N-乙酰氨基葡萄糖苷内切酶的功能与机制

N-乙酰氨基葡萄糖苷内切酶（endo-beta-N-acetylglucosaminidase,ENGase）广泛分布于各种生物中,主要通过降解错误折叠的糖蛋白,参与细胞和生命的调控。ENGase也是糖链编辑的有效工具酶,可专一性水解游离寡糖链及糖肽或糖蛋白上核心五糖的N-乙酰氨基葡萄糖（GlcNAc）之间的β-1,4糖苷键。其水解产物是寡糖链和一个GlcNAc,或带有一个GlcNAc的糖肽或糖蛋白。本文对ENGase的发现、分布、蛋白质结构、酶学反应及生物学功能进行阐述,为ENGase的生物学研究提供思路,为糖生物学与糖组学的应用研究奠定基础。     

四逆散对疲劳大鼠学习记忆及脑内GABA_B1 表达的影响

目的:探讨四逆散对疲劳大鼠学习记忆及脑内GABA_B1受体的影响。方法:应用游泳训练和睡眠剥夺方法复制疲劳动物模型,运用Y-迷宫检测各组大鼠的学习记忆能力,采用免疫组化方法检测大鼠脑内GABA_B1受体阳性反应物的变化。结果:模型组与正常组相比,大鼠Y-迷宫正确反应率明显下降,错误反应率明显升高,大鼠脑内GABA_B1的阳性反应物数目明显增多;中药治疗组与模型组相比,正确反应率明显升高,错误反应次数明显下降,脑内GABA_B1受体的阳性反应物数目明显减少。结论:四逆散对疲劳大鼠学习记忆能力的下降具有改善作用。     

血清及胸腔积液中CA19-9、SCC-Ag及CYFRA21-1对肺癌诊断意义的对比研究

目的:探讨肺癌患者血清及胸腔积液中的糖蛋白抗原19-9(CA19-9)、鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)和细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)对肺癌的诊断意义。方法:选取2016年1月到2017年6月在我院接受治疗的肺癌患者67例作为肺癌组,另选取我院同期收治的肺良性病变患者55例纳入良性病变组。采用电化学发光法检测并对比两组患者血清及胸腔积液中的CA19-9、SCC-Ag和CYFRA21-1水平,比较所有研究对象血清及胸腔积液中CA19-9、SCC-Ag和CYFRA21-1的阳性率并分析其诊断价值。结果:肺癌组患者血清及胸腔积液中的CA19-9、SCC-Ag和CYFRA21-1水平显著高于良性病变组,有统计学差异(P0.05)。CA19-9、SCC-Ag和CYFRA21-1在胸腔积液中的阳性率高于在血清中的阳性率,有统计学差异(P0.05)。胸腔积液中CA19-9、SCC-Ag和CYFRA21-1单项检测对肺癌的灵敏度显著高于血清检测,血清及胸腔积液中CA19-9、SCC-Ag和CYFRA21-1三项联合检测的灵敏度、特异性、阳性预测值均高于单项检测,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:肺癌患者血清及胸腔积液中CA19-9、SCC-Ag和CYFRA21-1呈现高表达,三项指标联合检测可提高诊断肺癌的灵敏度、特异性和阳性预测值。     

H1亚型猪流感病毒血凝素基因在昆虫细胞中的表达及其间接ELISA方法的初步建立

根据GenBank发表的H1亚型猪流感HA基因序列设计引物,扩增出HA基因片段.将其克隆到pFastBacGP67B杆状病毒载体上,筛选阳性重组转座载体pFastBacGP67B-H1,转化含有杆状病毒穿梭载体(bacmid)的DH10Bac感受态细胞,构建杆状病毒表达载体获得重组转座子(rBacmid-H1),在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒(rBV-H1),再感染细胞,收获目的蛋白.通过血凝试验、免疫印迹法、免疫组化分析表明该蛋白得到表达,且具有良好的生物学活性.利用表达的蛋白作为猪流感间接ELISA的抗原,初步建立H1亚型猪流感的间接ELISA检测方法,并对内蒙古、辽宁和黑龙江等地送检的93份猪血清进行了检测,阳性率为31.18%,为研制开发快速、准确、简便的H1亚型猪流感鉴别诊断试剂盒奠定基础.     

槐绿虎天牛对柠条锦鸡儿6种挥发物的EAG和行为反应

【目的】为了研究槐绿虎天牛Chlorophorus diadema(Motschulsky)对主要寄主植物柠条锦鸡儿Caragana kroshinskii(Kom.)挥发物中醇类、醛类、烷类、酯类和萜烯类共5类6种化合物的生物活性。【方法】采用EAG和嗅觉行为生测技术,测定槐绿虎天牛雌雄虫对1-癸醇、正壬醛、正十六烷、乙酸-2-乙基丁酯、1-十六烯和1-辛烯6种化合物单一组分8个浓度梯度及其20种组合配方的电生理和嗅觉行为反应。【结果】结果表明,槐绿虎天牛雌雄虫对单一化合物和组合配方的EAG反应值与嗅觉行为反应选择率的变化趋势基本一致。组合配方中,雌雄虫均对S、P、Q、H、I和B 6种配方的引诱活性与对照的差异性具有统计意义(P<0.05)。【结论】(1)组合配方明显较单一组分配方对槐绿虎天牛的引诱效果好;(2)由1-癸醇、正十六烷和正壬醛组成的S配方引诱效果最好;(3)1-癸醇、正十六烷、正壬醛和1-十六烯4种化合物的最适浓度可以作为槐绿虎天牛植物源引诱剂的成分作进一步的研究。     

