一种单个胚胎的DNA模板制备方法

建立了一种简单处理单个卵子和早期胚胎制备DNA模板的方法——KOH/DTT-Triton X裂解法,并与TE-蛋白酶K法比较了PCR扩增效率。结果,采用KOH/DTT-Triton X裂解法处理单个卵子或2-细胞胚、8-细胞胚、桑椹胚、囊胚后,作为DNA模板直接进行PCR扩增线粒体DNA片段,3对引物的PCR扩增总成功率为100%（70/70）,而TE-蛋白酶K法处理的单个卵子的PCR扩增总成功率为92.9%（65/70）,二者差异显著（P<0.05）。但两种方法所制备模板的PCR假阳性率均为0。实验设计的KOH/DTT-Triton X裂解法是一种有效的单个早期胚胎的DNA模板制备方法,经一次PCR扩增即能获得清晰的目的DNA条带,能够满足早期胚胎遗传物质检测的需要。     

链霉菌Streptomyces antibioticus NRRL 8167中Naphthgeranine A生物合成基因簇的分析鉴定

【背景】微生物来源的天然产物是小分子药物或药物先导物的重要来源。对链霉菌Streptomyces antibioticus NRRL 8167的基因组分析显示,其包含多个次级代谢产物的生物合成基因簇,具有产生多种新化合物的潜力。【目的】对链霉菌S. antibioticus NRRL 8167中次级代谢产物进行研究,以期发现结构新颖或生物活性独特的化合物,并对相应产物的生物合成基因簇和生物合成途径进行解析。【方法】利用HPLC图谱结合特征性紫外吸收和LC-MS方法,排除S. antibioticus NRRL 8167产生的已知化合物,确定具有特殊紫外吸收的化合物作为挖掘对象,然后利用正、反相硅胶柱色谱、高效液相色谱等技术对次级代谢产物进行分离纯化,分离化合物。利用质谱及核磁共振光谱技术对化合物结构进行解析和鉴定;提取链霉菌S. antibioticus NRRL 8167基因组DNA,利用PacBio测序平台进行基因组测序;利用生物信息学对基因组进行注释,并对合成该化合物的基因簇进行定位分析,推导其生物合成途径。【结果】确定这个化合物是NaphthgeranineA,属于聚酮类化合物。全基因组序列分析发现S.antibioticusNRRL8167基因组含有28个次级代谢产物生物合成基因簇,其中基因簇20可能负责Naphthgeranine A的生物合成,并对其生物合成途径进行了推导。【结论】基于紫外吸收光谱和质谱特征,从S. antibioticus NRRL 8167菌株的发酵提取物中分离鉴定了一个聚酮类化合物Naphthgeranine A。该菌株的全基因组测序为其生物合成基因簇的鉴定提供了前提,对Naphthgeranine A生物合成基因簇和生物合成途径的推测为进一步研究这个化合物的生物合成机制奠定了基础。     

浅谈营林技术对林业有害生物的控制效果

森林病虫害一直是影响森林健康的直接杀手,对森林的危害十分巨大,关乎到我国的国际民生。为了更好地发展森林资源,建设绿色环保的生态环境,我们必须保护好我们赖以生存的森林资源,没有森林我们将失去最重要的天然保障,而且水资源,空气都会相继枯竭,没有森林资源我们人类和动物都无法生存。因此,森林资源的重要性不言而喻,我们一定要充分利用营林技术好好预防和控制森林病虫害,为建设美好家园做贡献。本文作者结合多年来的工作经验,对进行了研究,具有重要的参考意义。     

鄂中地区8136例妇女HPV感染导流杂交法亚型检测的临床意义

目的分析鄂中地区人群HPV感染基因型别。方法采集8136例鄂中地区2009年8月至2010年7月武汉市商业职工医院门诊与住院患者宫颈口及颈管脱落上皮细胞,应用导流杂交法进行HPV分型检测。结果HPV阳性感染1437例（17．66％）,其中高危型感染检出1189例（占82．67％）,低危型感染检出141例（占9．74％）,中国人群常见亚型感染检出305例（占21．16％）,多重感染检出369例（26．68％）。单一感染者中高危型833人（57．97％）,低危型感染者72人（5．01％）,中国人群常见亚型感染者163人（11．34％）。根据年龄分层,〈25岁组HPV感染率相对较高,为21．17％（P〈0．05）;HPV高危型感染组中〈25岁比例较高,达17．80％。在1437例HPV阳性感染者中,单一感染者共1068例（74．32％）,二重感染占18．72％。最常见的交叉感染是高危型＋中国人群常见亚型合并感染（8．28％）。结论导流杂交法HPV基因型分型检测可为宫颈疾病流行病学及早筛早治提供重要线索,对于发现HPV感染的高危人群、积极控制HPV感染、具有重要意义。     

