一氧化氮(NO)是一种气体信号分子,具有调节血管张力、引起肿瘤细胞凋亡和减缓植物成熟等功能。最新研究发现,NO可以通过限制菌体对抗生素药物的摄入等保护细菌,但高浓度的NO对细菌又具有杀灭作用;与此同时NO通过双分子系统、c-di-GMP和群体感应等影响细菌生物膜的形成,但细菌种类不同NO的影响效果也不同。本文主要对NO在细菌抗菌机理和生物膜形成的分子作用等进行综述,同时,也对NO研究发展的新方向进行了展望。     

苦楝素联合BIT对白色念珠菌的协同抑菌效果研究

探讨苦楝素与BIT分别单独及二者联合使用对白色念珠菌的浮游菌生长及其生物膜形成的影响。以预加菌液倾注平板打孔抑菌实验法测定苦楝素、BIT及二者联合使用对白色念珠菌菌体生长的抑制效果,96孔板微量稀释法培养该菌浮游菌及其生物膜,分别测定浮游菌及其生物膜的吸光度并进行比较分析,判断最小抑菌浓度(MIC),计算二者联合时的抑菌指数(FIC)。平板打孔抑菌实验结果显示,其抑菌效果依次为:二者联合BIT苦楝素;96孔微量稀释法结果显示:二者联合的FIC系数为0.75;二者联合抑制该浮游菌生长比单用时药效增加了20%～50%,抑制其生物膜的形成比单用时药效增加了33%～50%。苦楝素与BIT联合使用具有对白色念珠菌生长的复配增效抑制作用,不但有效抑制该菌浮游菌生长,也能抑制其生物膜的形成。     

魏氏柠檬酸杆菌淀粉样蛋白编码基因csgA的分子功能

CsgA是淀粉样纤维蛋白(Curli)重要组成部分,用同源重组方法对魏氏柠檬酸杆菌中该蛋白的编码基因csgA进行了敲除,通过生物信息学分析和生长曲线、生物膜、刚果红吸附等实验,发现csgA基因敲除后不影响魏氏柠檬酸杆菌浮游菌的生长,但敲除菌株ΔcsgA的生物膜无法形成,同时,ΔcsgA对羧苄青霉素、庆大霉素、头孢噻肟等的耐药性增强,并且csgA基因也是Ca^2+增强魏氏柠檬酸杆菌生物膜形成的作用位点之一。本研究的结果揭示了csgA基因在魏氏柠檬酸杆菌中具有重要的功能,也为该菌株生物膜的防控提供靶点。