改良质粒快提法及其在酶切检查中的应用

基因重组后,从转化的细菌中快速提取小量质粒作限制性酶切检查,以筛选出阳性克隆,现已或为分子生物学实验的一项常用技术,至今已建立了多种方法。目前常用的为碱法和煮沸法。虽然现今所用的最新方法比传统的方法大大简化,但仍然相当耗时,即使是一个熟练的技术人员,提取获得18—24个样品仍需约2.5—3小时,这还不包括酶切、电泳等步骤。此文介绍我们改良的快提法,此法可在10分钟之内迅速有效地提取质粒,结合改进随后的酶切、电泳等过程,即可在三小时内筛选18个样品。