精氨酸甲基转移酶（PRMT）7通过IGF-1信号通路调控人骨髓间充质干细胞成脂分化的研究

目的 本研究旨在明确精氨酸甲基转移酶（PRMT）7在人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）成脂分化过程中的变化以及是否调控hBMSCs成脂分化,进而探索相应的调控机制。方法 通过定量反转录PCR（qRT-PCR）和蛋白质印迹（Western blot）检测hBMSCs成脂分化过程中PRMT7的变化;通过qRT-PCR和Western blot实验证明PRMT7稳定敲低细胞系构建成功。进行油红O染色和定量分析,以及qRT-PCR和Western blot实验检测PRMT7稳定敲低细胞系成脂分化水平的变化;通过裸鼠体内异位成脂实验,油红O染色检测PRMT7稳定敲低细胞系体内异位成脂的效果;通过qRT-PCR和Western blot证明PRMT7稳定过表达细胞系构建成功。进行油红O染色和定量分析以及qRT-PCR和Western blot实验检测PRMT7稳定过表达细胞系成脂分化水平的变化;通过qRT-PCR和Western blot实验检测敲低PRMT7和过表达PRMT7的细胞中IGF-1表达水平的变化。在PRMT7稳定敲低细胞系中转染siIGF-1并通过qRT-PCR和Western blot检测IGF-1的表达水平验证敲低效率。通过油红O染色和定量分析,qRT-PCR实验检测转染siIGF-1的敲低组hBMSCs成脂分化水平的变化。结果 本文发现：在hBMSCs成脂过程中,PRMT7表达水平明显降低（P<0.01）;敲低PRMT7后hBMSCs的成脂分化能力增强（P<0.001）;敲低PRMT7后hBMSCs的体内异位成脂分化能力增强;过表达PRMT7后hBMSCs的成脂分化能力减弱（P<0.01）;PRMT7敲低后IGF-1表达水平增加（P<0.000 1）;PRMT7过表达后IGF-1表达水平降低（P<0.000 1）;转染siIGF-1后,各细胞系IGF-1表达水平明显降低（P<0.001）;敲低组转染siIGF-1后成脂分化能力明显降低（P<0.01）。结论 本研究通过细胞水平和裸鼠皮下移植实验发现PRMT7显著抑制hBMSCs成脂分化,机制研究发现PRMT7对hBMSCs成脂分化的调控作用依赖IGF-1信号通路。上述研究表明,PRMT7可能是治疗相关疾病的潜在分子靶点,为PRMT7和hBMSCs应用于相关疾病治疗提供了新思路。