SD大鼠骨髓间充质干细胞分离培养及鉴定的实验研究

摘要 目的：探讨应用全骨髓贴壁法体外分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs)的可行性,研究其生物学特性,为骨组织工程提供种子细胞。方法：取SPF级5周龄健康SD大鼠2只,脱颈处死,分离双下肢股骨、胫骨,全骨髓贴壁法分离培养、纯化BMSCs;通过倒置显微镜观察原代、传代细胞生长情况、绘制生长、贴壁率曲线,研究其生物学特性;流式细胞仪检测表面标志物、诱导成成骨等方法进行鉴定。结果：应用全骨髓贴壁法可在体外分离出活性好、纯度高的BMSCs。倒置显微镜下可见原代细胞呈梭形、多角形,传代细胞形态均一呈纤维样;P3代BMSCs经流式细胞鉴定：CD44、CD90高表达,CD31、CD45低表达;定向诱导向成骨细胞分化,可见明显矿化结节。结论：证实应用全骨髓贴壁培养法体外可成功分离BMSCs,所分离培养、纯化的细胞生物学稳定,纯度高、活性好,具有多向分化潜能,能为骨组织工程、骨质疏松症和骨折不愈合疾病的研究提供种子细胞。     

HMGB1对大鼠糖尿病足溃疡炎症的影响及机制分析

目的:分析高迁移率族蛋白1(High mobility group protein 1,HMGB1)对大鼠糖尿病足溃疡炎症的影响及机制。方法:经腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,并在大鼠的双后足背部做一3 mm×7 mm的全层矩形皮肤缺损,接种质控菌株。将建模成功的大鼠随机分成:模型组(等量生理盐水)、低剂量组(12.5μg·kg~(-1)·d~(-1))、中剂量组(25μg·kg~(-1)·d~(-1))和高剂量组(50μg·kg~(-1)·d~(-1)),每组6只,每天单次腹腔注射,连续给药14 d。另取6只大鼠作为空白组(等量生理盐水)。于规定时间对各组大鼠创面愈合率、微血管密度(Microvascular density,MVD)、组织中血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)、CD45、Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)、核因子κB (Nuclear factor kappa-B,NF-κB)、白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6 (Interleukin-6,IL-6)、IL-8(Interleukin-8,IL-8)和肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)m RNA或蛋白表达量进行检测。结果:与对照组相比,模型组大鼠创面治愈率和微血管密度均较低,VEGF、CD45、TLR4、NF-κB、IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-αm RNA或蛋白表达量均较高(P0.05)。与模型组相比,三个剂量组大鼠创面治愈率和微血管密度均明显降低(P0.05),VEGF、CD45、TLR4、NF-κB、IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-αm RNA或蛋白表达量均较高(P0.05)。且随着HMGB1注射剂量增大,创面愈合率、血管生成明显减少(P 0.05),炎症因子表达量显著升高(P 0.05)。结论:HMGB1对大鼠糖尿病足溃疡炎症有促进作用,机制可能与HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路相关。     

miR-21在类风湿性关节炎中的作用机制及研究进展

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis, RA)是一种病因未明的慢性自身免疫性疾病,以手、足小关节的多关节和对称性损害为特征。RA的发病机制复杂、病程较长且致残率比较高,严重损害了患者的健康和生活质量。miRNA是近年来研究最多的非编码RNA,在机体的生理和病理过程中发挥重要作用。诸多研究表明,miR-21与RA的发生发展密切相关。因此该文就miR-21在RA中的作用机制及进展进行综述,作用机制主要是miR-21通过与lncRNA的相互作用,靶向SNF5、TET1及调节相关信号通路(Wnt、PI3K/AKT、JAK/STAT和NF-κB)来调控RA,旨在为miR-21与RA的相关研究提供参考及为RA的诊疗提供新策略。