琉球病毒、索尔韦齐病毒、苏里斯病毒等三种沙粒病毒实时荧光RT-PCR检测方法研究

建立可检测琉球病毒(Ryukyu virus,RYKV),索尔韦齐病毒(Solwezi virus,SOLV)以及苏里斯病毒(Souris virus,SOUV)等三种沙粒病毒的实时荧光定量RT-PCR检测方法.分析三种病毒流行病学分布特征,从国际公共数据库搜索下载基因组序列,进行比对分析,确定检测靶标,借助primer premier 6.0生物信息学软件,设计引物和探针,建立实时荧光定量RT-PCR检测方法,利用化学合成和体外转录方法制备模拟样本,比较评价三种方法的检测限、特异性、重复性特征.所建实时荧光定量RT-PCR检测方法均可有效扩增检测病毒RNA靶标,检测限分别为40拷贝/μL、7拷贝/μL和15拷贝/μL,检测汉城病毒、汉滩病毒、登革病毒Ⅰ～Ⅳ型分离株、发热伴血小板减少综合病毒及30份健康人血清样本无非特异性扩增,三种病毒相互间以及其他8种出血热相关沙粒病毒RNA间无交叉反应,重复性比较分析显示变异系数均在2％以内.本研究建立的检测RYKV、SOLV和SOUV三种沙粒病毒的实时荧光RT-PCR方法具备用于相关疑似感染者临床样本、宿主动物标本以及进出口物品的筛查检测的潜力,但因未经基于实际病毒感染样本的比较评价,检测结果的解释仍具有一定的局限性.     

2018-2019年云南省部分地区鼠类携带汉坦病毒基因型别分析

为了解云南省汉坦病毒的分子流行病学特征,本研究在云南省祥云县、泸西县、禄丰县和楚雄市4个地区布点,采集鼠类动物标本,运用实时荧光RT-PCR检测鼠肺标本中的汉坦病毒中的汉滩病毒和首尔病毒核酸,通过PCR扩增S节段的全基因序列,并进行核苷酸同源性分析和遗传进化分析。结果共捕获鼠类动物70份,包含10个鼠种,其中褐家鼠30只,占42.9%,其次是鼩鼱12只,占17.1%;核酸检测阳性标本19份,均为首尔病毒,检出率为27.1%,源自祥云县的标本检出率在四个地区中最高(32.0%)。从鼠肺标本中扩增得到8条汉坦病毒S节段全基因序列,相似性为87.0%~99.7%,遗传进化分析显示基因序列聚集形成2个分支,一个分支属于S1亚型,另一个分支在遗传进化分析和blast比对分析中与其他亚型同源性均小于90%,属首尔病毒中独立的新的遗传进化分支,提示了云南省鼠类动物间多基因亚型首尔汉坦病毒流行,应进一步关注由宿主动物溢出感染人的潜力。     

静脉补充鱼油脂肪乳对呼吸科ICU患者炎症反应治疗作用观察

目的：探讨静脉补充鱼油脂肪乳对呼吸科ICU患者炎症反应的治疗作用。方法：选取在新桥医院呼吸科重症ICU住院并行IMV呼吸机辅助呼吸患者55例,分为2组,试验组26例、对照组29例,除采用常规治疗外,2组均采用等氮等热量肠内营养结合静脉营养给予营养支持,试验组患者给予肠内营养联合添加鱼油脂肪乳静脉营养支持,对照组给予肠内营养联合未添加鱼油脂肪乳静脉营养支持。两组患者分别在使用营养支持前1天和支持后第6天检测炎症反应指标C反应蛋白（CRP）水平,肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）水平,记录患者入住ICU时间、机械通气天数。结果：2组患者手术前 CRP、TNF-α、IL-6无显著性差异（P＞0.05）。使用营养支持后第6天试验组炎症反应指标CRP、TNF-α、IL-6浓度显著低于对照组,有统计学差异（P＜0.05）,机械通气时间明显缩短（P＜0.05）、入住ICU时间无统计学差异（P>0.05）。结论：鱼油脂肪乳能够改善呼吸系统危重症患者的炎症反应,并有益于缩短机械通气天数。     

