变性梯度凝胶电泳在微生物生态学中的应用

变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)是目前在微生物生态学上应用比较广泛的技术之一,具有简便、准确可靠和重复性好等优点。对DGGE的原理、流程、各项技术要点和在微生物生态学上的应用等方面进行了详细地论述,同时归纳和总结了DGGE的优缺点和局限性。     

一株产漆酶细菌的分离鉴定及酶学性质研究

[目的]分离获得产漆酶的细菌菌株,研究漆酶的酶学性质并应用于染料脱色.[方法]利用含铜的富集培养基筛选产漆酶细菌;通过形态特征、生理生化试验及16SrDNA序列分析等方法进行鉴定;以丁香醛连氮为底物测定漆酶的酶学性质;通过测定染料在最大吸收波长下吸光值的变化评价漆酶对染料的脱色效果.[结果]从森林土壤中筛选到一株漆酶高产菌株LS05,初步鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens);菌株LS05的芽孢漆酶以丁香醛连氮为底物的最适pH为6.6,最适温度为70℃;该酶具有较好的稳定性,经70℃处理10h或在pH 9.0条件下放置10d后可保留活性.对抑制剂SDS和EDTA具有一定的抗性,在碱性条件下可有效脱色不同的工业染料,RB亮蓝、活性黑和靛红1h内的脱色率达93％以上.[结论]Bacillus amyloliquefaciens LS05的芽孢漆酶在高温和碱性条件下稳定性强,相对于真菌漆酶具有更好的工业应用特性,可有效用于工业染料废水的处理.     

钩状木霉生物合成纳米银及其杀菌性能

【目的】以钩状木霉为微生物材料合成纳米银粒子,并对其杀菌性能进行测定。【方法】将钩状木霉与2 mmol/L的Ag NO3溶液混合暗培养合成纳米银,采用UV-vis、XRD和TEM等方法对纳米银进行表征;利用原子吸收光谱仪和热重分析仪测定并计算银离子的转化率和纳米银的产率;以大肠杆菌和枯草芽孢杆菌为受试菌株检测纳米银的杀菌性能。【结果】钩状木霉与硝酸银混合的培养液颜色为红褐色,UV-vis图谱显示在420 nm左右出现了强的吸收峰;XRD图谱出现了4个特征性衍射峰,分别对应纳米银的4个晶面;TEM照片可以看出纳米银多数为球形,具有单分散性;粒度分布仪显示纳米银具有很窄的粒径分布,在1-13 nm之间,平均粒径为6.69 nm;根据原子光谱吸收仪测定的结果得到银的转化率为84.41%,根据热重分析结果得到纳米银的产率为67.12%;纳米银对大肠杆菌的MBC为10 mg/L,MIC为7 mg/L;对枯草芽孢杆菌的MBC为5 mg/L,MIC为4 mg/L。【结论】钩状木霉与Ag NO3溶液混合培养可以合成纳米银。合成的纳米银大小均匀,粒径小且分布很窄,具有面心立方结构,是纯净的,产率约为67.12%;纳米银对枯草芽孢杆菌的致死效果好于对大肠杆菌的致死效果。     

基于PCR 技术的人脑基因可变剪接差异性研究

目的:对人脑的基因可变剪接位点差异性进行分析。方法:通过RNA-Seq得到的转录组数据,分析推测出在不同年龄的7对样本的大脑前额叶皮层(prefrontal cortex,PFC)表达的某些基因具有可变剪接位点的差异性;为验证此推测,设计7对引物,提取不同年龄样本的RNA,通过反转录合成cDNA,采用PCR技术扩增目的序列。结果:在已剪接和(或)未剪接产物预期片段处有明显的条带。结论:通过Quantity One软件分析后,确定在不同年龄间存在可变剪接差异。基于PCR技术的基因可变剪接分析对RNA-seq数据集的预测结果进行验证是一种有效新颖的PCR新应用。