马奶酒样乳杆菌ZW3中WANG_1291基因的表达

【目的】马奶酒样乳杆菌ZW3含有一段长度为14.4 kb的胞外多糖合成基因簇,包含17个与胞外多糖合成相关的基因(WANG_1283?WANG_1299),主要分析17个基因在马奶酒样乳杆菌ZW3生长过程中不同时间段的表达量,探究其中一个表达量发生变化的基因对乳酸菌产胞外多糖的影响。【方法】通过半定量RT-PCR实验,对基因簇上各基因的表达量进行分析;通过构建含有表达量变化基因的重组乳酸乳球菌,比较重组菌与野生菌的产胞外多糖差异。【结果】经分析,WANG_1284、WANG_1286、WANG_1287、WANG_1288、WANG_1290、WANG_1291、WANG_1292、WANG_1294、WANG_1296、WANG_1297、WANG_1298、WANG_1299这12个基因在菌体生长的50 h和60 h (产糖量上升阶段)表达量最高,推测这些基因在多糖聚合过程中起作用。从这12个基因中选出一个表达量发生明显变化的基因WANG_1291做进一步研究。将WANG_1291插入乳酸菌表达载体pMG36e中,构建了重组表达载体pMG36e-1291。将构建的重组表达载体转化到乳酸乳球菌WH-C1中,得到重组菌株。测定重组菌与野生菌生长特性,发现重组菌与野生菌之间的生长速度存在一定差异。然后利用苯酚-硫酸法测得重组乳酸乳球菌的胞外多糖产量是野生菌的2.1倍,胞外多糖产量有了明显的提高。【结论】确定WANG_1291基因是调控马奶酒样乳杆菌ZW3产胞外多糖的关键基因之一。     

基于pDS132的基因敲除中创伤弧菌氯霉素的耐药性变化及影响

【背景】基于自杀载体的基因敲除在单基因敲除上的应用较为常见,但在多基因敲除过程中细菌耐药性的变化及对后续敲除的影响尚未明确。【目的】探究基于自杀载体pDS132的创伤弧菌vvhA与rtxA1双基因敲除株构建过程中,创伤弧菌对氯霉素耐药性的变化及对后续基因敲除的影响。【方法】基于自杀载体pDS132的同源重组法构建创伤弧菌YJ016的单基因敲除株YJ016-ΔvvhA、YJ016-ΔrtxA1和双基因敲除株YJ016-ΔvvhAΔrtxA1,记录单交换筛选时的氯霉素浓度与筛选平板上成功重组的菌株所占比例。琼脂稀释法测定野生型与敲除株的氯霉素最低抑菌浓度(Minimum InhibitoryConcentration,MIC)和抗性突变频率,纸片扩散法测定菌株对其他药物的敏感性,分析其对单交换筛选的影响。【结果】单基因敲除株的氯霉素MIC及氯霉素抗性突变频率高于野生型;双基因敲除株的庆大霉素抑菌圈直径小于野生型。单基因敲除时,单交换重组菌株的占比为100%(20/20);在YJ016-ΔvvhA上敲除rtxA1基因,氯霉素筛选浓度为2、4μg/mL时,单交换重组菌株的占比分别为40%(8/20)、5%(1/20);在YJ016-ΔrtxA1上敲除vvhA基因,氯霉素筛选浓度为2、4μg/mL时,单交换重组菌株的占比均为0%(0/20)。【结论】基于自杀载体pDS132的基因敲除中创伤弧菌氯霉素的耐药性升高,可能影响后续单交换重组的筛选,该结果为基于自杀载体的同源重组技术应用于多基因敲除提供了参考。     

中枢神经系统疾病脑脊液中免疫球蛋白与IL-6的表达与意义

目的:检测中枢神经系统疾病患者脑脊液中免疫球蛋白与IL-6的表达情况并探讨其临床意义。方法:采用罗氏C6000仪器通过免疫发光法检测和比较本院收治的30例正常人、61例脑炎患者、51例头痛患者、30例肌无力患者以及35例脑梗死患者的脑脊液中IgAcsf、IgMcsf、IgGcsf、AIbcsf与IL-6的表达。结果:除头痛患者外,其他中枢神经系统疾病患者的脑脊液中IgAcsf、IgMcsf、IgGcsf、AIbcsf蛋白的表达量均高于正常人群,且脑炎患者与肌无力患者的脑脊液中IgAcsf、IgMcsf蛋白的表达量均高于头痛患者,脑梗死患者的脑脊液中IgMcsf、IgGcsf蛋白的表达量高于头痛患者,肌无力患者的脑脊液中IgGcsf蛋白的表达量高于头痛患者,脑梗死患者的脑脊液中IL-6蛋白的表达量明显高于脑炎、头痛和肌无力患者,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:脑脊液中免疫球蛋白、IL-6的表达异常与中枢神经系统感染性疾病的发生有关,且在不同种类的中枢神经系统疾病之间存在差异,可能有助于预防、治疗和诊断中枢神经系统疾病。     

衣藻感光作用的实验

衣藻可依靠眼点的感光作用到光照适宜的地方,进行光合作用,维持自己的生活。但因衣藻个体很小,学生不易看到眼点,平时又没有这方面的感性认识,所以对衣藻能感光这一点感到比较抽象。为了使学生更好地理解这部分内容,设计以下实验,提供给学生一个自己动手动脑的机会...     

