辛德毕斯病毒6K蛋白在病毒成熟释放中的作用

应用多种细胞生物学技术,对辛德毕斯病毒(Sindbis Virus,SbV)的6K蛋白在细胞中的分布和转运动态及在病毒释放过程中的作用进行了探讨,结果表明:6K蛋白不仅存在于成熟病毒粒子中,而且在粗面内质网合成后及在向细胞质膜的转运过程中均与囊膜蛋白E2形成复合物。对6K蛋白酰基化位点突变株的研究结果表明,它与E2突变株在病毒形态发生方面有惊人的相似之处,说明SbV的出芽释放过程不仅仅是靠E2蛋白C端与病毒核衣壳的相互作用,6K蛋白的酰基化修饰可能在这个过程中也起着十分重要的作用。根据6K蛋白的二级结构的预测及综合上述实验结果,对SbV出芽释放的模式提出了新的补充。     

核仁是怎样行使其生理功能的

真核细胞间期核中最显著的细胞结构是核仁。在光学显微镜下,核仁通常呈均质而致密的球体;在电子显微镜下,核仁主要分为三个区,即.1)颗粒区,含有核糖体前体颗粒;2)致密的丝状区即纤维区,包含有正在转录的RNA分子;3)浅染色区,或称为核仁内染色质,该区包含有从染色体核仁组织者区来的DNA,其中含有rRNA基因。因而,从成份上说,核仁是由DNA、RNA和蛋白质组成的,它的主要功能是转录rRNA和装配核糖体亚单位。     

线粒体的内膜与外膜

线粒体,做为细胞内的“动力工厂”,几乎存在于所有真核生物的细胞内。在电子显微镜下,可以清楚地看到,线粒体是由双层膜即内膜和外膜构成的细胞器。我们知道,生物膜的主要成份是脂类和蛋白质,在一般的生物膜中,脂类和蛋白质各占其干重的50%左右。线粒体的外膜与一般的生物膜类似,但内膜则不同,其蛋白质约占80%,而脂类仅占20%。这说明线粒体内膜上的蛋白质含量明显地高于包括线粒体的外膜在内的一般的生物膜。我们曾用冰冻蚀刻复型的电镜制样技术,观察了仓鼠肾传代细胞(BHK-21)中的线粒     

SINDBIS病毒对宿主细胞基因表达的影响

Sindbis病毒(SBV)的感染能迅速地抑制宿主细胞的基因表达(mRNA合成与蛋白质合成),但细胞rRNA的合成水平与正常细胞接近.同时SBV还诱导产生一种细胞特异的核基质结合蛋白P105.用放线菌素D处理细胞,导致感染细胞中病毒结构蛋白的合成量及有感染力的子代病毒产量明显下降.实验结果不仅显示了SBV对宿主细胞基因表达的复杂调控关系,而且还表明SBV的非结构蛋白nsP2和衣壳蛋白C可能直接参与这一过程.     

小鼠膀胱上皮的中间层细胞中存在Uroplakins

本文运用超薄切片、冰冻蚀刻及免疫胶体金标记等多种电镜技术并结合免疫组化、免疫荧光染色技术,直观地显示出小鼠膀胱上皮的中间层细胞存在Uroplakins,并在梭形泡膜上形成了与表层细胞类似的AUM结构,而且梭形泡的AUM结构也结合在中间纤维上。蛋白质免疫印迹反应进一步证实中间层细胞含有与表层细胞相同的Uroplakin Ⅰ和UroplakinⅢ等AUM蛋白的主要成份,从而为AUM的发生及其与细胞分化关系的研究提供了重要的实验证据。     

辛德毕斯病毒非结构蛋白nsP2在细胞内的分布

应用免疫电镜技术,直观地显示出辛德毕斯病毒的nsP2蛋白存在于细胞核中以及它在核内的分布.将含有nsP2蛋白的一段SbV的cDNA转染细胞,结果表明,单独表达的nsP2仍可进入细胞核中.     

小鼠膀胱上皮的中间层细胞中存在Uroplakins

本文运用超薄切片、冰冻蚀刻及免疫胶体金标记等多种电镜技术并结合免疫组化,免疫荧光染色技术,直观地显示出小鼠膀胱上皮的中间层细胞存在Ｕｒｏｐｌａｋｉｎｓ,并在梭形泡膜上形成了与表细胞类似的ＡＵＭ结构,而且梭形泡的ＡＵＭ结构也结合在中间纤维上,白质免疫印迹反应进一步证实中间层细胞含有与表层细胞相同的ＵｒｏｐｌａｋｉｎＩ和ＵｒｏｐｌａｋｉｎⅢ等ＡＵＭ蛋白的主要成分,从而为ＡＵＭ的发生及其与细胞分化关系的     

不对称单位膜与膜的不对称性

1959年,J.David Robertson根据电镜超薄切片观察的结果提出了细胞膜结构的单位膜模型,即在电镜下呈现出暗-亮-暗三层结构。外、内暗带(即染色较深的蛋白质和脂类的极性头部分)厚度均约20 ,中间亮带(即染色较浅的脂双分子非极性尾部)厚约35(?),细胞膜总厚度为75-80 。尽管1972年S.Jon Singer和Garth Nicolson提出了细胞膜结构的流动镶嵌模型(fluid mosaic model),取代了单位膜模型,但作为描述电镜下所观察到的细胞膜的结构图象,单位膜这一术语仍沿用至今。