表达昆虫特异性神经麻痹毒素AaIT的杀虫杆状病毒的构建

根据杆状病毒核多角体基因及植物基因的密码子选择偏向、G+C含量和密码子第三位碱基的G+C含量,同时综合在真核系统中影响基因转录、翻译及影响mRNA稳定性等因素,在不改变所编码的氨基酸序列的基础上,设计并人工合成了昆虫特异性神经蝎毒素AaIT基因。合成的AaIT基因与合成的gp67信号肽DNA序列正确融合后通过杆状病毒转移载体pSXIV VI⁺X3体内重组到粉纹夜蛾多角体病毒(Trichoplusia ni nuclear polyhedrosis virus,TnNPV)上,得到重组病毒TnNPV-AaIT。经Southern blotting验证了AaIT基因整合在TnNPV基因组中,SDS-PAGE证明AaIT基因在重组病毒中的表达。通过用重组病毒口服感染供试昆虫,证明了含AaIT基因的重组病毒能显著缩短杆状病毒的杀虫时间,提高杀虫效率。这是迄今为止我国构建的第一株具有实用价值和应用前景的基因工程病毒。     

叔胺类局部麻醉药与细胞膜作用的分子机制研究

利用人血红细胞胞膜为实验材料,研究了叔胺类局部麻醉药对膜上(Na+,K+)-ATPase,Mg2+-ATPase的抑制作用及不同pH下局麻药解离情况的不同对其抑制能力的影响,还用DPH为荧光探剂测量了局麻药在有效抑制浓度内对膜流动性的影响。根据我们的结果分析,叔胺类局麻药先作用于细胞膜的脂质区域,主要依靠疏水作用抑制神经功能蛋白活性,其中以非质子化形式为主要作用形武,离子化形式也有一定抑制作用,但较弱,最后导致兴奋传导受阻产生麻醉作用。叔胺类局麻药对膜流动性的影响,是一种伴随效应。