Gankyrin 与消化系统肿瘤关系的研究进展

消化系统肿瘤与多种肿瘤相关基因的异常表达密切相关,Gankyrin 是一种癌基因,于肝癌、结直肠癌、胰腺癌等消化系统肿 瘤中高表达,并通过依赖泛素的蛋白酶解系统介导多种转录因子、细胞周期调控蛋白以及抑癌蛋白如p53、Rb 等的降解。研究表 明,Gankyrin 在消化系统肿瘤形成及细胞的生长周期调控中发挥重要作用,在消化系统肿瘤的早期诊断及判断预后方面具有一 定的应用前景,同时也可能成为消化系统肿瘤基因治疗的潜在靶点。     

中药面膜联合红蓝光治疗寻常痤疮疗效观察

目的：观察中药面膜联合红蓝光治疗仪治疗寻常痤疮临床疗效及安全性。方法：66例寻常痤疮患者按就诊先后顺序随机分为3组：对照组、面膜组、联合组,治疗4周后进行疗效评估,治疗结束后4周随访复发情况。结果：联合组及面膜组疗效高于对照组（P〈0.05）。结论：中药面膜联合红蓝光治疗仪治疗寻常痤疮疗效好,不良反应少,优于单用疗法,痤疮后期维持治疗同样值得重视。     

不同粒级土壤团聚体呼吸特征及其对碳排放的贡献

通过土盆培养试验研究了不同粒级黄棕壤团聚体呼吸特征及其对碳排放的贡献,结果表明:各粒级土壤团聚体及原状土在培养初期土壤呼吸速率较高,之后逐渐降低。在整个培养期间原状土保持了最大的土壤呼吸速率;土壤团聚体类型对土壤呼吸速率影响较大,3种粒级团聚体土壤呼吸速率大小表现为(5 mm)(1 mm)≈(1~5 mm),其中以5 mm团聚体对土壤碳排放的贡献最大。相关性分析表明,指数模型能较好地描述不同粒级团聚体的土壤呼吸对温度变化的响应;Q10值介于2.53~5.11之间且与土壤有机碳、全氮含量的变化规律基本一致,表现为1 mm团聚体有机碳、全氮含量和Q10值较大,5 mm、1~5 mm团聚体有机碳、全氮含量和Q10值相对较低,说明土壤团聚体粒级越小,其呼吸速率对温度越敏感。土壤有机碳、氮含量与土壤结构是影响土壤呼吸温度敏感性的重要因素。     

转基因猪体内外源基因的整合鉴定

外源猪生长激素基因被导入湖北白猪．为避免羊、猪之间在金属硫蛋白启动上的同源性而造成PCR检测结果的假阳性,分别将PCR合成反应的两个引物设计在羊金属硫蛋白基因启动子一侧和猪生长激素一侧,使PCR合成反应的结果特异地反映外源基因的整合性,准确地鉴定出转基因猪．DNA印迹分析结果表明,43头待检仔猪中有6头呈外源基因整合阳性．     

Hcy、ACA、FA联合检测在预测脑梗死发生中的临床价值

目的:探讨Hcy、ACA、FA联合检测在预测脑梗死发生中的临床价值.方法:采用EILSA及化学发光免疫分析技术,对66例脑梗死患者和30例健康对照者进行血清的ACA、Hcy及FA的检测.结果:脑梗死患者Hey浓度为[(22.68±12.70)μmol/L]明显高于健康对照组[(13.38+2.61)μmol/L],差异非常显著(P<0.01).叶酸[(3.87±2.02)ng/ml]水平明显低于健康对照组[(519.37±437.57)ng/mL](P<0.05);脑梗死患者ACA和高Hey血症的检出率为53.03%和68.18%与健康对照组(16.67%)比较,差异非常显著(P<0.01);ACA、Hcy及FA单独预测脑梗死的敏感性分别为87.50%、90.00%和96.3%;特异性为44.60%、54.40%和37.09%;在预测脑梗死发生中ACA、Hcy及FA联合检测优于单项检测.结论:高Hcy血症和ACA均是脑梗死发病的独立的危险因素.ACA可能参与脑血管病变的发病过程.ACA、Hcy及FA联合检测可较好地预测脑梗死的发生,其中以ACA和Hcy联合检测为最佳,对于预测脑梗死发生具有较高的临床价值.     

进展期胃癌靶向治疗的研究进展

胃癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一,全球每年胃癌新发病例数接近百万,严重影响着人类健康.近年来医学领域发展迅速,不管是胃癌的手术方式,还是放疗、化疗等治疗手段均获得了较大提高.但是由于缺乏有效早期诊断方法,大多数胃癌患者确诊时已进入疾病晚期,所以尽管医学技术不断发展,胃癌的死亡率依然居高不下.随着对胃癌分子机制的不断深入研究,一种直接作用于胃癌主要信号转导通路上某一特定靶点的新型治疗方式-分子靶向治疗逐渐成为当前肿瘤研究的热点.目前已有多种单克隆抗体及小分子靶向药物进入临床,用于人体多种肿瘤的治疗并呈现较好疗效.分子靶向治疗的出现为进展期肿瘤患者带来了新的希望.本文主要就进展期胃癌分子靶向治疗现状以及最新研究进展作一综述.