重组蓖麻毒素A链蛋白的可溶性表达、纯化与抗原性分析

用PCR方法从克隆质粒pUC19-RTA中扩增出蓖麻毒素A(RTA)链基因,序列分析正确后,亚克隆到原核表达质粒pET-His中,构建重组表达质粒pET-HisRTA,再转化到E.coliBL21(DE3)plysS中获得表达工程菌株BL21/pET-HisRTA。该工程菌在30℃经0.4mmol／LIPTG诱导4h后获得可溶性表达的目的蛋白,约占菌体总蛋白的18.45％,SDS-PAGE分析显示表达的蛋白区带与RTA相对分子量相符,约32kDa左右。表达产物经Ni-NTA亲和层析法一步纯化,蛋白纯度约达97.53％,并可得到约18mg/L重组RTA蛋白。Western印迹和间接ELISA结果证明,重组RTA蛋白与抗天然蓖麻毒素多抗可发生特异性的抗原抗体反应,具有良好的抗原性,这为制备RT特异性抗体及建立RT的检测方法奠定了基础。     

相思豆毒素研究及应用

相思豆毒素类似于蓖麻毒素,是一种植物蛋白毒素,具有极强的细胞毒性作用,特别是对某些恶性肿瘤细胞的毒性更强,这使它成为用于杀伤肿瘤细胞的候选毒素之一。本就其性质、基因克隆、结构与功能,以及在肿瘤导向治疗方面的应用作一简要的综述。     

通督调神针刺法联合认知功能训练对卒中后认知障碍患者肠道菌群和神经递质的影响

摘要 目的：观察通督调神针刺法联合认知功能训练对卒中后认知障碍患者神经递质、肠道菌群的影响。方法：按照随机数字表法将河北省沧州中西医结合医院2021年7月-2022年10月收治的124例卒中后认知障碍患者分为对照组（62例,认知功能训练）和观察组（62例,认知功能训练、通督调神针刺法联合治疗）。对比两组简易精神状态检查表（MMSE）、日常生活活动（ADL）、蒙特利尔认知评估量表（MoCA）、血清神经递质[去甲肾上腺素（NE）、神经递质乙酰胆碱 （ACh）、5-羟色胺（5-HT）、多巴胺（DA）]、肠道菌群指标。结果：治疗30 d后,观察组MMSE、MoCA、ADL评分高于对照组同期（P<0.05）。治疗30 d后,观察组Ach、DA、NE、5-HT高于对照组同期（P<0.05）。治疗30 d后,观察组大肠埃希菌、肠球菌低于对照组同期,双歧杆菌、乳杆菌高于对照组同期（P<0.05）。结论：卒中后认知障碍患者在认知功能训练基础上结合通督调神针刺法,认知功能、肠道菌群和神经递质水平显著改善,从而有利于改善患者的日常生活活动能力。