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荧光定量PCR检测人巨细胞病毒的方法学建立 总被引：1，自引：0，他引：1
目的建立人巨细胞病毒（HCMV）的TaqMan MGB探针荧光定量PCR（FQ—PCR）检测方法。方法选取HCMV MIE exon4为PCR扩增靶序列,经TA克隆构建重组质粒作为定量标准品,经FQ—PCR反应条件的优化及方法学评价,再将其应用于临床检测。结果FQ—PCR最适循环参数为：95℃ 5 min;95℃ 20 s,60℃ 60 s（40 cycles）,20μl最适反应体系为：2．0mmol／L Mg^2＋、0．5μmol／L引物、1．5μmol／L探针、200μmol／L dNTP、2110×buffer、1．0 U Taq酶、2．0μl DNA模板。检测批内CV（变异系数）值为1．32％,批间CV值为1．96％;特异性较好;线性范围为10^2-10^8copies／μl。结论成功地建立了检测HCMV的FQ—PCR法,完全适用于临床检测。 相似文献
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目的:探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)儿童血浆Orexin-A水平以及手术后血浆Orexin-A水平的变化.方法:对96例经多导睡眠监测(PSG)确诊的OSAHS患儿行腺样体和(或)扁桃体切除术,选择29例儿童作为对照组.采用放射免测定法,测定OSAHS患儿术前、术后6个月血浆Orexin-A水平.记录OSAHS患儿PSG检查结果AHI和最低血氧(LSaO2).结果:OSAHS组血浆Orexin-A水平与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01),术后6个月血浆Orexin-A水平与术前比较差异有统计学意义(P＜0.01).血浆Orexin-A与AHI呈正相关(r=0.542,P＜0.01),与最低血氧(LSaO2)呈负相关(r=-0.798,P＜0.01).结论:OSAHS患儿Orexin-A水平升高,手术治疗可使血浆Orexin-A水平下降,血浆Orexin-A水平和AHI、最低血氧(LSaO2)有相关性. 相似文献
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