子痫前期循环系统标志物sFlt-1的重组表达及化学发光检测方法的建立

目的：表达可溶性fms样酪氨酸激酶-1(soluble fms-like tyrosine kinase-1,sFlt-1)重组蛋白,建立针对sFlt-1的化学发光检测方法。方法：构建pcDNA3.4-sFlt-1-His*6表达载体,转染至HEK293细胞进行重组表达。利用链霉亲和素-生物素亲和体系及双抗体夹心法,实现对sFlt-1的定量检测。结果：该方法的最低检测限为2 pg/mL,线性范围为20～40 000 pg/mL,平均回收率为92%,批内及批间精密度变异系数(variable coefficient, CV)均小于10%,与珀金埃尔默sFlt-1检测试剂盒进行比对的相关系数R²为0.925 2。结论：获得了具有天然生物活性的sFlt-1蛋白,建立了具有良好性能的sFlt-1检测方法,后续进一步开发可应用于子痫前期的诊断筛查。