嗜水气单胞菌中转录因子AHA_1581对细菌生理功能调控机制的研究

[目的] LuxR家族转录因子能够抑制或刺激不同功能类型基因的表达,来维持细胞功能的稳定性。嗜水气单胞菌是水产养殖中重要的致病菌之一,目前对该菌中的LuxR家族转录因子功能的研究还较少。[方法] 本研究利用含有sacB标记的自杀载体pRE112和同源重组技术敲除LuxR家族转录因子AHA_1581基因。[结果] 生理表型测定结果发现,ΔAHA_1581的运动与胞外蛋白的酶活增强、生物被膜形成能力降低,且耐受低温、卡那霉素、庆大霉素胁迫,但是对K₂Cr₂O₇更加敏感。进一步对野生型Ah和ΔAHA_1581的定量蛋白质组学分析,共鉴定到2654个蛋白,其中59个蛋白下调表达,142个蛋白上调表达。生物信息学分析表明AHA_1581参与调控双组分调节系统、丙酮酸代谢、碳代谢、TCA循环等细菌重要生理过程,以及细菌耐药基因和毒力因子的差异表达。[结论] 了解AHA_1581基因在调控细菌毒力以及生物过程中所起的重要作用,对预防和控制嗜水气单胞菌引起疾病的发生和传播可能具有重要的科学意义。     

脑外伤时猫大脑皮质和海马N─甲基─D─天冬氨酸受体的变化

本实验采用放射性配基受体结合分析法,测定了猫脑外伤时大脑皮质和海马Ｎ─甲基─Ｄ─天冬氨酸受体（ＮＭＤＡＲ）的变化。并用氨基酸自动分析仪观察了猫大脑皮质兴奋性氨基酸含量变化。结果表明,伤后２和６ｈ两侧大脑皮质和海马ＮＭＤＡＲ的最大结合容量明显降低,伤后２ｈ以海马变化最大,并以伤后６ｈ伤侧大脑皮质中降低最为显著;而大脑皮质兴奋性氨基酸含量伤后５ｍｉｎ即显著升高,然后呈下降趋势,且以伤侧大脑皮质变化为大。提示：脑外伤后ＮＭＤＡＲ的下调与兴奋性氨基酸的大量释放有关,可能在兴奋毒性脑损伤中起重要作用。     

桂皮醛对高脂喂养小鼠糖脂代谢影响的实验研究

目的：探讨口服桂皮醛对高脂喂养小鼠（C57BL/6J 背景）糖脂代谢的影响。方法：采用雄性C57BL/6J小鼠作为研究对象,分 正常对照组（6 只）,高脂组（6 只）,高脂+ 桂皮醛（40 mg/kg,每天1 次）干预组（6 只）。桂皮醛以0.5 %羧甲基纤维素钠（CMC-Na） 溶解后口服灌胃,每天1 次;正常对照组和高脂组给予灌服等体积的CMC-Na,每天1 次,干预时间为3 月。每周观察体重、空腹血 糖,实验结束后观察胰岛素耐量（IPITT）、葡萄糖耐量（IPGTT）,观察各组小鼠的血脂水平（TC,TG,LDL-C,HDL-C）、胰岛素水 平、肠系膜脂肪重量及以HE 染色观察脂肪细胞形态。结果：在脂代谢方面,桂皮醛干预可显著防止高脂喂养小鼠的体重和血脂水 平的升高;高脂喂养小鼠肠系膜脂肪重量显著增加,HE 染色提示脂肪细胞显著增大;桂皮醛可显著防止肠系膜脂肪重量的增加 及脂肪细胞的变大。而在葡萄糖代谢方面,桂皮醛可显著降低高脂喂养小鼠血糖和胰岛素水平,改善小鼠的葡萄糖耐量和胰岛素 敏感性。结论：口服桂皮醛可显著改善高脂喂养小鼠的糖、脂代谢。     

核因子 -kB 在动脉粥样硬化中的研究进展

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)与心脑血管疾病及周围血管疾病等多种疾病的发病关系密切,而AS的慢性炎症性特征已被广泛认可,从早期内皮功能紊乱到最终的斑块破裂,炎性进程伴随于AS形成的各个阶段。核因子-κB(NF-κB)作为调控炎症信号的重要转录因子,通过调节细胞因子、趋化因子、粘附分子、免疫受体、氧化应激相关酶等一系列特异基因的表达而参与AS的病理过程,并在细胞凋亡和细胞增殖等方面发挥着重要的作用,是AS形成及防治相关研究中的重要靶点。本文通过概述近年来关于NF-κB通路的信号传导在AS形成中的作用,回顾本通路相关药物的研究进展,旨在探讨NF-κB在动脉粥样硬化研究中所面临的问题,为以NF-κB为靶点的抗AS药物研究提供理论参考。