蕲蛇蛇毒抗凝血因子的分离纯化与特性

目的 寻找蕲蛇蛇毒中的抗凝血因子。方法 利用硫酸铵沉降、阴离子交换层析、阳离子交换层析及高效液相色谱层析,从蕲蛇蛇毒中分离纯化到一个抗凝血因子。结果 纯化的这一组份在PAGE、SDS—PAGE上均呈单一区带,分子量约为25．4kD,由两条分子量分别为15．0kD和16．0kD的肽链通过二硫键连接在一起。这一组份在体外显著地延长血浆复钙时间和凝血酶原时间,但不延长牛凝血酶时间,也不具有磷脂酶A2活性、纤溶活性和出血活性。结论 蕲蛇蛇毒中舍右一种新的抗凝血因子。     

二次回归正交旋转组合设计对豆粕氨基酸提取工艺的优化

研究了硫酸水解法提取豆粕中复合氨基酸的工艺条件。在单因素实验的基础上,运用二次回归正交旋转组合设计方法进行了优化,建立回归模型方程并确定最佳工艺条件。结果表明,在液固比25:1、硫酸浓度3.1mol.L-1、提取时间16.0h和提取温度125.0℃的条件下,最佳氨氮得率达59.9mg.g-1。     

蕲蛇蛇毒中一种新型自降解抗凝血酶AA-ACA-I的纯化和表征

利用嗜硫色谱和POROS HQ20离子交换色谱从蕲蛇蛇毒中纯化得到一种新型P-Ⅲ型蛇毒金属蛋白酶（snake venom metalloproteases SVMP) AA-ACA-I.该酶经SDS-PAGE测得分子量为 47.6 kD,含有链内二硫键,加DTT处理后,分子量为50.8 kD,中性糖含量为3.5%,具有出血毒性和抗凝血活性.在70℃和pH 9.0条件下保温60 min,该酶会自降解成分子量30 kD左右的新蛋白,降解得到的新蛋白抗凝血活性高于原蛋白     

细菌在阴离子交换树脂上的吸附研究

报道了细菌 (E .coliK12和S .aureus)在阴离子交换树脂 (SuperQ和DEAE)上的静态吸附行为。采用静态法测定 30℃以及 37℃下E .coliK12和S .aureus在SuperQ和DEAE上的吸附等温线 ,分别用Freundlich和Langmuir方程拟合。实验表明 ,用Fre undlich方程拟合 ,得到较为满意的结果 ,其相关系数最大为 0 .995 ,最小为 0 .991;Freundlich等温线指数 1/n =0 .3～ 0 .4 ;而且在30℃下比在 37℃下更有利于吸附。同样采用静态法测定了吸附量随pH值的变化趋势。结果表明 ,对E .coliK12和S .aureus在SuperQ上的吸附 ,pH >6 .0～ 7.0的吸附量较pH2 .0～ 5 .0之间的多。