免疫系统人源化小鼠模型构建技术探讨

探讨免疫系统人源化小鼠模型构建技术的方法和技巧,能够提高免疫系统人源化小鼠模型构建的成功率,并为后续的肿瘤免疫治疗药物研发提供临床前动物模型。利用不同移植数量和供体的HuPB-MNC细胞尾静脉注射重度免疫缺陷小鼠NCG,建立免疫系统人源化小鼠模型。每周观察2次,并记录小鼠体重及死亡情况;实验第7、14、21、28和35天眼眶静脉丛试血,流式细胞术监测NCG小鼠外周血中人CD45⁺T细胞的重建水平。NCG小鼠外周血中人CD45⁺T细胞水平随注射后时间逐渐升高,约在3～4周达到25%以上。研究结果表明,免疫系统人源化小鼠模型构建应该从构建方法、免疫缺陷小鼠品系、性别和饲养、免疫细胞的供体和数量及细胞状态等各个方面进行考虑,通过采用多种供体克服差异性,优化肿瘤模型和免疫细胞供体联合接种方案最大化利用窗口期等策略提高模型构建成功率及应用转化率,进一步完善实验室免疫系统人源化小鼠模型构建方法,以期为肿瘤免疫疗法提供更有利的药物研发工具。     

外周血T淋巴细胞亚群流式检测方法的优化及验证

为优化外周血T淋巴细胞亚群流式检测方法,采集小鼠肝素钠抗凝血,用FITC rat anti-mouse CD3、APC rat antimouse CD4和PE rat anti-mouse CD8a荧光抗体进行染色,裂解红细胞,通过流式细胞仪检测各亚类细胞占淋巴细胞百分比。从样本体积(50μL和100μL)、FITC rat anti-mouse CD3抗体的工作浓度(1.25～40.00μg·mL^-1)、APC rat anti-mouse CD4抗体的工作浓度(0.625～20.000μg·mL^-1)、PE rat anti-mouse CD8a抗体的工作浓度(1.25～40.00μg·mL^-1)及红细胞裂解条件(时间和裂解次数)等方面对检测方法进行了优化,并验证方法的精密度(批内差异和批间差异);同时对样品4℃放置24 h、室温放置24 h、染色处理后4℃放置24 h的稳定性进行验证。结果表明,50μL抗凝血中加入终浓度1.25μg·mL^-1FITC rat anti-mouse CD3、1...     

第二代新型冠状病毒疫苗研究进展

自2019年12月以来,新型冠状病毒（SARS-CoV-2）在全球范围内迅速传播,逐步发展成全球大流行疾病（COVID-19）,为全球社会带来了重大损失。疫苗接种是预防传染性疾病的重要措施之一,自COVID-19流行以来,研制安全、有效的疫苗成为了当下最紧急的任务。据报道,目前全球范围内多条技术路线研究的疫苗多达172种处于临床阶段。世界卫生组织紧急批准了超过10种新冠疫苗用于紧急预防。然而,目前已获批的疫苗几乎都是针对原始毒株进行研发的。面对目前不断突变的病毒,开发更加广谱、高效的第二代新冠疫苗就显得尤为重要了。本文汇总了目前研究进展较快的第二代新冠疫苗,同时对第二代新冠疫苗的临床研究所应关注的问题及所面临的挑战进行了论述。