河南省部分地区人类免疫缺陷病毒1型耐药性发生和演变的队列研究

目的 了解河南省某地人类免疫缺陷病毒(HIV)耐药性毒株的进化演变规律.方法 将河南省南部某地74例接受齐多夫定(AZT)+去羟肌苷(ddI)+奈韦拉平(NVP)联合抗病毒治疗的艾滋病患者纳入研究队列,分别在抗病毒治疗后3、6、12、18个月进行随访调查,通过逐一访谈了解一般情况、服药方案、服药依从性及保障措施、抗病毒治疗前后的临床表现等,同时采集14 ml EDTA抗凝静脉血,检测CD4/CD8细胞数、病毒载量及基因型耐药性.结果 核苷类反转录酶抑制剂中,发生频率最高的耐药突变位点是:67、118、151和215.治疗3、6、12、18个月时AZT耐药发生率分别为6.76%、13.51%、14.86%和9.46%,ddI的耐药发生率分别为2.70%、6.76%、8.11%和5.45%,AZT的耐药发生率高于ddI,核苷类反转录酶抑制剂的耐药性呈现出先上升后下降的趋势.非核苷类反转录酶抑制剂的耐药发生率高于核苷类反转录酶抑制剂,发生频率最高的耐药突变位点是:103和181.治疗3、6、12、18个月时,NVP耐药发生率分别为9.46%、18.92%、22.97%和32.43%.非核苷类反转录酶抑制剂呈现出持续上升的耐药发生趋势.耐药和不耐药患者的病毒载量和CD4+T淋巴细胞计数无显著性差异.服药依从性差可能是耐药发生的主要影响因素.结论 本组患者中已出现对非核苷类反转录酶抑制剂的高度耐药,服药依从性是耐药发生的主要影响因素.应加强服药的监督管理,改善患者的服药依从性.     

山羊GOLA-DQB1基因外显子2多态性与免疫性状的相关分析

利用PCR-RFLP技术, 对莱芜黑山羊、鲁波山羊和波尔山羊3个山羊种群共 175 只个体的GOLA-DQB1基因外显子2进行遗传多态性研究, 并对山羊种群的血液免疫指标的效应进行了分析。结果表明: 3个山羊种群共检测到(AA、BB、CC、AB、AC、BC、DD)7种基因型, GOLA-DQB1基因外显子2的第24、151位的碱基表现出多态性。多数指标品种效应是主要效应。莱芜黑山羊中, BC基因型的淋巴细胞百分比(W-SCR)显著高于AC 、CC基因型(P<0.05), 中性球比例(W-LCR)显著低于CC基因型(P<0.05), 大型白细胞数(W-LCC)低于AC、CC基因型, 但差异不显著(P>0.05)。波尔山羊中, BC基因型的W-LCC低于AA 、AB 、BB基因型, 但差异不显著(P>0.05)。鲁波山羊中, BC 、AC基因型的W-LCC显著低于AA基因型(P<0.05)。揭示GOLA-DQB1基因与血液免疫性状有一定的相关性。     

一株降烟碱细菌的筛选、鉴定及其降解特性研究

以烟碱为唯一碳源,从湖南张家界烟草种植地的土壤中分离得到一株降解烟碱能力较好的菌株。经常规形态观察和生理生化实验结果表明,该菌为放射形土壤杆菌或根癌土壤杆菌(Agrobacterium radiobacter／tumefaciens)。研究表明,该菌的降解烟碱最适pH和温度分别为7.0和30℃。该菌能够利用烟碱为唯一碳源,在含烟碱的培养基中发酵液呈淡黄色-绿色-墨绿色-深综色变化,培养48h后,烟碱的降解率可达71%,具有较好的烟草工业应用前景。     

正交试验法优选超声提取知母皂甙的研究

用正交实验法对知母(Anemarrhena asphodeloides Bge.)中总皂甙的超声提取工艺进行了研究,采用正交表L9(34),以提取剂的体积分数、料液比(mA∶VB)、提取时间以及提取次数为因素,以知母总皂甙元的含量为指标,用紫外分光光度计法进行检测,所得提取液经大孔树脂纯化,得到的最佳提取参数和结果为:以φ(乙醇)=75%的水溶液为提取剂、提取料液比mA∶VB=1∶8、提取次数2次、每次30min,提取率92.8%,纯度91.0%。结果证明了对知母而言,超声提取法是一种提取效率高、操作简便、省时的方法。     

外源glnA基因干扰大肠杆菌的代谢

采用分子生物学的方法构建了含Bacillus subtilis glnA基因的重组菌株Escherichia coli DH5α(pMD19-glnA),用毛细管电泳和核磁共振对重组菌株的转化谷氨酸的产物进行定性鉴定,并进一步通过荧光定量RT-PCR测定谷氨酰胺合成酶基因(glnA)mRNA水平的相对表达量,最后用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳对蛋白的相对表达情况进行了分析。结果表明重组菌株并没有增加谷氨酰胺的产量,而是明显增加了γ-氨基丁酸(GABA)的产量。实验表明重组菌株中的glnA基因可以正常转录,但是谷氨酰胺合成酶的蛋白表达量并没有增加。这种外源基因干扰大肠杆菌代谢的现象值得进一步研究。