黄土旱塬区免耕玉米田土壤呼吸对降雨的响应

在多年定位试验的基础上,采用LI-8150-16多通道土壤碳通量测量系统对传统耕作和免耕处理下玉米田的土壤呼吸进行了连续观测,以探讨不同耕作措施处理下土壤呼吸对降雨的响应。结果表明:降雨发生瞬间,土壤呼吸受应激反应影响迅速降低,传统耕作和免耕处理下分别较降雨前降低62.9%—92.9%和35.8%—56.9%;降雨后,传统耕作和免耕处理土壤呼吸的降幅范围分别为31.5%—89.2%和15.7%—59.9%;土壤体积含水量接近于18%时,传统耕作下土壤呼吸比免耕下高51.8%,当土壤体积含水量高于30%时,传统耕作下土壤呼吸比免耕处理下低43.0%,表明传统耕作土壤呼吸更易受土壤水分的影响,波动幅度大;传统耕作处理下土壤呼吸随土壤温度的升高而增大,免耕处理下土壤呼吸随土壤温度的升高变化不明显;土壤体积含水量较小(20%)时,不同耕作处理下土壤呼吸均随土壤含水量增加而增加,含水量较高(30%)时则均随土壤含水量的升高而减小,两种情况下均为免耕处理的变化速率更大;双因子线性模型可较好地描述玉米田土壤呼吸对温度和水分变化的响应。     

两种不同营养配方预进餐对2型糖尿病住院患者血糖影响研究

目的：比较低血糖指数（GI）全营养素与高蛋白营养素2种不同营养配方预进餐对2型糖尿病患者血糖控制效果的影响。方法：回顾性分析115例2型糖尿病患营养治疗记录,其中高蛋白营养素治疗组31例为高蛋白组、低GI全营养素治疗组39例为低GI组、无肠内营养治疗干预组45例为对照组,每组都进行糖尿病饮食指导、教育并编制糖尿病膳食食谱。观察比较3组患者营养干预前,营养干预后第1d、第3d、第7d的空腹、餐后2h血糖控制情况。结果：与对照组相比,高蛋白组与低GI组空腹血糖在干预前后均没有明显差异,无统计学意义（P＞005）;餐后2h血糖在干预前、第1d没有差异,无统计学意义（P＞005）,而在第3d、第7d血糖明显下降,有统计学意义（P＜005）。与低GI组相比,高蛋白组空腹血糖和餐后2h血糖干预前后均没有明显差异,无统计学意义（P＞005）。结论：不同营养配方预进餐有利于2型糖尿病患者血糖控制,尤其是餐后2h血糖控制,2种营养配方控制血糖效果相似。     

LncRNA GCMA在近远端胃癌组织中表达及对癌细胞的凋亡作用

[目的]探讨LncRNA GCMA在近远端胃癌组织中的表达及对胃癌细胞的凋亡作用.[方法]检测近远端胃癌组织和癌旁正常组织LncRNA GCMA的表达;用空白质粒、LncRNA GCMA抑制剂、过表达的LncRNA GCMA质粒转染胃癌AGS细胞,RT-PCR法、TUNEL染色法检测胃癌细胞凋亡率,Western Bl...     

发热伴血小板减少综合征病毒在不同环境条件下的稳定性研究

为评估发热伴血小板减少综合征病毒(Severe fever with thrombocytopenia syndrome virus, SFTSV)在环境中的稳定性，本研究比较分析了实验室制备的SFTSV在不同介质表面的稳定性以及温度、自然通风干燥和常用酒精消毒剂等因素对其生存能力的影响。不同时间点收获的病毒样本，通过接种于Vero细胞中传代培养、空斑试验和实时荧光定量RT-PCR等方法测定病毒的感染性、滴度和复制培养过程中的动态变化。结果显示，在室温(约25℃)自然通风干燥条件下，不同介质表面的SFTSV感染性快速下降，在硬币、塑料等介质表面的病毒感染性可维持24 h，但病毒感染性滴度24 h内显著下降分别约10^4.46倍和10^4.6倍，在无纺布和纸张表面的病毒感染性滴度在6 h内就下降分别约10^3.82倍和10^4.12倍。如果将SFTSV置于密闭湿润环境中，病毒感染性可维持长时间的稳定性，24 h病毒感染性滴度下降不明显，1周内下降约10^1.49倍，在3周时仍可通过细胞培养...     

白细胞介素6和病毒感染与免疫

白细胞介素6(Interleukin 6,IL-6)是一种多效性细胞因子，对机体免疫系统和非免疫系统的细胞均有较大影响，可发挥促炎或抗炎作用，影响机体生理平衡。病毒感染致病往往包括直接损伤和免疫病理机制，免疫调节是影响疾病进程和临床结果的重要干预靶点。IL-6拮抗剂的临床应用经验提示，靶向该细胞因子可改善疾病结局，但如何以及何时阻断是仍需进一步研究的重要领域。为增加对IL-6在疾病进程中的作用机制的理解，我们对IL-6主要功能、信号转导途径以及在病毒感染与免疫中的作用进行了初步的综述分析。