细菌样颗粒——新型乳酸菌表面展示技术及其应用

细菌样颗粒(Bacterium-like particles,BLPs)是一种新型非遗传修饰型乳酸菌表面展示技术,外源蛋白可通过锚钩蛋白锚定于经热酸处理而得的乳酸菌肽聚糖骨架表面,形成空心表面展示颗粒。因其安全性高、表面展示密度大、黏膜递送效率高,又兼有佐剂效应,BLPs广泛应用于黏膜疫苗和黏膜佐剂的开发、病毒抗原的纯化、生物催化剂的制备等领域。本文就BLPs的构建、独特优势、目前的应用及尚需解决的问题等方面进行详细综述,以期展现BLPs新型表面展示平台的广阔应用前景。     

逆转录病毒载体的应用现状及前景展望

着重介绍逆转录病毒载体在基因治疗、外源基因表达、RNA干扰三方面的最新应用现状并对其应用前景进行展望,同时介绍了逆转录病毒载体存在的应用缺陷。     

乳酸杆菌表面结构和粘附特性的研究进展

乳酸杆菌是人和动物肠道中重要的益生菌.乳酸杆菌的表面特性决定其对肠道的粘附和定植及生理功能的发挥.研究乳酸杆菌表面结构对了解乳酸杆菌的粘附过程具有重要意义.对近年来国外关于乳酸杆菌表面结构特征和理化性质的研究进行了概述,并探讨分析了乳酸杆菌表面结构与乳酸杆菌粘附特性之间潜在的关系.     

逆转录病毒载体在基因工程疫苗方面的应用

逆转录病毒载体是根据逆转录病毒的特性设计出的一种病毒表达载体,以其能够整合到宿主细胞染色体上并能稳定表达目的基因而被视为基因运载最有效的工具。目前广泛应用于基因治疗、外源基因表达、基因工程疫苗等方面。主要综述了逆转录病毒载体在基因工程疫苗方面的应用现状及前景,为该载体在生物医学领域方面的应用提供有价值的参考。     

流感病毒感染诱导T细胞免疫应答的研究进展

A型流感病毒(Influenza A virus,IAV)属正粘病毒科流感病毒属,是造成人畜呼吸道感染的重要病原微生物。随着研究的不断深入,国内外不断发现肺脏效应CD4+T细胞、CD8+T细胞和调节性T细胞利用多重效应和调节机制控制IAV感染。本文通过查阅流感病毒介导T细胞免疫反应的有关文献,主要对IAV逃逸T细胞免疫的策略、宿主感染IAV过程中T细胞亚群和固有免疫样T细胞产生的免疫反应等方面展开综述,为国内相关领域的研究提供理论依据。     

宠物鸟·疫病·公共卫生

宠物鸟种类多,来源地广,检验检疫预防措施缺乏,致使宠物鸟疫病不断传播,并造成人类的感染,已经威胁到公共卫生。宠物鸟疫病中以新城疫、禽流感、鹦鹉热最为常见,而且与人类关系密切,具有重要的公共卫生学意义。本文从宠物鸟在疫病流行传播中的意义、疫病的宿主感染谱、疫病的流行特征以及疫病的公共卫生学意义对新城疫、禽流感、鹦鹉热三种疫病进行了综述。表明宠物鸟疫病的感染率比较高,且严重危害人类健康。加强对宠物鸟疫病的检验检疫及预防,很好的防控宠物鸟类疫病具有非常重要的意义。     

猪A组轮状病毒Vp6基因与乳酸菌非抗性表达载体的重组及在大肠杆菌中的表达

以猪A组轮状病毒mRNA为模板,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,扩增了1194bp的Vp6基因,通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至克隆载体pGEM-TVector中,构建克隆质粒pGEM-T-Vp6。用SacⅠ和KpnⅠ双酶切pGEM-T-Vp6和以胸苷酸合成酶基因(thymidylate synthase,thyA)为选择压力的非抗生素抗性的穿梭表达载体pW425t,并将纯化的Vp6基因亚克隆至表达载体pW425t中,构建出可以在乳酸菌与大肠杆菌之间穿梭表达的原核表达重组质粒pW425t-Vp6。将pW425t-Vp6转化至thyA基因缺陷型的大肠杆菌感受态E.coliX13中,经生长功能弥补筛选阳性克隆,通过SDS-PAGE分析,可见约44.88kD的融合蛋白。由Western blot分析,表明该蛋白具有与轮状病毒多克隆抗体的反应原性,从而为pW425t-Vp6在乳酸菌受体菌株中表达提供理论基础和实验依据。     

基因工程乳酸菌的应用研究进展

随着分子生物学技术的不断发展,重组基因工程乳酸菌取得了较快的进展.本文主要从基因工程乳酸菌在食品、药品、保健品、饲料养殖领域中的应用进行综述,以便正确认识、了解和使用基因工程乳酸菌,对其进一步的研究以及开发应用具有深远的意义.     

猪白细胞介素18成熟蛋白基因的克隆与表达

目的克隆猪白细胞介素18(pIL-18)成熟蛋白基因,并在植物乳杆菌(Lb.plantarum)NC8中进行表达。方法通过RT-PCR方法从猪脾脏细胞中扩增出pIL-18成熟蛋白基因,克隆到T载体pMD18-T后测序;将阳性基因片段克隆至大肠埃希菌-乳酸菌穿梭表达载体pSIP-409构建重组表达载体pSIP-409-IL-18,进行酶切和PCR鉴定;应用电穿孔技术将其转化至Lb.plantarum NC8中,经SppIP诱导表达后,进行SDS-PAGE及Western-blot分析。结果经测序,pIL-18成熟蛋白基因核苷酸长度为579 bp,编码193个核苷酸;酶切和PCR鉴定证明成功构建了重组表达载体pSIP-409-IL-18;SDS-PAGE及Western-blot分析表明重组菌表达了18 kD的融合蛋白,该重组蛋白可以与鼠抗猪IL-18多克隆抗体反应。结论成功克隆了pIL-18成熟蛋白基因,并获得有生物活性的pIL-18重组乳酸菌,为研制开发IL-18重组乳酸菌制剂奠定基础。     

以thyA基因为选择压力非抗性质粒载体的构建*

以干酷乳杆菌Ｌ．Ｃａｓｅｉ３４１０３染色体ＤＮＡ为模板,利用ＰＣＲ技术扩增胸苷酸合成酶（Ｔｈｙｍｉｄｙ－ｌａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅ,ｔｈｙＡ）基因,回收纯化。选择以红霉素抗性为选择压力的可以在大肠杆菌和乳酸菌中穿梭表达的质粒ｐＷ４２５ｅ为基本质粒,以ｔｈｙＡ基因取代红霉素基因,获得重组载体并鉴定。此重组载体可以对ｔｈｙＡ基因缺陷的大肠杆菌Ｅ．Ｃｏｌｉ Ｘ５１和嗜酸乳杆菌ＤＯＭＬａＳ １０７进行功能弥补。进而构建了以ｔｈｙＡ基