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利用GenBank和UniProt数据库比对MorganellamorganiiJ-8羰基还原酶基因和氨基酸序列,以同源性为依据,结合高效液相色谱(HPLC)检测验证,筛选出5株同样具有转化1-苯基-2-甲氨基丙酮(MAK)产d-伪麻黄碱功能的菌株。选取其中1株BacillusclauseB0658,对其d-伪麻黄碱的生物转化过程进行考察,发现在最优条件下d-伪麻黄碱产量达到128.3mg/L。进一步对B.clauseB0658的亮氨酸脱氢酶基因bcdh进行扩增,以pET28a(+)为载体构建重组质粒并在EscherichiacoliBL21(DE3)中实现表达,通过重纽菌的生物转化实验验证该酶的催化功能。 相似文献
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