重组质粒pVAX1-HER2-Flt3L构建及抗肿瘤效果北大核心

[目的]将具有免疫增效功能的Flt3L分子与HER2抗原融合表达,评价Flt3L是否能够提高抑瘤效果。[方法]将人的HER2编码区基因和小鼠Flt3L编码区基因用Furin/2A进行连接,全基因合成后,克隆至pVAX1载体,从而构建重组质粒pVAX1-HER2-Flt3L,同时构建对照质粒pVAX1-HER2和pVAX1-Flt3L。将上述质粒分别注射正常小鼠和稳定表达HER2抗原的荷瘤小鼠,评价其免疫原性和抑瘤效果。[结果]将各组重组质粒接种于Bal B/c小鼠后,抗体检测结果显示:重组融合质粒pVAX1-HER2-Flt3L组诱导产生的平均抗体滴度为2060,而单纯抗原质粒pVAX1-HER2组诱导产生的平均抗体滴度为1720;ELISPOT检测结果显示:重组融合质粒pVAX1-HER2-Flt3L组诱导产生的平均斑点数为133,而单纯抗原质粒pVAX1-HER2组诱导产生的平均抗体滴度为110;与此一致的是,在荷瘤小鼠中,该融合质粒也显示出更加显著的抑制肿瘤生长的效果,达到47%,而单纯抗原质粒仅为32%。[结论]Flt3L具有一定的免疫增效能力,能够显著提高表达HER2抗原重组质粒的抑瘤效果,深入研究其免疫保护机制具有潜在的临床意义。     

新分离的脂肪来源基质细胞与培养的脂肪干细胞用于肝纤维化治疗的效能比较

目的:比较新分离的脂肪来源基质细胞(f ASC)与脂肪干细胞(ASC)在抗大鼠肝纤维化方面的治疗潜能。方法:利用胶原酶解法获得新鲜分离的f ASC,体外扩增培养获得不同代数的ASC,用流式细胞仪分析不同代数细胞的表型;建立大鼠肝纤维化模型,并将f ASC或ASC用于干细胞移植治疗,通过血液肝功能指标检测、RT-PCR、HE染色和天狼星红染色评价2类细胞的治疗效果。结果:f ASC和ASC均可显著改善肝纤维化的大鼠肝脏功能,二者用于治疗肝脏疾病的疗效相似。结论:在肝脏疾病的脂肪干细胞移植治疗中,应当综合考虑移植的干细胞体外传代次数和治疗效果间的关系。