松墨天牛成虫标本保存及其DNA提取质量比较

【目的】探讨适合DNA提取的天牛成虫标本保存方法。【方法】采用SDS-蛋白酶K消化法对液氮中冷冻保存、无水乙醇-20℃冷冻保存、无水乙醇室温保存和干标本室温保存且保存时间在2年以上的松墨天牛Monochamus alternates Hope成虫标本基因组DNA进行提取,并对不同保存方式提取的DNA样本进行了质量比较和分析。【结果】在上述常见的松墨天牛成虫标本4种保存方式中,以液氮中冷冻保存效果最佳,其次为无水乙醇-20℃冷冻保存,插针干标本室温保藏效果最差。利用昆虫线粒体基因CO I和CO II的通用引物从上述DNA中均能够成功扩增出目的片段,测序结果证实扩增片段符合预期。【结论】液氮和无水乙醇-20℃冷冻保存适合松墨天牛成虫标本长期保存,且不影响后续的PCR扩增和测序。     

绿巨人的组织培养及快速繁殖

绿巨人 ( Spathiphyllum floribundum)是天南星科苞叶芋属的一种多年生草本植物。组织培养多采用茎尖或茎段做外植体 ,接种材料有限 ,可能破坏整个植株 ;如以花序为外植体 ,则接种量大 ,污染率低 ,而且不经愈伤组织也不经胚状体直接出芽 ,增殖率高。1　材料　绿巨人的肉穗花序。2　培养条件　以 MS为基本培养基 ,诱导分化与生长培养基为 1MS BA2 IAA1(单位 :mg/ L,下同 ) ;生根培养基为 2 1/ 2 MS IBA0 .5～ 1,培养基 p H5.4～ 5.8之间 ,培养温度 2 3± 2℃ ,上方两支 4 0 W日光灯光照培养 ,光照时间 14h。3　培养与继代培养　取佛…