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分枝杆菌噬菌体生物学特性探讨 总被引:1,自引:0,他引:1
为了确定不同分枝杆菌噬菌体的宿主菌以及扩增方法和最佳保存方法,观察了七种分枝杆菌噬菌体对结核分枝杆菌、耻垢分枝杆菌的裂解情况,并分别于感染后 24、48小时采用离心 过滤、孵育 过滤方法收集噬菌体比较扩增效率,采用不同稳定剂对分枝杆菌噬菌体进行液体和冻干保存,在不同时间段采用琼脂双层法检测其效价。结果显示:①D29分枝杆菌噬菌体能同时较高效地裂解结核分枝杆菌和耻垢分枝杆菌;②感染 48小时后采用孵育 过滤方法收集的噬菌体效价高,方法简单;③液体 4℃保存的噬菌体稳定性好, 70℃液体保存和冻干后 4℃、室温、37℃保存依据不同稳定剂而相差较大。因此,在 48小时后采用孵育 过滤方法收集噬菌体具有高效率特性并且简单易行,噬菌体液体 4℃保存简单、有效,值得推荐。 相似文献
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禽流感(Avian Influenza,AI;也有俗称为Bird Flu)是禽流行性感冒的简称,是由甲型流感病毒引起的一种禽类(家禽和野禽)的感染和(或)疾病综合征^[1]。甲型流感病毒具有16个血凝素亚型(Subtype),分别为HA1~16;9个神经氨酸酶亚型,分别为NA1-9。与其他动物来源的流感病毒不同的是,从禽(鸟)来源的甲型流感病毒含有所有不同的HA与NA亚型,因此被认为禽(鸟)是甲型流感病毒的储存基因库。HA亚型与NA亚型的组合构成了甲型流感病毒的亚型联合(HANA),即为血清型^[2]。 相似文献
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BCG-CpG-DNA制备、理化特性及免疫刺激活性的初步研究 总被引:9,自引:1,他引:8
采用机械破碎、CTAB沉淀、酚:氯仿:异戊醇抽提法从卡介菌 (BCG)中制备BCG- CpG- DNA,经化学方法确定其理化成分,通过双抗体夹心ELISA法检测小鼠IgM水平检测其免疫刺激活性。结果显示每克半干重的卡介菌提取BCG- CpG -DNA约 0. 9mg。提取物主要成分为BCG -CpG -DNA,分子量大小在 3 000~15 710bp,含少量的多糖和蛋白;紫外分光扫描在 260nm有最大吸收;对特异性识别DNA长链的CCGG中的CpG位点的限制性内切酶HpaⅡ高度敏感;能够活化小鼠B细胞产生IgM。所制备的BCG -CpG- DNA含较多的未甲基化CpG基序,具有免疫刺激活性功能。 相似文献
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结核疫苗保护力评价用感染菌液的制备和保藏研究 总被引:1,自引:0,他引:1
实验研究中对结合分枝杆菌感染菌液进行活菌数量与毒力的稳定性观察。以活菌计数与感染豚鼠后的肝、脾、肺病变指数为评判指标进行观察,结果显示低温保藏菌液在32个月内,其活菌数量处于6.7~18×105CFU/ml之间,感染豚鼠的肝、脾、肺病变指数处于42~51之间。说明低温保藏菌液具有很好的稳定性,可作为结核分枝杆菌感染豚鼠模型标准化用菌液。 相似文献
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探讨不同分枝杆菌制剂对小鼠的免疫调节作用。将C57BL/6小鼠,随机分成4组分别注射生理盐水、微黄分枝杆菌、草分枝杆菌和田鼠分枝杆菌制剂,每隔2周免疫一次。免疫2次后,小鼠取脾淋巴细胞体外培养,分别以PPD、PPDB刺激,用MTT法检测T淋巴细胞增殖情况;用酶联免疫斑点法(Enzyme-Linked ImmunoSpot assay,ELISpot)检测脾细胞分泌IFN-γ情况,分析各分枝杆菌制剂对小鼠免疫应答的影响。结果显示,与对照组相比,微黄分枝杆菌制剂和草分枝杆菌制剂免疫小鼠的T淋巴细胞增殖反应和脾细胞分泌IFN-γ均明显提高,其中微黄分枝杆菌组与对照组相比有显著性差异(p<0.01)。分枝杆菌制剂可促进小鼠免疫应答。 相似文献
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以卫生部《人间传染的病原微生物名录》为基础,根据细菌类生物制品生产用菌(毒)种的特点以及该病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度,将生物制品生产用菌(毒)种中结核杆菌与肉毒梭菌分为第二类,灭活疫苗、组分疫苗、类毒素生产用菌(毒)种为第三类;活疫苗与微生态活菌制剂中除芽孢菌与条件致病菌为第三类外,其他为第四类。 相似文献
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目的在不同分枝杆菌致敏豚鼠模型中研究结核菌素纯蛋白衍生物(purified protein derivative of tuberculin,TB-PPD)的量效关系。方法将受试豚鼠随机分成6组:结核分枝杆菌H37Rv活菌致敏组、结核分枝杆菌临床株CMCC 94757、94754、94766致敏组、卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin vaccine,BCG)致敏组和灭活结核分枝杆菌H37Rv致敏组。各组豚鼠分别于左侧大腿腹股沟皮下注射相应致敏原,5~6周后,所有豚鼠于脊柱两侧皮内注射20 IU/m L TB-PPD和50 IU/m L TB-PPD各0.1 m L;于注射后24 h、48 h观察和记录局部硬结的纵径与横径,计算平均值。结果所有组别豚鼠接受两种规格TB-PPD皮试后,无论是24 h还是48 h,局部硬结反应直径均大于10 mm,全部阳性,阳转率均为100%。5 IU TB-PPD皮试反应强度高于2 IU TB-PPD,存在明显的剂量效应关系。其中,24 h结果显示:2 IU TB-PPD和5 IU TB-PPD在H37Rv活菌致敏组、94766致敏组、灭活H37Rv致敏组皮试反应大小差异无统计学意义(t=2.291、P=0.071;t=2.722、P=0.053;t=1.76、P=0.153),其余3组5 IU TB-PPD皮试反应强度高于2 IU TB-PPD,差异均有统计学意义(t=4.098、P=0.015;t=4.811、P=0.009;t=3.068、P=0.037)。48 h硬结反应和24 h、48 h平均硬结反应结果均显示:在各致敏组豚鼠模型中5 IU TB-PPD皮试反应强度均高于2 IU TB-PPD,皮试反应大小均有统计学差异(t=3.471、P=0.018;t=3.371、P=0.020;t=6.216、P=0.003;t=5.244、P=0.006;t=3.959、P=0.017;t=4.674、P=0.010;t=4.824、P=0.008;t=3.794、P=0.019;t=3.857、P=0.018;t=2.86、P=0.046;t=3.539、P=0.024;t=3.365、P=0.028)。结论各组豚鼠致敏模型中5 IU TB-PPD的效价均明显高于2 IU TB-PPD,存在较为明显的量效关系。各种感染状态下,虽然高剂量制品可诱导更强的迟发型超敏(delayed type hypersensitivity,DTH)反应,但低剂量制品也不影响其阳性检出率。 相似文献