东南阿拉斯加生态演替大课堂

2005年国际候鸟日,我搭乘阿拉斯加航空公司的航班,从旧金山湾区出发,追随千百万北上的候鸟,飞向东南阿拉斯加。我将和来自澳大利亚、北美以及阿拉斯加当地的野外探险者一起,在那里的海岛上进行为期一周的野生探险和生态考察。东南阿拉斯加是阿拉斯加州东南角上一块很有地理特点的地区,它的东面与加拿大的高山地带接壤,其余部分则由约1000座大小不等的岛屿组成,这些岛屿合起来叫做亚历山大群     

毛果杨NADP-苹果酸酶基因家族分析

本文分析C3树木毛果杨NADP-苹果酸酶（Populus trichocarpa NADP—malic enzyme,PtNADP-ME）基因家族及其表达特性。NADP—MEN源性检索表明,毛果杨基因组上存在5个PtNADP—ME基因,其中PtNADP-ME4编码区不完整。RT-PCRE及DNA测序结果表明,PtNADP-ME家族5个基因均转录表达。进化树构建显示,毛果杨PtNADP-ME家族5个成员分属于植物NADP—ME家族的3个进化分枝。半定量RT-PCR表明,5个PtNAP-ME家族基因没有明显的组织特异表达模式。然而,不同的PtNADP-ME基因转录表达对NaCI、PEG及甘露醇3种逆境胁迫应答与否以及应答方式存在明显的差异。     

棉毛橐吾根茎中化学成分研究

采用硅胶、Sephadex LH-20凝胶、Toyopearl HW-40凝胶及Diaion HP-20树脂等色谱方法从云南丽江棉毛橐吾中分离得到化合物18个,通过理化手段及波谱技术分别鉴定为:呋喃艾里莫芬-14β,6α-内酯(1)、β-谷甾醇(2)、惕格酸(3)、棕榈酸(4)、十九烷酸甲酯(5)、艾里莫芬-7(11)-烯-12,8α(14β,6α)-二内酯(6)、8β-甲氧基艾里莫芬-7(11)-烯-12,8α(14β,6α)-二内酯(7)、1-O-十六烷酰基甘油酯(8)、8β-羟基艾里莫芬-7(11)-烯-12,8α(14β,6α)-二内酯(9)、对羟基桂皮酸甲酯(10)、对羟基苯乙酮(11)、伞形花内酯(12)、3,4-二羟基苯乙酮(13)、胡萝卜苷(14)、1,5-二咖啡酰奎宁酸(15)、对羟基桂皮酸(16)、咖啡酸(17)及七叶内酯(18),其中化合物4~5,8,10,13,15及17,18为首次从该植物中分离得到。     

黄伞单孢杂交育种的初步研究

以采自山西省五台山和关帝山的WT3 和GD3两个黄伞纯化菌株为材料,显微观察了黄伞担孢子萌发的菌丝及交配特征,在PDA培养基上担孢子首先在其一端萌发出菌丝,宽度约3~4μm,接着产生分枝呈散发状向四周延伸。试验表明:单核菌丝体上可产生类似原基的凸状体,但不具结实性。两个单核菌丝交配后出现锁状联合是形成双核菌丝的典型特征,并具有结实性。     

氧化槐果碱通过调控lncRNA DUXAP8/miR-519b-3p轴影响宫颈癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的实验研究

为了探讨氧化槐果碱(OSC)对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及作用机制,本研究将HeLa细胞分为对照组(Con组)、OSC组、转染DUXAP8小干扰RNA(si-DUXAP8)组、转染小干扰RNA阴性对照(si-NC)组、OSC+DUXAP8过表达载体(pcDNA-DUXAP8)组和OSC+空载体(pc...     

质谱流式技术用于单细胞检测

质谱流式技术(mass cytometry)是利用质谱原理对单细胞进行多参数检测的流式技术,能够在单细胞水平实现超过50种标志物的同时测量,显著增强了对细胞生长进程和复杂细胞系统的评估能力。该文简要介绍了质谱流式技术的基本工作原理,并从金属元素标记、质量分析器、高维单细胞数据处理等方面展开论述,阐明设计新型金属元素标签和选择飞行时间质谱的必要性,归纳分析高维单细胞数据的算法并总结各种算法的优点和局限性。